【摘要】：目的:間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有自我更新和多向分化潛能的組織干細胞,其主要來源骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)被認為具有潛在的細胞治療價值,但在嚴重感染、骨髓腫瘤或隨著年齡的增長骨髓細胞數(shù)及增殖、分化能力均明顯下降的情況下,就無法滿足臨床需求,尋找豐富的、可儲備的MSCs的新來源很有必要。本研究擬從人胎盤組織中分離培養(yǎng)獲得人胎盤源間充質樣干細胞(human placenta derived mesenchymal-like stem cells,HPMSCs),研究其生物學特性,以及移植治療腦出血的可行性,并對治療機制進行初步探討。 方法:(1)將胎盤組織經(jīng)酶消化和貼壁培養(yǎng)獲得的細胞,用免疫熒光標記、流式細胞儀檢測和免疫細胞化學的方法分析表型;將其與T淋巴細胞共培養(yǎng),通過3H-TdR摻入,β液閃計數(shù),分析其免疫源性;(2)采用叔丁對甲氧酚(butylated hydroxyanisole,BHA)、復方丹參注射液(dan-shen root parenteral solmion)、β-二巰基乙醇(β-dimersol,BME)等對培養(yǎng)的細胞向神經(jīng)方向誘導分化,繼而采用免疫細胞化學、RT-PCR/Real-time PCR等方法對分化的細胞進行鑒定;(3)利用自體未肝素化新鮮血回注法建立大鼠尾殼核出血模型,并將Hoechst33258體外標記的HPMSCs移植入大鼠尾殼核出血模型,熒光顯微鏡觀察移植細胞的分布,用提高的軀體擺動實驗(elevated body-swing test,EBST)和Bederson的4級評分標準進行模型的神經(jīng)功能評價;(4)體外培養(yǎng)人胚胎來源的神經(jīng)前體細胞(neural precursor cells,NPCs),分別用HPMSCs和人骨髓間充質干細胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,HBMSCs)培養(yǎng)上清對NPCs進行趨化實驗,在用ELISA法檢測HPMSCs培養(yǎng)上清中含基質細胞衍生因子-1alpha(stromal cell derived factor-1 alpha,SDF-1α)及用免疫熒光標記、流式細胞儀檢測NPCs表達SDF-1α的唯一配體CXCR4的基礎上,通過阻斷試驗證明HPMSCs及HBMSCs培養(yǎng)上清對NPCs的趨化作用是由這對分子介導的;用免疫熒光標記、流式細胞儀檢測TNF-α和gp130信號激發(fā)對NPCs上CXCR4表達的影響,進
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R329.2;R651

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李秀森,郭子寬,楊靖清,劉曉丹,侯春梅,唐佩弦,毛寧;骨髓間充質干細胞的生物學特性[J];解放軍醫(yī)學雜志;2000年05期

2 沈麗琴,張學光,顧宗江,周劍影,傅晉翔,戴宏;gp130單抗協(xié)同其他造血生長因子對人臍血造血細胞體外集落形成作用[J];上海免疫學雜志;2000年05期

3 楊立業(yè),劉相名,惠國楨,費儉,郭禮和;丹參誘導鼠骨髓間充質細胞向神經(jīng)元分化[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2003年01期

4 邱玉華,張學光,季玉紅,居頌光,王廷;鼠抗人CD28分子單克隆抗體的研制及生物學特性研究[J];細胞與分子免疫學雜志;2001年04期

5 劉仕勇,楊輝;神經(jīng)干細胞和祖細胞[J];細胞生物學雜志;2000年04期

6 周勝利,宋劍秋,旭日;胎盤組織及血液中含有豐富的造血干/祖細胞[J];中國實驗血液學雜志;2002年02期

7 顧宗江,陸肇陽,邱玉華,張學光;gp130單克隆抗體B-S12的生物學特性研究[J];中華微生物學和免疫學雜志;2000年02期

8 周照華,施勤,王江方,潘建忠,張學光;激發(fā)型抗CD_(40)單克隆抗體對CD_(40)~+B細胞惡性腫瘤的生長抑制和促凋亡作用[J];中華血液學雜志;2000年05期

9 曾鳳華,沈柏均,王紅美,時慶,侯懷水,馬秀峰;胎盤造血功能的初步研究[J];中華血液學雜志;2000年06期

10 邱玉華,季玉紅,郭玲,周照華,王月丹,傅晉翔,張學光;鼠抗人B7-1分子功能性單克隆抗體的制備及生物學特性[J];中國免疫學雜志;2000年11期

本文編號：2724522