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多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥機(jī)制及同源性研究

發(fā)布時(shí)間:2017-03-28 03:00

  本文關(guān)鍵詞:多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥機(jī)制及同源性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:研究目的 1.明確我院臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素的敏感性和對(duì)其他常用抗生素的耐藥現(xiàn)狀。 2.揭示鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素敏感性下降的可能機(jī)制。 3.了解我院臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌的同源性情況。 研究方法 收集我院2012年1月至2012年12月臨床分離的74株非重復(fù)鮑曼不動(dòng)桿菌,其中64株對(duì)替加環(huán)素不敏感(tigecycline non-susceptible A. baumannii,TNAB),10株對(duì)替加環(huán)素敏感(tigecycline susceptible A. baumannii,TSAB). 1.應(yīng)用瓊脂稀釋法測(cè)定74株鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)18種常用抗生素的最小抑菌濃度(Minimal inhibitory concentration, MIC),應(yīng)用肉湯微量稀釋法測(cè)定74株鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素的MIC。 2.應(yīng)用PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)主要外排泵基因(adeABC、adelJK、adeFGH、abeM、adeSR及adeDE)、tetX及tetXl基因進(jìn)行篩選。 3.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time PCR)技術(shù)測(cè)定adeB、adeJ、adeG和abeM基因的表達(dá)情況。 4.應(yīng)用外排泵抑制劑羰基氰氯苯腙(carbonyl cyanide3-chlorophenylhydrazone,CCCP)、苯丙氨酰-精氨酸-p-苯胺(phenyl-arginin-β-naphthylamide, PAβN)、N-甲基吡咯烷酮[1-(1-naphthylmethyl)-piperazine, NMP]、利血平和維拉帕米對(duì)替加環(huán)素的外排泵進(jìn)行抑制試驗(yàn)。 5.應(yīng)用多位點(diǎn)序列分型(Multilocus sequence typing, MLST)技術(shù)和脈沖場(chǎng)凝膠電泳(Pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)技術(shù)了解鮑曼不動(dòng)桿菌的分子流行病學(xué)情況。 6.對(duì)感染有多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的TNAB和TSAB兩組患者基本情況進(jìn)行回顧性分析。 研究結(jié)果 1.74株非重復(fù)菌均為多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌,仍保持較高敏感性的抗生素為多粘菌素。 2.大部分菌株同時(shí)攜帶有adeABC、adelJK、adeFGH和abeM外排泵基因,1株TSAB菌株同時(shí)攜帶有adeABC和adeDE基因,12株(18.8%)TNAB菌株攜帶有tetX1基因。 3.相比TSAB組菌株,TNAB組菌株的adeB、adeJ、adeG和abeM基因的平均表達(dá)水平分別高了29、3、0.7和1倍。 4.外排泵抑制劑CCCP和PAβN可提高部分多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素的敏感性,維拉帕米可降低部分多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素的敏感性,利血平和NMP沒(méi)有明顯作用。 5.MLST技術(shù)將74株鮑曼不動(dòng)桿菌分成了18個(gè)序列型(Sequence type,ST),包括8個(gè)新的ST型,其中ST208和ST191是最主要的ST型,屬于克隆復(fù)合體(Clonal complex,CC)92.用PFGE技術(shù)分成了19個(gè)脈沖型。 6.TNAB組患者和TSAB組患者除了最后一個(gè)月使用的碳青霉烯類抗生素有明顯的差異外,其他各項(xiàng)基本情況無(wú)明顯差異。 研究結(jié)論 1.目前我院臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌多為多重耐藥株,因此,合理規(guī)范使用抗生素在我院是十分必要的。 2.鮑曼不動(dòng)桿菌能夠通過(guò)高表達(dá)的AdeABC外排泵系統(tǒng)降低對(duì)替加環(huán)素的敏感性,有必要監(jiān)測(cè)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素的敏感性。 3.首次在鮑曼不動(dòng)桿菌中發(fā)現(xiàn)tetX1基因(18.8%),關(guān)于tetX1基因如何介導(dǎo)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥的機(jī)制有待進(jìn)一步研究。 4.我院多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的流行主要是由于CC92的出現(xiàn)和播散。
【關(guān)鍵詞】:鮑曼不動(dòng)桿菌 替加環(huán)素 外排泵 tetX1基因 克隆復(fù)合體92
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R378;R3416
【目錄】:
  • 致謝4-5
  • 前言5-6
  • 中文摘要6-9
  • Abstract9-12
  • 英文縮略語(yǔ)表12-16
  • 第一部分 多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥機(jī)制的研究16-39
  • 引言16-18
  • 1 材料18
  • 2 主要試劑和儀器18-19
  • 3 研究方法19-25
  • 4 結(jié)果25-32
  • 5 討論32-34
  • 6 小結(jié)34-35
  • 參考文獻(xiàn)35-39
  • 第二部分 多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌同源性研究39-52
  • 引言39-40
  • 1 材料40
  • 2 主要試劑和儀器40-41
  • 3 研究方法41-44
  • 4 結(jié)果44-48
  • 5 討論48-49
  • 6 小結(jié)49-50
  • 參考文獻(xiàn)50-52
  • 綜述52-70
  • 參考文獻(xiàn)61-70
  • 作者簡(jiǎn)歷及在讀期間所取得的科研成果70

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 朱德妹;汪復(fù);胡付品;蔣曉飛;倪語(yǔ)星;孫景勇;徐英春;張小江;胡云健;艾效曼;俞云松;楊青;孫自鏞;陳中舉;賈蓓;黃文祥;卓超;蘇丹虹;魏蓮花;吳玲;張朝霞;季萍;王傳清;王愛(ài)敏;張泓;孔菁;徐元宏;沈繼錄;單斌;杜艷;;2010年中國(guó)CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J];中國(guó)感染與化療雜志;2011年05期

2 劉憶霜;肖春玲;;細(xì)菌多重耐藥外排泵抑制劑研究進(jìn)展[J];中國(guó)抗生素雜志;2007年04期


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本文編號(hào):271526

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