發(fā)布時間：2020-06-09 06:58

【摘要】：抵抗素(Resistin)是一個哺乳動物中應答于營養(yǎng)與能量變化的激素,在動物饑餓或禁食的情況下表達量下調,在飽食或高熱量食物飼喂的情況下上調表達。研究人員于2001年首次在小鼠脂肪細胞中發(fā)現(xiàn)并克隆了抵抗素,并認為這個新發(fā)現(xiàn)的因子是聯(lián)系哺乳動物肥胖與二型糖尿病的紐帶。后續(xù)的研究表明人抵抗素可以引起胰島素靶細胞如肝細胞的胰島素抵抗,并廣泛參與到人類與炎癥相關的各種疾病中。 Sir2(Silent information regulator2)是酵母中發(fā)現(xiàn)的一個應答于熱量限制(Calorie restriction)并在熱量限制中介導酵母生命延長的一個基因,當在酵母中超表達sir2后,即便不進行熱量限制酵母的壽命也能得到延長。它在哺乳動物中有7個同源基因(Sirtuins family),分別被命名為SIRT1-SIRT7,研究最多的是SIRT1。與酵母中同源基因一樣,SIRT1也是一個應答于熱量限制的基因,在動物饑餓或禁食的情況下表達量上調,在飽食或高脂飲食飼喂的情況下被下調表達。用SIRT1的激活劑SRT1720飼喂高脂飲食誘導的肥胖小鼠可以顯著的延長這些肥胖小鼠的壽命,反映了SIRT1在保護機體應對年齡相關疾病中的重要作用。 鑒于Resistin與SIRT1在應答于營養(yǎng)與能量變化時呈現(xiàn)出的相反的表達模式,以及它們在胰島素抵抗和炎癥中所起到的相反的作用,本研究以肝細胞為模型,采用熒光定量PCR、western blot、免疫共沉淀、鄰位連接分析、染色質免疫共沉淀、ELIAS與細胞衰老染色等技術系統(tǒng)地研究了Resistin對SIRT1表達與功能的影響,得到以下結果： 在人肝癌細胞系HepG2中,抵抗素重組蛋白以劑量依賴的形式下調SIRT1的mRNA與蛋白表達水平,并且下調SIRT1的重要輔助蛋白Nampt,以及2個SIRT1相互作用蛋白PGC-1α和PPARα的表達。同時,抵抗素處理減弱了SIRT1與PGC-1α和PPARα的相互作用程度,并下調了SIRT1-PGC-1α-PPARα轉錄復合物靶基因FGF21與CPT-1α的表達。表明抵抗素至少通過削弱SIRT1與其相互作用蛋白間的互作來損傷SIRT1的功能。 在小鼠原代肝細胞中,抵抗素重組蛋白顯著下調SIRT1mRNA與蛋白的表達。并顯著上調SIRT1負調控靶基因Farp2與Pisd的表達；抵抗素處理引起了SIRT1對其靶基因Farp2啟動子結合能力的減弱。同時,抵抗素處理引起了SIRT1與其靶DNA序列(主要衛(wèi)星重復序列)結合能力減弱。60周齡與10周齡小鼠相比,內(nèi)臟脂肪組織抵抗素mRNA水平有顯著上調,血清中抵抗素蛋白水平有上升趨勢。抵抗素至少通過減弱SIRT1與其相互作用DNA的互作來損傷SIRT1的功能。 72h抵抗素處理顯著增加小鼠原代肝細胞衰老相關p-半乳糖苷酶染色陽性率,SIRT1激活劑白藜蘆醇與煙酰胺單核苷酸可以消除由抵抗素造成的細胞衰老相關p-半乳糖苷酶染色陽性率上升。 在小鼠巨噬細胞系Ana-1中,高濃度葡萄糖與棕櫚酸處理可以顯著上調抵抗素mRNA表達水平。高濃度葡萄糖與棕櫚酸處理Ana-1與U937細胞后,收集得到的條件培養(yǎng)基處理小鼠原代肝細胞與人肝癌細胞HepG2細胞,與未經(jīng)高糖與脂肪酸處理的巨噬細胞條件培養(yǎng)基相比,可以顯著下調小鼠原代肝細胞與人HepG2細胞SIRT1mRNA的表達水平。 綜上,抵抗素降低肝細胞中SIRT1mRNA與蛋白質的表達水平,降低SIRT1與其重要相互作用蛋白的相互作用程度,削弱SIRT1與其靶DNA序列的結合,影響SIRT1靶基因的表達。
【學位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R363

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 Zhi-Xia Dong;Lin Su;Joanne Brymora;Claire Bird;Qing Xie;Jacob George;Jian-Hua Wang;;Resistin mediates the hepatic stellate cell phenotype[J];World Journal of Gastroenterology;2013年28期

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本文編號：2704323