【摘要】：Wnt信號(hào)調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化和遷移，在胚胎發(fā)育、維持組織穩(wěn)態(tài)、干細(xì)胞更新以及腫瘤發(fā)生中發(fā)揮重要作用。Wnt/-catenin信號(hào)通路是Wnt信號(hào)通路的一個(gè)分支，其激活的關(guān)鍵是-catenin蛋白的積累。目前認(rèn)為，-catenin蛋白的積累主要由其降解系統(tǒng)調(diào)控，但從細(xì)胞生物學(xué)理論可知，細(xì)胞內(nèi)-catenin蛋白水平受合成和降解共同調(diào)控，-catenin蛋白的合成調(diào)控一直少有研究。 SR蛋白（serine/arginine-rich splicing factor，SRSF）廣泛參與mRNA生物合成過(guò)程，包括轉(zhuǎn)錄、剪接、出核、翻譯及降解。此外，SR蛋白還被發(fā)現(xiàn)參與基因組穩(wěn)定性維持、miRNA加工以及蛋白SUMO修飾等，部分SR蛋白還被發(fā)現(xiàn)在多種腫瘤中高表達(dá)并參與細(xì)胞轉(zhuǎn)化和腫瘤發(fā)生。 我們的研究發(fā)現(xiàn)部分SR蛋白參與調(diào)控Wnt信號(hào)和-catenin蛋白合成。我們通過(guò)基因過(guò)表達(dá)篩選發(fā)現(xiàn)部分SR蛋白能激活Wnt/-catenin信號(hào)且導(dǎo)致-catenin蛋白水平升高。生化分析顯示SRSF1和SRSF9都能結(jié)合-catenin mRNA并增強(qiáng)其翻譯，促進(jìn)-catenin的蛋白合成，從而激活Wnt信號(hào)。我們證實(shí)，像SRSF1一樣，SRSF9也是一個(gè)原癌基因，在多種腫瘤樣品中高表達(dá)并能導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化。更為重要的是，-catenin參與SR蛋白所介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化，同時(shí)，下調(diào)SR蛋白表達(dá)抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖。這些結(jié)果顯示，-catenin是受SR蛋白調(diào)控的重要促腫瘤因子之一，SR蛋白通過(guò)上調(diào)Wnt/-catenin信號(hào)誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生。在此基礎(chǔ)上，我們嘗試了從“合成”和“降解”兩方面協(xié)同下調(diào)-catenin蛋白水平的策略。聯(lián)合使用“促進(jìn)-catenin降解”和“抑制蛋白合成”的小分子化合物，能有效下調(diào)結(jié)腸癌細(xì)胞中-catenin的蛋白量，顯示這種協(xié)同用藥可能是一種有效的腫瘤治療策略。 綜上，我們的研究將Wnt信號(hào)和SR蛋白之間建立起了全新的聯(lián)系，證實(shí)-catenin是SR蛋白翻譯調(diào)控的新靶點(diǎn)，并且貢獻(xiàn)于SR蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化。這一結(jié)果加深了人們對(duì)Wnt信號(hào)調(diào)控機(jī)制及其在腫瘤發(fā)生中作用機(jī)制的理解。同時(shí)，我們的研究凸顯了-catenin蛋白合成上調(diào)在腫瘤發(fā)生中的作用，提出了下調(diào)-catenin蛋白量的聯(lián)合用藥策略，為相關(guān)基礎(chǔ)和臨床研究提供了理論參考。
【圖文】：

5圖1.1 細(xì)胞內(nèi)的 -catenin蛋白[59]E-cadherin結(jié)合 -catenin錨定于細(xì)胞膜上， -catenin還可結(jié)合 -caherin，間接調(diào)控細(xì)胞微絲骨架；受激酶調(diào)控或下調(diào)E-cadherin時(shí)， -catenin可以從黏著連接處釋放至細(xì)胞質(zhì)。細(xì)胞質(zhì)中的 -catenin會(huì)迅速地在降解復(fù)合體中磷酸化，繼而泛素化，被蛋白酶體降解。Wnt信號(hào)激活，抑制了 -catenin降解復(fù)合體，新合成的 -catenin在細(xì)胞質(zhì)中積累進(jìn)而轉(zhuǎn)運(yùn)入核，，與轉(zhuǎn)錄因子TCF/LEF結(jié)合

圖1.2 Wnt信號(hào)調(diào)控 -catenin降解復(fù)合體的模型[64]Wnt信號(hào)沒(méi)有激活時(shí)， -catenin在降解復(fù)合體中被磷酸化和泛素化，通過(guò)蛋白酶體降解，核中轉(zhuǎn)錄因子TCF結(jié)合抑制因子Groucho，Wnt靶基因不能轉(zhuǎn)錄；Wnt信號(hào)激活時(shí)， -TrCP游離出降解復(fù)合體，磷酸化的 -catenin飽和降解復(fù)合體，進(jìn)而細(xì)胞質(zhì)中新合成的 -catenin積累入核，作為轉(zhuǎn)錄激活基因結(jié)合TCF，Wnt靶基因得以轉(zhuǎn)錄。 -catenin降解復(fù)合體是細(xì)胞質(zhì)中動(dòng)態(tài)的多種蛋白的集合，共同調(diào)控著細(xì)胞質(zhì)中 -catenin蛋白的穩(wěn)定性，它的核心組分除 -catenin自身，還主要包括絲氨酸/蘇氨酸激酶GSK-3（glycogen synthase kinase 3）、CK1（casein kinase 1）、Axin、APC（adenomatous polyposis coli）、E3泛素連接酶 -TrCP和磷酸酶PP2A等。1.2.2.1 磷酸化 -catenin的激酶——CK1和GSK3最初研究發(fā)現(xiàn) -catenin的第33位和第37位絲氨酸（Ser33和Ser37）是GSK3的磷酸化位點(diǎn)，GSK3具有保守的磷酸化識(shí)別位點(diǎn)，即為S/T-XXX-pS/pT（X為任意氨基酸，pS/pT為磷酸化的絲氨酸或蘇氨酸），也就是說(shuō)GSK3的磷酸化需要其他
【學(xué)位授予單位】：清華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R3411

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2695143