【摘要】： 補(bǔ)體(Complement)作為天然免疫(Innate immunity)中的一類重要和保守的體系，為機(jī)體提供了快速和高效地清除入侵微生物的途徑。補(bǔ)體系統(tǒng)除了補(bǔ)體的直接殺傷機(jī)制外，在補(bǔ)體活化過程中釋放的多種小片斷分子具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，包括趨化中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞、調(diào)理吞噬、參與調(diào)節(jié)細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答等等。因此，補(bǔ)體是連接機(jī)體天然免疫和獲得性免疫(Adaptive immunity)的“橋梁”。然而，對機(jī)體來說，補(bǔ)體也具有潛在的威脅，其經(jīng)過不適宜的活化后，可以導(dǎo)致機(jī)體多種組織的損傷。正常機(jī)體在進(jìn)化過程中，形成了一套精細(xì)的保護(hù)自身免受補(bǔ)體攻擊的調(diào)控機(jī)制。目前發(fā)現(xiàn)，機(jī)體多種細(xì)胞以及生殖系統(tǒng)的體液中表達(dá)和分泌豐富的補(bǔ)體調(diào)控蛋白，包括作用于補(bǔ)體活化早期階段的CD55、CD46、CD35和作用于補(bǔ)體活化終末階段的CD59，它們分別通過抑制補(bǔ)體活化過程中關(guān)鍵的C3、C5轉(zhuǎn)化酶和抑制形成膜攻擊單位，抵抗補(bǔ)體對自身組織細(xì)胞的攻擊。 作為機(jī)體免疫系統(tǒng)中功能最強(qiáng)的專職性抗原提呈細(xì)胞(Antigen-presenting cells,APC)，樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells,DC)能高效地攝取、加工處理和提呈抗原，具有較強(qiáng)的遷移能力，并能顯著地激活初始型T細(xì)胞以啟動T細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)，此外，DC與B細(xì)胞以及NK細(xì)胞等也存在著相互作用，可見，DC在連接天然免疫和獲得性免疫之間起著非常重要的作用。DC是一類異質(zhì)性的細(xì)胞群體，不同的亞群，，其免疫學(xué)功能特點不同，在免疫應(yīng)答與免疫耐受、抗腫瘤、抗感染免疫中發(fā)揮不同的作用�？紤]到補(bǔ)體和DC均能夠連接天然免疫和獲得性免疫的共同特性，而目前尚未見補(bǔ)體和DC之間相互作用、特別是補(bǔ)體對DC免疫學(xué)功能的直接調(diào)控作用的研究報道，因此，本研究探討了補(bǔ)體與DC之間的相互關(guān)系，重點研究了補(bǔ)體對于不同亞群DC的殺傷作用、趨化作用以及對于DC抗原提呈功能的影響，具體包括：1)處于不同分化發(fā)育階段的不同亞群的DC表達(dá)補(bǔ)體相關(guān)分子包括補(bǔ)體受體和補(bǔ)體調(diào)控蛋白的水平，以期了解DC對于補(bǔ)體及其活性片斷作用的敏感性及相互作用的物質(zhì)基礎(chǔ)；2)活化補(bǔ)體 博士論文補(bǔ)體分子對樹突狀細(xì)胞免疫學(xué)功能的調(diào)控作用及機(jī)制研究 及其釋放的活性片斷(主要是Csa和Clq)對處于不同分化發(fā)育階段的不同亞群 DC的殺傷作用、趨化效應(yīng)以及對DC激活T淋巴細(xì)胞的影響。本研究的完成有助 于在免疫應(yīng)答的調(diào)控機(jī)制方面獲得新的認(rèn)識，并對補(bǔ)體和DC在連接天然免疫和 獲得性免疫之間的作用及相互關(guān)系能有更全面的理解，為進(jìn)一步從新的角度和思 路深入研究DC在抗原特異性免疫應(yīng)答與免疫耐受中的作用及其機(jī)制奠定基礎(chǔ)。 第一部分人樹突狀細(xì)胞表達(dá)補(bǔ)體受體及其相關(guān)分子的分析 因為DC是個異質(zhì)性細(xì)胞群體，因此，我們分析了補(bǔ)體受體及其相關(guān)分子在 不同分化發(fā)育階段、不同亞群的樹突狀細(xì)胞上的表達(dá)。我們通過免疫磁珠分離了 兩種人DC前體，即髓系來源的單核細(xì)胞(MonocyteS，Mo)和淋巴系來源的漿細(xì) 胞樣DC(Plasmaeytoid dendritic eells，pDC)，對這兩個不同DC亞群進(jìn)行體 外誘導(dǎo)培養(yǎng)，使其處于不同的分化發(fā)育階段，然后檢測了其表達(dá)補(bǔ)體受體一 CD35( CRI)、CD21(CRZ)、CDI lb(CR3)、CDlle(CR4)，補(bǔ)體調(diào)控蛋白一CD46、CD55、 以及部分補(bǔ)體片斷分子受體一C3aR、CsaR、ClqRp的水平。 曰補(bǔ)體受體及其相關(guān)分子在MoDC上的表達(dá) 不同分化階段的單核細(xì)胞衍生性DC(Monocytes一derived DC，MoDC)的誘 導(dǎo):將新鮮分離的單核細(xì)胞Mo，在含有GM一CSF和工L一4培養(yǎng)體系中誘導(dǎo)5一7d， 即分化為未成熟MoDC;對培養(yǎng)至sd的未成熟MoDC，用TNFa刺激Zd，即分化為 成熟MoDC;此時再用LPS刺激24h，即為活化的MoDC。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，單核細(xì)胞Mo表達(dá)中等水平的CD35(CRz)、CD46、CD55和ClqRp; 表達(dá)高水平的CDI lb(CR3)、CDI le(CR4)、CsaR;表達(dá)低水平的C3aR;不表達(dá)CD21 (CRZ)。與單核細(xì)胞Mo相比，未成熟的MoDC表達(dá)CD35、CDI lb、CDI le、CD46、 CD55、CsaR和ClqRp的水平顯著下調(diào);其它分子的表達(dá)水平差異不顯著。與未 成熟MoDC相比，成熟MoDC表達(dá)CDI lb、CDI le、CD46和CD55的水平顯著回升: 其它分子的表達(dá)水平差異不顯著;但與新鮮分離的單核細(xì)胞M。比較，成熟MoDC 表達(dá)CD46、CD55、CsaR和ClqRp的表達(dá)水平依然顯著降低。LPS刺激活化的MoDC， 與成熟MoDC相比，補(bǔ)體相關(guān)分子的水平?jīng)]有顯著差異;與未成熟MoDC相比，其 CD 1 lb、CDI Ic、CD46、CD55表達(dá)水平顯著回升，其它補(bǔ)體相關(guān)分子的表達(dá)水平 差異不顯著;與新鮮分離的單核細(xì)胞Mo比較，LPS刺激活化的MoDC表達(dá)CD35、 博士論文補(bǔ)體分子對樹突狀細(xì)胞免疫學(xué)功能的調(diào)控作用及機(jī)制研究 CD55、CsaR、ClqRp的水平顯著低下，而其它分子表達(dá)水平?jīng)]有顯著差異。由此 可見，單核細(xì)胞M。在向DC自然分化成熟的過程中，表達(dá)補(bǔ)體受體(包括CsaR 和ClqRp)和補(bǔ)體調(diào)控蛋白的水平下調(diào)，但是當(dāng)TNFa或/和LPS作用于DC使之 成熟和活化后，其中某些分子(包括CDllb、CDllC、CD55和CD46)的水平顯著 上調(diào)(但CD55的表達(dá)仍然顯著低于Mo的CD55表達(dá)水平)。 這些結(jié)果提示，一方面，MoDC表達(dá)補(bǔ)體受體，提示補(bǔ)體可以作用于MoDC， 補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒效應(yīng)可能
【圖文】：

20:160:1180:1T:OC進(jìn)未成熟pDC刺激同種T淋巴細(xì)胞的增殖。logeneieTlymPhocytestimulatoryactivityofCS卜treatedimmature000。。。000。。。000。，，00002060:1T:OC180進(jìn)新鮮分離的pDc刺激同種T淋巴細(xì)胞的增殖.llo邵neieTlymPhocytestimulatoryactivityofC5a.treatedfreshlyis

Fig.5TheehemotaxisofmatUreMoDCtoC]qatindieatedeoneenlrations.1614圈mediumalone口Clq
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 韓清珍;仝佳;趙陽;劉嫣芳;沈培;蘇兆亮;邵啟祥;焦志軍;王勝軍;許化溪;;產(chǎn)丙酮酸棒狀桿菌及痤瘡丙酸桿菌對樹突狀細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用[J];免疫學(xué)雜志;2011年07期

2 董偉;唐彥君;劉寧;;植物乳桿菌胞外多糖對小鼠樹突狀細(xì)胞分泌的調(diào)控[J];中國乳品工業(yè);2011年06期

3 佘志成;范紅結(jié);李春玲;王貴平;賈愛卿;楊冬霞;;副豬嗜血桿菌外膜蛋白P5對豚鼠樹突狀細(xì)胞成熟及功能影響[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報;2011年07期

4 張麗;石瑋;張雷;李杰;李娜;安鵬麗;張悅;王蓓;孟明;王家鑫;;負(fù)載滅活口蹄疫病毒樹突狀細(xì)胞啟動的CD4~+T細(xì)胞應(yīng)答[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2011年07期

5 葛長勇;孫茂盛;;乙型肝炎病毒免疫逃避機(jī)制研究進(jìn)展[J];云南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2007年S3期

6 趙萌;徐青;于繼云;余云舟;;一種拮抗HIV-1并靶向DC的融合基因的設(shè)計及表達(dá)鑒定[J];生物工程學(xué)報;2011年08期

7 石曉月;賀敏;任鵬;宋麗雅;喬志新;楊曉琮;程宏;馮秋月;張公慶;王璇琳;宮寧;王字玲;李偉靜;于群;;慢病毒介導(dǎo)的穩(wěn)定表達(dá)人GM-CSF、IL-4的EA.hy926細(xì)胞株的建立[J];生物技術(shù)通訊;2011年04期

8 李曉艷;王景龍;張瑞;孫春輝;郎需龍;楊艷玲;屈海龍;趙勇坤;王興龍;;羊布氏菌強(qiáng)毒株16M感染小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞模型的建立[J];中國生物制品學(xué)雜志;2011年08期

9 梁俊容;景懷琦;;耶爾森菌抵抗宿主免疫并誘導(dǎo)吞噬細(xì)胞凋亡機(jī)制研究[J];中國人獸共患病學(xué)報;2011年08期

10 賈志龍;毛中鵬;;胸腺基質(zhì)淋巴生成素的研究現(xiàn)狀[J];武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2011年06期

相關(guān)會議論文 前10條

1 劉修恒;;小鼠骨髓源性不同成熟度樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)鑒定[A];第十七屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 張慶紅;胡玉珍;呂順艷;鐘延清;;雌激素影響大鼠樹突狀細(xì)胞的分化、成熟和功能[A];中國生理學(xué)會第六屆全國青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2003年

3 郭大偉;梁健;姜曉峰;王學(xué)范;魏云濤;姜洪磊;;GPC3基因轉(zhuǎn)染的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗肝癌HepG2細(xì)胞殺傷作用的研究[A];第十二屆全國肝癌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

4 張新華;鐘翠平;顧云娣;顧曉;范強(qiáng);王國強(qiáng);周播江;;TGF-β1基因轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞增強(qiáng)移植心臟耐受性并降低Fractalkine的表達(dá)[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

5 于益芝;劉書遜;王文雅;張明徽;郭振紅;徐紅梅;齊潤姿;安華章;曹雪濤;;TRAIL在樹突狀細(xì)胞殺傷活化T細(xì)胞中的作用[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

6 尤長宣;羅榮城;張軍一;蘇瑾;廖旺軍;鄭航;Paul L Hermonat;;基因轉(zhuǎn)移制備樹突狀細(xì)胞的實驗研究[A];第一屆中國腫瘤靶向治療技術(shù)大會論文集[C];2003年

7 葛長勇;李鴻鈞;孫茂盛;馮婷婷;靳昌忠;姚航平;吳南屏;;滅活SV40致敏的猴樹突狀細(xì)胞的生物學(xué)特性研究[A];2008年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

8 葛長勇;李鴻鈞;謝天宏;張光明;易山;孫茂盛;吳南屏;;恒河猴樹突狀細(xì)胞的生物學(xué)特性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第四次全國艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國熱帶病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

9 張堯;靳風(fēng)爍;蘭衛(wèi)華;李彥峰;張克勤;吳剛;葉錦;;聯(lián)合應(yīng)用塞萊西布和CpG-ODN對樹突狀細(xì)胞功能的影響[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

10 夏強(qiáng);劉衛(wèi)彬;陳振光;張瑩;黃如訓(xùn);;胸腺成熟樹突狀細(xì)胞與重癥肌無力發(fā)生的相關(guān)性分析[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 章靜波;干細(xì)胞研究新動向[N];健康報;2009年

2 王雪飛;樹突狀細(xì)胞“面目”更清晰[N];健康報;2004年

3 記者 白毅;間充質(zhì)干細(xì)胞可促進(jìn)成熟樹突狀細(xì)胞增殖分化[N];中國醫(yī)藥報;2009年

4 劉伯寧;喬布斯的錯誤與斯坦曼的自我試驗[N];南方周末;2011年

5 方彤;樹突狀細(xì)胞瘤苗新進(jìn)展[N];健康報;2006年

6 本報記者 沈湫莎;這一次,諾獎會不會頒給逝者[N];文匯報;2011年

7 張獻(xiàn)懷;樹突狀細(xì)胞療法治療惡性黑色素瘤[N];中國醫(yī)藥報;2004年

8 記者　毛黎;美發(fā)現(xiàn)一種“超級”形態(tài)酶[N];科技日報;2006年

9 楊淑娟;美研究出新型丙型肝炎疫苗[N];中國醫(yī)藥報;2006年

10 ;慢性HBV感染使樹突狀細(xì)胞功能受損[N];中國醫(yī)藥報;2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉書遜;補(bǔ)體分子對樹突狀細(xì)胞免疫學(xué)功能的調(diào)控作用及機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

2 潘建平;γ-干擾素對樹突狀細(xì)胞分化和功能成熟的調(diào)控及其基因修飾的樹突狀細(xì)胞抗腫瘤免疫機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2002年

3 朱偉國;PPAR-γ激動劑吡格列酮抑制血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞免疫激活致動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定的研究[D];浙江大學(xué);2010年

4 王正昕;腫瘤微環(huán)境中浸潤性樹突狀細(xì)胞的表型和免疫學(xué)功能的研究及其臨床意義[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2000年

5 周向陽;新型熱休克蛋白HSP-DC激活樹突狀細(xì)胞及其佐劑效應(yīng)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

6 趙鴻;未成熟樹突狀細(xì)胞聯(lián)合骨髓移植誘導(dǎo)大鼠異體腎移植免疫耐受的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

7 陳玉丙;樹突狀細(xì)胞抗原負(fù)載及MAGE-3 DNA瘤苗研制[D];吉林大學(xué);2004年

8 王宏偉;肺間質(zhì)樹突狀細(xì)胞在多器官功能障礙綜合征中的免疫激活與免疫耐受作用研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

9 趙毅;青藤堿對RA患者樹突狀細(xì)胞免疫功能的影響及機(jī)制研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

10 劉海波;Fas信號激活樹突狀細(xì)胞炎性復(fù)合體形成的生物學(xué)意義與分子機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 吳鳴宇;黑色素瘤基因（MAGE-1）相關(guān)肽負(fù)載樹突狀細(xì)胞對肝癌細(xì)胞殺傷作用的實驗研究[D];蘇州大學(xué);2003年

2 孟冬梅;急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)及功能研究[D];青島大學(xué);2003年

3 梁軍利;IFN-β1a對多發(fā)性硬化樹突狀細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子影響的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

4 黃祺琦;耐受性樹突狀細(xì)胞來源的exosome治療小鼠免疫介導(dǎo)性再生障礙性貧血的實驗研究[D];南昌大學(xué);2010年

5 初曉霞;淋巴瘤樹突狀細(xì)胞的表達(dá)與臨床分期、惡性度及預(yù)后的相關(guān)性研究[D];青島大學(xué);2002年

6 劉麗燕;MyD88在OK-432誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟中的作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

7 郭佳;TLR配體誘導(dǎo)骨髓來源樹突狀細(xì)胞獲得產(chǎn)生全反式維甲酸的能力[D];浙江大學(xué);2011年

8 才志剛;凍融抗原沖擊致敏的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生肺癌特異性免疫應(yīng)答的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

9 李靜;癌—睪丸抗原OY-TES-1致敏樹突狀細(xì)胞的體外抗肝癌研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

10 吳軍;樹突狀細(xì)胞（DC）的培養(yǎng)及CEA-重組痘苗病毒轉(zhuǎn)染DC誘導(dǎo)的特異性T細(xì)胞免疫[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2002年

本文編號：2688095