【摘要】： 目前，較大的骨缺損(創(chuàng)傷、腫瘤骨切除后)，肢體不等長，身材矮小等疾病，是骨科治療的難點。以往多采用自體骨移植治療骨缺損，盡管技術(shù)成熟，但只適用于較小的骨缺損而且移植骨塊還存在再吸收和壞死等問題。假體置換受到缺損部位的限制。因此，如何刺激骨生長成為研究熱點。牽拉骨再生(distraction osteogenesis，DO)是骨干或干骺端截骨后、通過外固定器對截骨兩端進行持續(xù)、緩慢、高頻牽拉，刺激骨形成的一種獨特方法。然而，由于長期外固定器固定而引起許多并發(fā)癥如：針道感染、關(guān)節(jié)僵硬、馬蹄足、肌肉萎縮等。因此，如何促進延長骨愈合、縮短外固定時間、減少并發(fā)癥的發(fā)生成為亟待解決的問題。為此我們開展了以下研究。 一、大鼠肢體延長的動物模型 目的：通過建立大鼠肢體延長的動物模型為將來能夠使用現(xiàn)代的免疫學(xué)、分子生物學(xué)技術(shù)研究延長骨的愈合機理提供基礎(chǔ)。方法：12只成熟雄性大鼠下肢行微型環(huán)狀外固定器固定，脛骨骨干部位截骨，術(shù)后五天開始延長，2次／天、0.25mm／次、延長12天，每周攝X片觀察。分別在不同階段處死動物進行組織學(xué)觀察。結(jié)果：所有動物都安全度過麻醉、手術(shù)及延長愈合期，外固定架對動物未產(chǎn)生明顯的不良影響。有一只大鼠在鉆入遠端克氏針時由于用力過大致脛骨遠端骨折被排除，另外兩只針道處輕微紅腫，未引起嚴(yán)重感染數(shù)天后好轉(zhuǎn)，五只大鼠出現(xiàn)小腿及足部水腫，未采取特殊處置一周后消退。X線片示截骨端對位、對線良好。結(jié)論：大鼠動物模型優(yōu)于其它動物更有利于從細胞水平、分子水平深入研究骨組織再生的機理。 二、FGF，1GF對體外培養(yǎng)骨髓基質(zhì)干細胞增殖及轉(zhuǎn)化的影響 川。m；；v拈木的丈驗’。臨休川穴及卜＊h增州似f化的妖什 小義摘蟄 目的 觀察堿性成纖雛細胞牛長閃于兒FGF入 腆島素樣牛長 岡于（IG）對體外培養(yǎng)骨髓基質(zhì)干細胞（BMSC）增殖、分化的影 響。方法3～6月齡的雄性SD大鼠處死后，取雙側(cè)股骨、勝骨的骨 髓進行體外培養(yǎng)川 含有不同細胞因于的培養(yǎng)基分四組：IbFGF組； 11 IGF組；Ill bFGFHGF組；IV對照組（以上各組均含地塞米松、 尸－甘油磷酸鈉、維生素C、青霉素、鏈霉素人顯微鏡下觀察BMSC 的生長特性，用MTT iL測得的細胞相對值繪制生長曲線。采用改 良Gomori 氏鈣鈷法計數(shù)堿性磷酸酶（AL訃性率的細胞。結(jié)果 BMSC在傳代培養(yǎng)前兩大，各組的細胞數(shù)量無明顯變化，從第二至 八天，bFGF組、IGF組、bFGFHGF組的細胞數(shù)量均高于對照組， 并且旺GFn 組明顯高于其它三組。含細胞因子三組ALP”率均高 于對照組，bFGF＋IGF組的陽性率最高。結(jié)論bFGF、IGF者自促 進BMSC增殖及向成骨細胞分化，并且兩者同時運用憂于單獨使用， 結(jié)果表明bFGF、IGF在促進BMS。增殖與分化時起協(xié)同作用。 三、骨髓基質(zhì)干細胞復(fù)合膠原凝膠加速延長骨愈合 目的 骨髓基質(zhì)干細胞（bone mesenchymal stem cells，BMSc） 復(fù)合1型膠原凝膠k gel，CG）經(jīng)皮注射至延長骨區(qū)促進骨 愈合。方法動物模型：雄性 S D大鼠 20只，體重 2503，按 Ilizarov 技術(shù)造成肢體延長的動物模型，雙側(cè)勝骨干截骨后安裝自行研制的 微型Ilizarov外固定器，術(shù)后5大開始延長0．smm用，，分二次完成， 共延長 12大。細胞培養(yǎng)：取 3上月齡 S D雄性大鼠處死后，取雙側(cè) 股骨、勝骨剪斷股骨、腔骨的兩端，用注射器將骨髓沖出，含 15％ 胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基在3 7℃，5％CO。條件下培養(yǎng)。動物分組： 所有動物隨機分為四組，每組5只門 側(cè)肢體人 在術(shù)后17大經(jīng)皮 注射。IBMSC組；HCG組；HIBMSC十CG組；W 空白對照組。 觀察內(nèi)容：不同階段的X線片，不同階段的組織學(xué)光、電鏡檢查。 結(jié)果第6s周的X線片見BMSC＋CG組的骨頒量明顯多于其他組， 光、電鏡下見BMSC＋CG組成骨細胞及骨細胞的數(shù)量多并且功能活 躍，破骨細胞出現(xiàn)時間早。結(jié)論BMSC＋CG組對延長區(qū)骨再生有促 ＊ 弓 進例I。 四、延長骨的骨癡形態(tài)與并發(fā)癥之間的關(guān)系 目的研究延長骨的不同X線形態(tài)，及其在延長過程中不同階 段的發(fā)展變化推斷出延長骨的骨儷類型與并發(fā)癥之間的關(guān)系。方法 分祈一組 40例病人的 X線片，年齡 3叫 歲，平均 8．5歲，男 24例，女 16 例，均為 1990上00年間在我院行 Ilizarov技術(shù)肢體延長術(shù)者。根據(jù) 延長區(qū)骨儷的橫徑和低密度區(qū)或帶的出現(xiàn)分類。結(jié)果絕大多數(shù)骨儷 類型是均勻型無HA肥，術(shù)后五周時，
【圖文】：

1材料和方法1.1外固定器自行設(shè)計的微型環(huán)狀外固定器(蘇州工業(yè)園區(qū)通達機械有限公司)生產(chǎn)。由兩個不銹鋼環(huán)和兩個螺棒組成(圖1)，鋼環(huán):外徑35.Olnln、內(nèi)徑30.OTnln、厚度1.Slnfn、在環(huán)壁上每間隔2.5IT’irn有一直徑3.Zlnln的圓孔(用以固定克氏針及安裝螺棒)，螺棒:直徑2.Slnln、長40.Ofnm，克氏針0.8二(江蘇常州康輝醫(yī)療器械廠)。、一/夕廠三圖1自行研制的微型外固定器圖2SD大鼠外觀像(外固定解除前)1.2手術(shù)方法選用健康3一5月齡雄性SpragueDawley(SD)大鼠，

肢體延長的動物模型多選用狗〔6)、兔(7’、羊‘8，、小豬(micropig)‘9，等，最近，在國外有嚙齒類動物被用于實驗的報道〔’。’，此次研究的目的是建立肢體延長的大鼠模型以便使用現(xiàn)代的免疫學(xué)、分子生物學(xué)技術(shù)甚至將來運用轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究特定基因(SpeCifiCgene)在再生骨組織中的作用及延長骨愈合的機理，大鼠模型是實用、便利、經(jīng)濟有廣闊應(yīng)用前景的肢體延長模型。1材料和方法1.1外固定器自行設(shè)計的微型環(huán)狀外固定器(蘇州工業(yè)園區(qū)通達機械有限公司)生產(chǎn)。由兩個不銹鋼環(huán)和兩個螺棒組成(圖1)，鋼環(huán):外徑35.Olnln、內(nèi)徑30.OTnln、厚度1.Slnfn、在環(huán)壁上每間隔2.5IT’irn有一直徑3.Zlnln的圓孔(用以固定克氏針及安裝螺棒)，螺棒:直徑2.Slnln、長40.Ofnm，克氏針0.8二(江蘇常州康輝醫(yī)療器械廠)。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R329

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本文編號：2687851