【摘要】：目的 顱內(nèi)動(dòng)脈瘤在臨床上以自發(fā)腦出血、腦血管痙攣、動(dòng)眼神經(jīng)麻痹等局灶癥狀為主要表現(xiàn),是最常見的腦血管病之一。先天性動(dòng)脈瘤占大部分人群,發(fā)病率達(dá)萬分之一,以40-66歲最為常見。調(diào)查結(jié)果顯示,約有10%的病人入院前死亡,但仍約有500萬以上的隱匿性顱內(nèi)動(dòng)脈瘤未被發(fā)現(xiàn)和診斷。盡管在近十年里,動(dòng)脈瘤的治療取得了長足的進(jìn)步,但其致死率仍高達(dá)30%-40%,且預(yù)后不甚理想。目前,該病發(fā)病機(jī)制仍存在廣泛爭議,致病機(jī)理尚不清楚。僅發(fā)現(xiàn)芬蘭和日本人群中的發(fā)病率是其他人群的兩倍,在遺傳家系分析中找到了可能的相關(guān)基因,但并沒有進(jìn)行更深入的功能研究。 近年來,研究者們用基因芯片來檢測顱內(nèi)動(dòng)脈瘤相關(guān)基因mRNA水平的變化,發(fā)現(xiàn)Bcl-2,COL1A2,COL3A1,COL5A2,CXCL12,TIMP4,TNC這7個(gè)基因的表達(dá)水平在3個(gè)或以上研究中都發(fā)生了明顯變化。這些在基因轉(zhuǎn)錄水平相關(guān)的研究均涉及到內(nèi)皮細(xì)胞功能的紊亂,壁細(xì)胞的缺失,炎癥細(xì)胞浸潤以及細(xì)胞外基質(zhì)的降解。 小RNA (microRNA)是由18-25個(gè)核苷酸組成的單鏈非編碼RNA。成熟小RNA通過與靶mRNA的3'UTR(非翻譯區(qū))互補(bǔ)結(jié)合在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)其表達(dá)。據(jù)保守估計(jì),小RNA調(diào)控約20%-30%的人類基因。研究顯示,小RNA的異常調(diào)控是某些疾病發(fā)生的重要因素之一,如腫瘤和癌癥。 迄今為止,研究者們尚未明確任何顱內(nèi)動(dòng)脈瘤致病的信號(hào)通路和關(guān)鍵因子,也未能通過相關(guān)基因的動(dòng)物模型模擬疾病的表型,更沒有任何小RNA在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤中的研究報(bào)導(dǎo)。 我們長期從事顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的臨床工作,并在科研中積累了大量的實(shí)驗(yàn)成果。我們發(fā)現(xiàn)microRNA與顱內(nèi)動(dòng)脈瘤有著非常密切的關(guān)系。我們利用microRNA芯片對(duì)四例顱內(nèi)動(dòng)脈瘤樣本進(jìn)行小RNA表達(dá)譜分析,通過RT-PCR驗(yàn)證后得到18個(gè)異常表達(dá)的microRNA。同時(shí)利用mRNA芯片分析技術(shù)對(duì)兩例顱內(nèi)動(dòng)脈瘤樣本進(jìn)行mRNA表達(dá)譜分析,通過數(shù)據(jù)篩選,得到11351個(gè)顱內(nèi)動(dòng)脈瘤mRNA表達(dá)量數(shù)據(jù)。利用IPA (Ingenuity pathway analysis)系統(tǒng),建立了顱內(nèi)動(dòng)脈瘤發(fā)病相關(guān)通路的分子網(wǎng)絡(luò)以及篩選這些miRNA對(duì)應(yīng)的顱內(nèi)動(dòng)脈瘤發(fā)病相關(guān)的致病靶基因,發(fā)現(xiàn)這些異常表達(dá)的miRNA主要與血管內(nèi)壁細(xì)胞凋亡、促進(jìn)炎癥細(xì)胞增殖與浸潤、內(nèi)皮細(xì)胞與平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的遷移等基因相關(guān)。 本課題將進(jìn)行miRNA及其靶基因在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤致病機(jī)制的研究,探求其調(diào)控的分子網(wǎng)絡(luò)在瘤體發(fā)生和發(fā)展中的作用,從時(shí)間和空間水平揭示miRNA調(diào)控顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的分子體系。評(píng)估m(xù)iRNA作為顱內(nèi)動(dòng)脈瘤生物標(biāo)記的可能性,為顱內(nèi)動(dòng)脈瘤提供新的診斷位點(diǎn)和治療干預(yù)新靶點(diǎn)。本課題將為顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的分子機(jī)制提供有價(jià)值的研究成果。 方法 1.篩選在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤中異常表達(dá)并具有顯著生物學(xué)意義的microRNA。 2.篩選在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤中異常表達(dá)并具有顯著生物學(xué)意義的mRNA。 3.確定microRNA調(diào)控的關(guān)鍵靶基因在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤組織中的表達(dá)水平,建立顱內(nèi)動(dòng)脈瘤發(fā)病的分子調(diào)控系統(tǒng)。 4.分析顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成和發(fā)展過程中microRNA對(duì)細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響,確定其在致病機(jī)理中發(fā)揮的功能。 結(jié)果 1.應(yīng)用Agilent Human miRNA array AMADID1643芯片對(duì)4組動(dòng)脈瘤樣本及對(duì)照組織樣本進(jìn)行初步的篩選后,得到有異常表達(dá)的miRNA32種,對(duì)其中的29種miRNA進(jìn)行RT-PCR驗(yàn)證(針對(duì)新采集的10組動(dòng)脈瘤樣本)后,有18種miRNA在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤中異常表達(dá)。 2.應(yīng)用Agilent Whole Human Genome Oligo Microarray (4×44K)芯片對(duì)2組動(dòng)脈瘤樣本及對(duì)照組織樣本進(jìn)行篩選后,得到有異常表達(dá)的mRNA11351個(gè)。 3.應(yīng)用綜合性分析系統(tǒng)IPA,對(duì)18種miRNA對(duì)應(yīng)的靶基因進(jìn)行功能分析,發(fā)現(xiàn)與mRNA芯片結(jié)果對(duì)應(yīng)的靶基因?qū)Ρ扔?24個(gè)基因重疊。 4.構(gòu)建動(dòng)脈瘤致病相關(guān)的分子網(wǎng)絡(luò)后,異常表達(dá)的miRNA所對(duì)應(yīng)的靶基因主要在以下方面參與顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的致�。貉軆�(nèi)皮細(xì)胞凋亡、炎癥免疫細(xì)胞的增殖和浸潤、內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的遷移。 5.分析IPA建立的動(dòng)脈瘤致病機(jī)理的分子網(wǎng)絡(luò),炎癥因子在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的形成和發(fā)展中扮演了重要角色。 結(jié)論 1. microRNA及其對(duì)應(yīng)的靶基因在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的致病機(jī)理中扮演重要的角色。 2. microRNA在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的形成中主要通過內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡、炎癥免疫細(xì)胞的增殖和浸潤、內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的遷移等機(jī)制發(fā)揮作用。 3.細(xì)胞免疫反應(yīng)及細(xì)胞因子信號(hào)分子網(wǎng)絡(luò)是顱內(nèi)動(dòng)脈瘤致病機(jī)理中最主要致病途徑。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R739.41;R3416

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉兵;顱內(nèi)動(dòng)脈瘤與遺傳性結(jié)締組織疾病[J];國外醫(yī)學(xué).神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊(cè);2004年01期

2 李平根;李美華;;顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的遺傳學(xué)研究進(jìn)展[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2008年06期

3 岳文濤;寇志平;;破裂和未破裂椎動(dòng)脈瘤的血管內(nèi)治療[J];臨床醫(yī)學(xué);2013年09期

4 袁曉東;吳勇;;影響血管內(nèi)介入治療顱內(nèi)動(dòng)脈瘤預(yù)后的相關(guān)因素分析[J];成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年04期

5 眭維國;鄒和群;;腎移植后腦血管病危險(xiǎn)因素[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2008年11期

6 石磊;王義榮;;顱內(nèi)動(dòng)脈瘤伴多囊肝腎病2例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J];山東醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校學(xué)報(bào);2008年01期

7 米存東;張素潔;;基質(zhì)金屬蛋白酶與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎骨侵蝕關(guān)系的研究進(jìn)展[J];內(nèi)科;2011年04期

8 吳一娜;楊鵬飛;方亦斌;韓靜峰;Janina Beilner;黃清海;劉建民;;DSA血流定量分析軟件評(píng)價(jià)血流導(dǎo)向裝置治療顱內(nèi)大型動(dòng)脈瘤的有效性[J];中國腦血管病雜志;2013年10期

9 黃清海;楊鵬飛;;顱內(nèi)動(dòng)脈瘤血管內(nèi)介入治療中國專家共識(shí)(2013)[J];中國腦血管病雜志;2013年11期

10 徐釤;溫生貴;;顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的臨床危險(xiǎn)因素研究進(jìn)展[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2009年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 劉小菁;吳文超;李良;陳槐卿;;低剪切力上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞PIGF基因及蛋白表達(dá)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑分析[A];2008年全國生物流變學(xué)與生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 孫曉楓;實(shí)驗(yàn)性大鼠腦動(dòng)脈瘤發(fā)生機(jī)制及Doxycycline和雷公藤預(yù)防作用的分子生物學(xué)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2003年

2 殷尚炯;一氧化氮（NO）在實(shí)驗(yàn)性大鼠動(dòng)脈瘤形成和增大中的作用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2004年

3 郭予大;顱內(nèi)動(dòng)脈瘤動(dòng)物模型建立及發(fā)病機(jī)制的研究[D];四川大學(xué);2005年

4 顧宇翔;顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成的相關(guān)因素研究[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

5 伍剛;血管平滑肌雌激素受體表達(dá)與顱內(nèi)動(dòng)脈瘤相關(guān)性研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2007年

6 張文清;犬嫁接性梭形動(dòng)脈瘤轉(zhuǎn)移性生物膜包裹治療的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2007年

7 王利新;主動(dòng)脈夾層致病相關(guān)基因的篩選與鑒定[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

8 路蟬伊;結(jié)核不同感染狀態(tài)下宿主對(duì)結(jié)核特異性抗原獲得性免疫應(yīng)答的差異及相關(guān)分子標(biāo)識(shí)篩選[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

9 賴小彪;前交通動(dòng)脈瘤形成、破裂和復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素及破裂的血流動(dòng)力學(xué)機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2013年

10 宋磊;仿生搏動(dòng)流體應(yīng)力對(duì)小口徑組織工程血管的生物學(xué)作用及相關(guān)機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王宇峰;多層螺旋CTA在顱內(nèi)未破裂動(dòng)脈瘤的應(yīng)用研究[D];吉林大學(xué);2011年

2 陳萍;齦溝液中MMP-8及TIMP-1水平與牙周炎的關(guān)系[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

3 崔傳玨;C反應(yīng)蛋白對(duì)心肌細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-10表達(dá)調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

4 陳名杰;膽固醇過負(fù)荷對(duì)脂肪細(xì)胞分泌內(nèi)脂素的影響及其機(jī)制[D];中南大學(xué);2011年

5 王毅;血管生成素及其受體在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的表達(dá)和臨床意義的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

6 孔翰;縫隙連接蛋白43在低切應(yīng)力誘導(dǎo)小鼠頸總動(dòng)脈重建中的作用及其機(jī)制[D];上海交通大學(xué);2011年

7 陶瑩;顱內(nèi)動(dòng)脈瘤患者相關(guān)因素對(duì)開顱手術(shù)預(yù)后的影響及顱內(nèi)動(dòng)脈瘤危險(xiǎn)因素分析[D];浙江大學(xué);2007年

8 姚繼國;動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者臨床預(yù)后危險(xiǎn)因素研究[D];上海交通大學(xué);2007年

9 張緒新;實(shí)驗(yàn)性大鼠高血壓腦動(dòng)脈瘤模型的建立[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

10 邢國祥;顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的臨床及全腦血管造影特征分析[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

，

本文編號(hào)：2679264