【摘要】：目的：采用LPS刺激的人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞模型，觀察APC對炎癥反應(yīng)及凝血纖溶反應(yīng)的影響。 方法：用膠原酶灌洗消化方法，分離人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞，細(xì)胞傳至第二代后分組：SFM對照組、PBS對照組、LPS組(1μg／ml)、APC組(7μg／ml)、PRE-APC組(APC處理30分鐘后加入LPS)和POST-APC組(LPS誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞30分鐘后加入APC)。分別于加入LPS即刻，加入LPS后4hr、8hr、12hr及24hr采集細(xì)胞培養(yǎng)上清液，ELISA方法測定t-PA、PAI-1、IL-6和IL-8濃度。于LPS刺激后24小時收集細(xì)胞并提取RNA。RT-PCR方法檢測各組各個時間點(diǎn)相應(yīng)細(xì)胞因子、纖溶反應(yīng)因子、TF、EPCR以及TM mRNA的變化，并進(jìn)行半定量分析。 結(jié)果： 1．人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞受到LPS刺激后，t-PA水平較對照組明顯降低，至24小時仍呈下降趨勢。用APC處理LPS誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞后，可使t-PA表達(dá)回升，同樣具有時相關(guān)系。t-PA的mRNA變化與蛋白質(zhì)的表達(dá)相同。 LPS刺激后，PAI-1水平自4小時開始升高，至24小時仍呈上升趨勢，較對照組明顯升高；用APC處理LPS誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞后PAI-1的水平下降，同樣具有時間依賴關(guān)系。PAI-1 mRNA變化與蛋白質(zhì)變化相同。 2．人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞受LPS誘導(dǎo)后，，TM、EPCR mRNA表達(dá)下降。TF mRNA表達(dá)升高；用APC處理后，可使TM、EPCR mRNA表達(dá)回升，TF mRNA表達(dá)進(jìn)一步升高。 3．人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞受到LPS刺激后，細(xì)胞因子IL-6、IL-8較SFM對照組及PBS對照組明顯升高，于4小時開始，至24小時仍呈上升趨勢。用APC處理LPS誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞后，可使IL-6、IL-8水平進(jìn)一步升高。IL-6、IL-8 mRNA的變化與蛋白質(zhì)相同。
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R363

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2651216