【摘要】： 一、神經(jīng)激肽B受體(NK3)在小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的定位分布及與加壓素(VP)、CABA、阿片μ受體(MOR)的共存關(guān)系。 1、神經(jīng)激肽B受體(NK3)在小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的定位分布。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法對小鼠中樞系統(tǒng)內(nèi)NK3受體的分布進(jìn)行了觀察，結(jié)果表明：在小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的絕大部分區(qū)域，NK3受體樣免疫陽性產(chǎn)物位于胞體和樹突上，少部分區(qū)域位于神經(jīng)氈(neuropil)內(nèi)。大量NK3受體樣免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元出現(xiàn)于前嗅核、伏隔核、隔區(qū)、腹側(cè)蒼白球、蒼白球、尾殼核、終紋床核、下丘腦前區(qū)、下丘腦結(jié)節(jié)區(qū)、下丘腦外側(cè)區(qū)、穹隆周區(qū)、視上核、弓狀核、乳頭體、黑質(zhì)、腹側(cè)被蓋區(qū)、紅核后區(qū)、上丘和下丘、導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)、孤束核、及延髓和脊髓背角淺層。在大腦皮質(zhì)的淺層、梨狀皮質(zhì)、背側(cè)海馬、杏仁核、腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)等核團(tuán)內(nèi)也含有一定數(shù)量的陽性神經(jīng)元。在丘腦的中線核團(tuán)和板內(nèi)核、腹側(cè)海馬和腳間核等處，NK3受體陽性免疫反應(yīng)產(chǎn)物主要位于神經(jīng)氈內(nèi)。 2、神經(jīng)激肽B受體(NK3)在室旁核和視上核與加壓素(VP)的共存關(guān)系及高滲刺激下NK3受體陽性神經(jīng)元表達(dá)FOS。在室旁核和視上核NK3受體與加壓素共存于一部分細(xì)胞，室旁核中NK3受體免疫陽性反應(yīng)產(chǎn)物不如視上核密集，且神經(jīng)元數(shù)目以后者為多。在室旁核和視上核雙標(biāo)神經(jīng)元占NK3 第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文 陽性神經(jīng)元總數(shù)的65％和42％，占加壓素陽性神經(jīng)元總數(shù)的60％ 和39％。在高滲鹽水刺激的條件下，室旁核中大部分N’K3受體樣 陽性神經(jīng)元可表達(dá)FOS。結(jié)論N’K3受體廣泛分布于小鼠中樞神 經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)提示它可能具有重要的生理功能。在室旁核和視上核存 在NK3受體與加壓素的雙標(biāo)神經(jīng)元，與水鹽代謝有關(guān)的神經(jīng)元在 高滲刺激下表達(dá)FOS，同時可以激活含NK3受體神經(jīng)元，提示 NK3受體通過調(diào)節(jié)加壓素釋放參與水鹽代謝和滲透壓的調(diào)節(jié)。 3、小鼠脊髓內(nèi)神經(jīng)激肽B受體（＊K3）與阿片卜受體 （MOR）和 GABA的共存關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟陉U明神經(jīng)激 肽B受體（NK3）參與脊髓痛覺調(diào)制的機(jī)制。首先觀察了小鼠脊髓 后角阿片。受體（MOR）和NK3受體的共存情況。激光共聚焦顯 微觀察表明：脊髓背角淺層＊11層44％的N’K3受體樣神經(jīng)元呈MOR 樣陽性，，而MOR樣陽性細(xì)胞總數(shù)的93％神經(jīng)元呈N’K3受體樣陽性。 其次，在MOfuN’wx雙重標(biāo)記神經(jīng)元和NOS樣陽性神經(jīng)元中進(jìn)行免 疫熒光三重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示有37％的NK3受體樣陽性神經(jīng)元呈 NOS免疫陽性，占后角淺層NOS樣免疫陽性神經(jīng)元總數(shù)的82％。 沒有發(fā)現(xiàn)三重標(biāo)記的神經(jīng)元。大量N’K3受體樣神經(jīng)元呈GABA陽 性，但未見NK3／GABA雙標(biāo)神經(jīng)元含MOR。約有43％的NK3受 體樣陽性神經(jīng)元含GABA，占GABA陽性神經(jīng)元總數(shù)的7％，觀察 了做H重標(biāo)記的61個MOR陽性神經(jīng)元，只有2個呈GABA陽性。 結(jié)果提示在脊髓后角淺層的N’K3受體神經(jīng)元中存在兩種細(xì)胞亞群， 而且N’K3受體參與脊髓痛覺信息調(diào)制的機(jī)制可能與阿片肽和一氧 化氮（NO）兩種途徑的調(diào)節(jié)有關(guān)。 二、小鼠消化道神經(jīng)激肽B受體（NK3）的定位研究及共 頭國家自然科學(xué)基金熒助項(xiàng)目（39600045，39970377，39870109）5 第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文 存關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)ABC染色和兔疫熒光組織化學(xué) 染色方法觀察了神經(jīng)激肽B受體（NK3）在小鼠消化道的分布及其 與 NOS（nitric oxide synthase）、CR（Calretimn）和 PV（Pavelbumin） 等神經(jīng)遞質(zhì)或調(diào)質(zhì)的共存關(guān)系。結(jié)果表明NK3受體樣陽性的神經(jīng)元 胞體及神經(jīng)纖維主要分布在十二指腸和空、回腸及結(jié)腸的粘膜下層 神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢，食管和胃、直腸的神經(jīng)叢未見NK3受體樣陽 性產(chǎn)物；NK3受體樣陽性產(chǎn)物大部分局限于神經(jīng)細(xì)胞表面，在胞質(zhì) 和一些軸突內(nèi)部也存在，在胞質(zhì)中染色較細(xì)胞表面淺。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表 明NK3 受體樣兔疫陽性神經(jīng)元約占腸神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元總數(shù)的 0．5％一1％。小鼠腸鋪片肌間神經(jīng)叢內(nèi)NK3受體與NOS、CR、PV等 神經(jīng)遞質(zhì)均有不同比例的共存，此結(jié)果提示小鼠消化道內(nèi)NK3受體 樣陽性神經(jīng)元可能參于消化功能的調(diào)節(jié)。大部分N’K3受體樣陽性神 經(jīng)元呈 Dogiel 11型神經(jīng)元形態(tài)，且與主要是 Dogiel 11型神經(jīng)元形態(tài)、 內(nèi)源性感覺神經(jīng)元為主的CR陽性神經(jīng)元呈雙重標(biāo)記，椎測小鼠腸 鋪片肌間神經(jīng)叢內(nèi)N’K3受體神經(jīng)元是內(nèi)源性感覺神經(jīng)元，但少部分 （N’K3／NOS）可能是抑制性中間神經(jīng)元，加上以往的功能上和機(jī)能 學(xué)證據(jù)都提示此受體存在于膽鹼能神經(jīng)元上，與小鼠腸道的收縮和 舒張有關(guān)。 三、小鼠周圍器官神經(jīng)激肽B受體的分布。免疫組織化學(xué)實(shí) 驗(yàn)結(jié)果表明：在所取組織中有多種組織均呈NK3受體樣兔疫反應(yīng)陽 性，陽性產(chǎn)物位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，其表達(dá)程度由強(qiáng)到弱依次為：胰臟、 肺、心臟、胃和小腸：呈較高表達(dá)的組織有：胰臟、肺、心臟、暈 丸；呈中等程度表達(dá)的有：胃、小腸；呈低表達(dá)或無表達(dá)的有；肝 臟、腎臟，在膽囊和胸腺無表達(dá)，兔疫組化染色結(jié)果特異性較好， A國家自然科學(xué)基全資助項(xiàng)目（39600045，39970377，39870109）6 第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文 背景
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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1 彭曦,馮晉斌,汪仕良;顯示大鼠胃肌間神經(jīng)叢的鋪片方法[J];解剖學(xué)雜志;1999年04期

本文編號：2649374