【摘要】： 本文分為兩部分。第一部分對(duì)血腦屏障（BBB）在腎上腺素 （AD）作用下瞬時(shí)開放時(shí)對(duì)免疫分子入腦的影響進(jìn)行了探索，第二部 分探討了腦對(duì)超抗原SEB引起的免疫活動(dòng)的反應(yīng)和可能的調(diào)節(jié)方式。 CNS處于相對(duì)特殊的免疫狀態(tài)，主要原因之一是由于BBB的存 在。BBB對(duì)進(jìn)出腦的物質(zhì)進(jìn)行選擇性通透，限制血漿中的免疫分子、細(xì) 胞的自由進(jìn)出，從而保證了腦的結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定。然而，BBB在多種 因素下可不同程度的開放，使得血漿中正常情況下原本不能進(jìn)入腦內(nèi)的 物質(zhì)入腦，這就為外周免疫信息物質(zhì)直接入腦以及改變腦的免疫特免狀 態(tài)提供了條件。 影響B(tài)BB的多種因素中，血壓是一個(gè)敏感而常見的因素。本研究 以腎上腺素（AD）靜脈注射引起大鼠血壓瞬時(shí)升高為手段，研究了 BBB的開放與血漿蛋白入腦的關(guān)系。首先，以伊文思藍(lán)（EB）活體染 色，利用EB的熒光觀察BBB開放。這種方法的建立使BBB開放觀察 的靈敏性大為提高，并且觀察到由AD注射引起B(yǎng)BB的開放呈現(xiàn)圓形 斑片狀，在全腦的分布也有一定的規(guī)律；籍助于這種方法，使觀察很 小劑量AD注射引起的BBB開放成為可能：給予大鼠不同劑量AD引 第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文 一 起血壓不同程度的瞬時(shí)升高，可導(dǎo)致8＊B不同程度的開放：血壓升高 的幅度與時(shí)程，尤其是時(shí)程對(duì)BBB的開放起主要作用。AD開放BBB 在一定范圍內(nèi)呈劑量依賴方式，5卜 g從g AD引起的大鼠動(dòng)脈壓變化為 BBB開放閾值，低于該劑量者則用EB熒光觀察法不能檢測(cè)到BBB的 開放。 但是閾下的血壓升高刺激在大鼠腹腔內(nèi)注射LPS時(shí)亦可開放 BBB，提示免疫刺激機(jī)體后BBB的脆性增加，這可能為免疫激發(fā)時(shí)外 周的免疫信息物質(zhì)入腦創(chuàng)造條件。 另一方面，BBB開放導(dǎo)致的血漿內(nèi)的免疫效應(yīng)分子入腦會(huì)對(duì)腦的 正常免疫狀態(tài)構(gòu)成威脅。在這方面，本文就血漿免疫球蛋白在血壓瞬 時(shí)升高時(shí)是否可以通過BBB進(jìn)行了多方面調(diào)查，經(jīng)免疫組織化學(xué)、免 疫電鏡以及蛋白印跡法的研究證實(shí)，當(dāng)血壓一過性升高時(shí)，血漿免疫 球蛋白IgG能夠通過BBB進(jìn)入腦組織，并且是經(jīng)由腦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì) 胞胞漿，再進(jìn)入腦實(shí)質(zhì)的路線為主。該結(jié)果提示，當(dāng)外周某些針對(duì)腦 成分抗原的抗體效價(jià)較高時(shí)，是可以在血壓瞬時(shí)升高時(shí)通過BBB入腦 的，這可能時(shí)造成腦免疫損傷的一個(gè)可能機(jī)制。 第二部分探討了腦對(duì)超抗原SEB引起的外周免疫活動(dòng)的反應(yīng)和可 能的調(diào)節(jié)腦區(qū)，并研究了信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子p44付2 MAPK在此過程中的作 用。 超抗原是以可同時(shí)結(jié)合 MHC 11類分子溝槽外側(cè)和 T細(xì)胞受體 V日 結(jié)構(gòu)域而大量激活 T細(xì)胞，且無需抗原遞呈細(xì)胞（APC）加工為特點(diǎn) 的一類抗原。超抗原強(qiáng)大的激發(fā)免疫的能力，可能作為研究神經(jīng)免疫 調(diào)節(jié)的重要工具。其中，金黃葡萄球菌腸毒素B（SEB）因可激活 HPA軸而受到關(guān)注，但目前文獻(xiàn)中僅有SEB誘發(fā)下丘腦室旁核 （PVH）表達(dá) C－FOS的報(bào)道，而對(duì)其它腦區(qū)未作描述。本文對(duì) SEB刺 激小鼠后腦內(nèi)c－F。s的表達(dá)進(jìn)行了普查，并了解注射后4個(gè)時(shí)間點(diǎn)血漿 一2一 第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文 一 TNF a的濃度變化和腦內(nèi)c－Fos陽性細(xì)胞的強(qiáng)度及分布情況，發(fā)現(xiàn)腦 內(nèi)C－F。S強(qiáng)陽性反應(yīng)滯后于血漿TNF－口峰值達(dá)到的時(shí)間，而且，扣帶 皮質(zhì)（Cg）、海馬（Hipp）神經(jīng)元表達(dá) CfOS的模式與 PVH及其它核 團(tuán)不同。 作為邊緣系統(tǒng)的高級(jí)中樞，Cg對(duì)情緒。記憶等活動(dòng)具有重要的作 用，而情緒、記憶等活動(dòng)與免疫活動(dòng)聯(lián)系緊密。本實(shí)驗(yàn)中切除小鼠雙 側(cè)Cg后檢測(cè)胸腺細(xì)胞的增殖功能，發(fā)現(xiàn)胸腺細(xì)胞增殖反應(yīng)顯著增強(qiáng)， 提示在一般情況下，Cg對(duì)胸腺細(xì)胞的增殖起到某種抑制作用，因而Cg 是與調(diào)節(jié)外周免疫應(yīng)相關(guān)的腦區(qū)之一。 研究顯示MAPK家族與SEB引起的TNF川產(chǎn)生有緊密的關(guān)系， 而腦源性MAPK在與免疫相關(guān)核團(tuán)的表達(dá)提示其可能調(diào)控SEB引起的 免疫反應(yīng)。本研究證實(shí)，SEB刺激可引起磷酸化的 p44閃2 MAPK在 PVH、視上核（SON）、藍(lán)斑（LC）等核團(tuán)高表達(dá)，與 c－F。s陽性細(xì) 胞相似，但范圍較為局限。腦室內(nèi)注射MEKI抑制劑PD98059，特異 性抑制 p44／42 MAPK活性，，SEB刺激將使腦內(nèi) C－F。S的表達(dá)顯著減 少，WIFQ水平降低。提示 p44慫2 MAPK在 SEB引起的免疫活動(dòng)的 調(diào)控中發(fā)揮作用。 本研究的結(jié)論為： 1．AD引起的瞬時(shí)血壓升高可導(dǎo)致BBB一過性開放。這種開放在一定 范圍內(nèi)是藥物劑量依賴方式的，與血壓升高的幅度和時(shí)程呈正相 關(guān)。 2．機(jī)體受到免疫刺激后BBB脆性增加，伴有其它因素時(shí)易于開放。 3．BBB一過性開放可致血循環(huán)IgG通過BBB進(jìn)入腦組織，提示外周 產(chǎn)生的抗體可經(jīng)開放的BBB入腦導(dǎo)致免疫損傷，成為腦自身免疫 疾病的可能發(fā)病機(jī)制。 一3一 第四軍
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：R392

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 徐震;腹腔免疫性和傷害性刺激激活的腦內(nèi)神經(jīng)元活動(dòng)[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

本文編號(hào)：2647094