【摘要】：目的 隨著生物磁技術(shù)的迅猛發(fā)展,磁治療在醫(yī)學(xué)中的基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用研究越來越受到關(guān)注,但是有關(guān)靜磁場對牙周炎組織生物效應(yīng)的研究未見報(bào)道。 成骨細(xì)胞是保持骨形態(tài)結(jié)構(gòu)和性能的最小結(jié)構(gòu)和功能單位,作為骨組織的重要功能細(xì)胞,在骨的形成過程中起著關(guān)鍵作用。成骨細(xì)胞的增殖、骨基質(zhì)的分泌和鈣鹽沉積對骨的形成、重建和修復(fù)具有重要意義。 本實(shí)驗(yàn)通過建立體外培養(yǎng)大鼠顱骨成骨細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?排除了體內(nèi)復(fù)雜的生物環(huán)境因素的影響,觀察不同劑量的靜磁場對體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞生長的直接效應(yīng),專一的分析研究靜磁場刺激對成骨細(xì)胞的生長和功能變化的影響;建立牙周炎動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?研究靜磁場對牙周膜組織結(jié)構(gòu)、功能的影響。從細(xì)胞水平和分子水平探討靜磁場對骨生長的作用機(jī)制,為臨床選擇合適的磁場參數(shù),科學(xué)的利用磁場療法,提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 1 靜磁場的設(shè)計(jì) 將釹鐵硼永磁體充磁后固定于特制的長方形槽內(nèi),其上方可以放置各種細(xì)胞培養(yǎng)板,調(diào)節(jié)槽裝置的高度,使培養(yǎng)板底部的磁場強(qiáng)度分別為0Gs、400Gs、620Gs、830Gs、1080Gs。 2 大鼠顱骨成骨細(xì)胞的分離、培養(yǎng) 無菌操作下取出Wistar乳鼠頭蓋骨,刮去骨膜和軟組織,經(jīng)0.25%胰酶和1mg/mlⅡ型膠原酶消化后,應(yīng)用差速黏附法分離成纖維細(xì)胞,置于37℃、5%CO_2飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),3天換液,待細(xì)胞長滿平底后傳代,備用。 3 成骨細(xì)胞的增殖活性測定 成骨細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板內(nèi)培養(yǎng)24h,將各培養(yǎng)板分別放入不同強(qiáng)度磁場中,繼續(xù)培養(yǎng)24h、48h、72h。在每時(shí)間點(diǎn)應(yīng)用MTT法,測定490nm
【圖文】：

1為磁體的位置(A)和磁場強(qiáng)度(B)平面骨成骨細(xì)胞體外培養(yǎng)的建立細(xì)胞的分離、培養(yǎng)川天的Wsiart乳鼠5只，投人75%酒精頭蓋骨，刮去骨膜和軟組織，用D一巧分鐘，棄去消化液，加入lm州耐鐘、5分鐘離心骨片和細(xì)胞，棄上清液反復(fù)吹打骨片和細(xì)胞，將細(xì)胞懸液纖維細(xì)胞后，置于37℃、5%CO:飽和長滿平底后傳代，備用。細(xì)胞的I型膠原免疫組化染色法。細(xì)胞以1x105/血接種于預(yù)置小養(yǎng)72小時(shí)。取出蓋玻片，PBS沖洗，，，

經(jīng)酶消化分離大鼠顱骨的骨片后，鏡下可見大量的懸浮細(xì)胞。經(jīng)差速薪附法分離的成骨細(xì)胞培養(yǎng)2h4后，，可見細(xì)胞呈梭形、三角形、多角形等散在貼壁生長，見圖l一。d7左右細(xì)胞基本融合，長滿培養(yǎng)瓶底，見圖1一3。
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R35;R781.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2646663