【摘要】：第一部分 衰老過程中伴有生理功能的下降和感染、惡性腫瘤以及自身免疫性疾病發(fā)病率的增加。近年來，許多研究者提出細胞凋亡的改變與這些年齡相關(guān)性疾病的發(fā)生密切相關(guān)。但是，對于衰老過程中凋亡是如何改變的，以及衰老如何影響凋亡的調(diào)控機制，人們還知之甚少。哺乳動物細胞中的凋亡通路主要有兩種：一種是細胞表面死亡受體介導的細胞凋亡通路(細胞外通路)，另一種是以線粒體為核心的細胞凋亡通路(細胞內(nèi)通路)。有關(guān)凋亡在衰老T細胞中的變化目前尚無定論。本研究選用C57／BL6小鼠脾臟T淋巴細胞為研究對象，，通過IL-2與ConA聯(lián)合刺激誘導T細胞凋亡，來觀察青年(2月齡)與老年(26月齡)小鼠T淋巴細胞凋亡信號通路的差異，以闡明后者產(chǎn)生凋亡抗性的機理。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，IL-2(10ng／ml)與ConA(6μg／ml)聯(lián)合刺激6，16，32h后，老年小鼠T細胞的凋亡率分別為19.0±3.7％，35.9±5.9％，52.0±6.9％，明顯低于青年T細胞的29.4±7.5％，65.6±6.4％，82.3±8.7％(n=3，p0.05)；與青年T細胞相比，ConA刺激后老年T細胞Th2類細胞因子(IL-4)的表達增加，而Th1類細胞因子(IL-2)的表達減少：Western Blot分析細胞凋亡信號通路相關(guān)蛋白發(fā)現(xiàn)，老年T細胞表面IL-2Ra、FasL的表達量在未受刺激和刺激后均比青年T細胞低，而FLIP在rnRNA和蛋白水平表達都增高；此外，IL-2與ConA聯(lián)合刺激后，老年T細胞內(nèi)NF-κB的表達水平和PARP的切割要比青年T細胞中低，而Survivin的表達量則比青年T細胞中高；同時，用羅丹明123檢測線粒體膜電位發(fā)現(xiàn)，老年T細胞的線粒體膜電位總體要低于青年T細胞，青年T細胞在刺激0.5h后，線粒體膜電位即開始顯著下降，而老年T細胞要在2h后膜電位才開始明顯下降，說明刺激后老年T細胞線粒體膜電位下降要比青年T細胞慢。 因此，在IL-2與ConA刺激導致的細胞凋亡中，老年小鼠T細胞由于IL-2Rα和NF-κB表達相對較低，使得Fas-FasL信號通路較青年T細胞中要弱，導致凋亡抑制蛋白FLIP在mRNA和蛋白水平的表達升高，促凋亡蛋白FasL表達下降：此外，由于凋亡抑制蛋白Survivin較青年小鼠表達量高，且老年小鼠線粒體的功能發(fā)生變化(線粒體膜電位降低較慢)，以及由于老年小鼠T細胞向Th2型轉(zhuǎn)變，老年T細胞在IL-2／ConA刺激導致的細胞凋亡中表現(xiàn)出凋亡抗性。 第二部分 淋巴系統(tǒng)中，T淋巴細胞的發(fā)育及功能發(fā)揮與細胞凋亡密切相關(guān)。本室以往的研究證明：以C57BL／6J小鼠脾T淋巴細胞為對象，通過IL-2和conA
【學位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R285;R392

【引證文獻】

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1 張亞軍;太極拳干預對非小細胞肺癌術(shù)后患者外周血細胞表面CD55和CD59表達的影響[D];上海體育學院;2010年

本文編號：2639416