【摘要】：本研究首次從人、大鼠、小鼠中克隆了一個肝臟特異表達(dá)的新基因LZP。人LZP cDNA長2255bp，包含一個1635bp的開放閱讀框，編碼545個氨基酸。LZP基因位于人10號染色體長臂21區(qū)3帶，長約40kb，包含9個外顯子和8個內(nèi)含子。小鼠LZP基因定位在10號染色體B4區(qū)，由9個外顯子組成，編碼2個剪接本；大鼠LZP基因定位在20號染色體長臂13區(qū)，有10個外顯子。人、小鼠、大鼠LZP蛋白高度同源，同源度超過了93％。生物信息學(xué)分析表明LZP蛋白含有多個結(jié)構(gòu)域，在其N端是一段信號肽，緊隨其后的是3個EGF-like結(jié)構(gòu)域，C端則是占了整個蛋白幾乎一半的透明帶結(jié)構(gòu)域�；蚝偷鞍仔蛄幸烟峤恢罣enBank，登錄號分別為AY013707(人LZP)，，AF356506(小鼠LZP variant Ⅰ)，AY180915(小鼠LZP variant Ⅱ)，以及AY353853(大鼠LZP)。 Northern雜交顯示LZP基因是一個肝臟特異表達(dá)的基因，在所有被檢測的組織中(人23種組織，小鼠8種組織)，只在肝臟中檢測到LZP基因的表達(dá)。而原位雜交實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步顯示LZP基因是在肝細(xì)胞中表達(dá)的。LZP基因在小鼠胚胎發(fā)育早期就開始表達(dá)，其表達(dá)甚至早于肝臟分化。盡管主要定位于肝臟細(xì)胞核膜上，LZP蛋白也可以分泌到血液里。LZP基因在肝癌組織中，無論是mRNA水平還是蛋白水平的表達(dá)量均顯著下降，而這種表達(dá)量的下降至少在部分病人中與LZP基因啟動子甲基化水平的加強(qiáng)有密切的關(guān)系。然而，LZP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染肝細(xì)胞株L02及SMMC-7721，得到穩(wěn)定表達(dá)LZP蛋白的克隆，其增殖、細(xì)胞周期、凋亡較對照都沒有發(fā)生顯著變化，提示LZP基因表達(dá)水平的下降在肝癌發(fā)生中可能并不起非常重要的作用。 總之，現(xiàn)階段得到的數(shù)據(jù)提示LZP蛋白作為一個肝臟特異蛋白，可能在肝臟的功能及發(fā)育中起重要的作用。而且在幾乎所有己檢測的肝癌病人中LZP都顯著下調(diào)，加之能夠分泌到血液中，便于檢測，因此有望成為新的肝癌臨床檢測指標(biāo)。
【圖文】：

目前尚不清楚是否有多個剪接本。序列己提交，GenBank登錄號為AY353853。同源分析顯示人、小鼠、大鼠L乙P蛋白高度同源，同源度超過了93%(圖7)。圖7人、小鼠、大鼠LZP蛋白的同源比較FIG7.MultiPlesequeneealignmentofhurnan，mouseandratLZPProteins.Conservedaminoae記5areshaded.

復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論第二部分LZP基因及蛋白的基本特性二、尤2尸基因的組織表達(dá)譜為了檢測人LZPmRNA在不同組織中的表達(dá)情況，我們以32P標(biāo)記的部hLZPcDNA為探針，對CLONTECH23種組織的Northem膜進(jìn)行雜交，結(jié)果示只在肝臟組織中檢測到一條大小約為2.4Kb的條帶，提示hLZP基因只在肝組織中特異表達(dá)(圖8)。，O七月芝。乙。口勺已.一O一.‘己PV習(xí)呂U們﨑J.習(xí)2月合鉀濘勺石口工豈嗀‘S衛(wèi)三扒盧月

本文編號：2638714