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大鼠消化道GnRH受體的研究

發(fā)布時間:2020-04-12 03:20
【摘要】:促性腺激素釋放激素(GnRH)是一種含十個氨基酸的肽類激素,首先從哺乳動物的下丘腦中分離得到,被認為是性腺激素從腦垂體釋放的生理調(diào)節(jié)因子,它由下丘腦神經(jīng)內(nèi)分泌細胞合成,以脈沖方式分泌,經(jīng)下丘腦-垂體-門脈循環(huán)進入垂體前葉。在垂體前葉內(nèi),GnRH作用于促性腺激素分泌細胞特異性的GnRH受體,通過受體的介導,刺激LH和FSH的分泌,從而調(diào)節(jié)性腺內(nèi)配子形成和激素功能。最近的研究發(fā)現(xiàn)GnRH及其受體可存在于下丘腦-腦垂體外,如:性腺(卵巢、睪丸、乳腺、前列腺和胎盤等)、腎上腺皮質(zhì)中,對這些組織和器官的正常功能起調(diào)節(jié)作用。同時它們還存在于一些性腺軸起源的腫瘤及非性腺軸起源的腫瘤如:卵巢癌、肺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌等細胞上,對這些腫瘤細胞的生長起調(diào)控作用。 我們先前的研究發(fā)現(xiàn)GnRH存在于大鼠的胃、腸、胰系統(tǒng),GnRH mRNA也存在于上述器官。說明大鼠消化道能自身合成GnRH。同時,免疫組織化學染色發(fā)現(xiàn)大鼠頜下腺和胰臟有GnRH受體免疫反應性。說明它們是GnRH的靶器官。那么,大鼠消化道是否有GnRH受體的存在,消化系統(tǒng)GnRH受體的基因序列如何,GnRH對消化系統(tǒng)有何功能意義,均未見報道。所以我們在先前研究的基礎上,采用免疫組織化學、原位雜交、RT-PCR、基因克隆測序及ELISA技術研究了GnRH受體、GnRH受體mRNA在大鼠消化道中的定位,
【圖文】:

電泳圖譜,熒光染色,條帶,瓊脂糖電泳


經(jīng)2%的瓊脂糖電泳后發(fā)現(xiàn)285,185和S5出現(xiàn)三條條帶,其中條帶3,S5熒光染色較淺,285處熒光染色最深。提示tRNA的提取比較完整,沒有發(fā)生降解。(見圖4)圖4:提取tNRA的電泳圖譜。條帶l,5:Marker。條帶2,3,4:tRNAGnHR受體基因片段的PcR擴增

受體,信號物質(zhì),胞核,胞質(zhì)


GORH受體田RNA雜交信號在大鼠領下腺的定位圖A3:領下腺漿液性腺抱自創(chuàng)漁測到CkIRH受體田又NA雜交信號()a.信號物質(zhì)分布在胞質(zhì)內(nèi),胞核陰性;疬0.圖3B:領下腺分泌管b()有緞測到Q訊H受體田又NA雜交信號.信號物質(zhì)分布在胞質(zhì)內(nèi),胞核陰性.x400。
【學位授予單位】:第四軍醫(yī)大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2000
【分類號】:R329

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