發(fā)布時間：2020-03-25 06:54

【摘要】： 多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)是創(chuàng)傷及感染后最嚴(yán)重的并發(fā)癥，發(fā)病率高，往往由于來勢兇猛，病情發(fā)展急劇，難以被迄今的器官支持治療所遏制，，死亡率很高。腸道被認(rèn)為是MODS的啟動器官，許多研究證實，嚴(yán)重創(chuàng)傷和感染早期，腸黏膜屏障功能減退、腸道微生態(tài)失衡以及腸黏膜免疫功能失調(diào)，大量炎癥介質(zhì)如TNF-α、IL-1等產(chǎn)生，引起全身炎癥反應(yīng)綜合征(system inflammatory reaction syndrome，SIRS)，導(dǎo)致器官功能障礙，最終發(fā)展為MODS。 腸黏膜免疫系統(tǒng)是一個完整的組織網(wǎng)絡(luò)，由Peyer淋巴結(jié)、腸黏膜固有層淋巴細(xì)胞、上皮間淋巴細(xì)胞(intraepithelial lymphocytes，IELs)組成。其主要的效應(yīng)細(xì)胞有CD4~+T細(xì)胞、CD8~+T細(xì)胞、B細(xì)胞、分化的漿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞等；主要的效應(yīng)分子是SIgA。黏膜免疫活動包括腸淋巴細(xì)胞活化、歸巢和SIgA分泌等。它的主要功能是參與機(jī)體的免疫防御，如參與機(jī)體的過敏反應(yīng)、超敏反應(yīng)和炎癥。近年來，越來越多的研究表明，腸黏膜損傷在MODS發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，但構(gòu)成腸黏膜屏障的重要組成部分——腸黏膜免疫系統(tǒng)在MODS中的作用卻不清楚。 腸淋巴細(xì)胞歸巢作為腸黏膜免疫系統(tǒng)重要免疫活動之一，它參與了腸黏膜急、慢性炎癥的發(fā)生；使腸黏膜有效地行使免疫監(jiān)視和免疫清除功能；是腸黏膜免疫系統(tǒng)與系統(tǒng)免疫系統(tǒng)溝通的重要橋梁。胃腸多肽、細(xì)胞黏附分子及一些細(xì)胞因子可能對淋巴細(xì)胞的遷移產(chǎn)生重要影響。然而MODS時腸黏膜淋巴細(xì)胞遷移的規(guī)律及其調(diào)控機(jī)制卻并不清楚。 此外，腸黏膜的神經(jīng)細(xì)胞與神經(jīng)介質(zhì)、內(nèi)分泌細(xì)胞與多肽分子、免疫細(xì)胞與細(xì)胞因子都是機(jī)體中數(shù)量最集中的部位。胃腸多肽是神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)中的重要調(diào)節(jié)因子。研究表明，腸黏膜固有層和Peyer淋巴結(jié)密集分布著腸血管活性多肽(vasoactive intestinal polypeptide，VIP)和生長抑素(somatostatin，SST)等肽能神經(jīng)纖維，這些肽能神經(jīng)纖維和上皮層及固有層的淋巴細(xì)胞，巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞毗鄰，直接調(diào)節(jié)著腸黏膜免疫系統(tǒng)的功能。此外，特異性VIP受體廣泛存在于Peyer淋巴 重慶醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文 結(jié)高內(nèi)皮小靜脈(high endothelial venule，HEV)及淋巴管內(nèi)部和周圍，以及濾泡邊緣 的T細(xì)胞中，SST受體也在小鼠Peyer淋巴結(jié)和人腸豁膜固有層淋巴細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)， 這些受體可能對于淋巴細(xì)胞通過Peyer淋巴結(jié)或腸豁膜固有層的遷移具有重要的 調(diào)節(jié)作用。但VIP或SST對腸淋巴細(xì)胞遷移調(diào)節(jié)的研究不多，至于它們對MODS時 腸淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)的研究尚未見報道。 研究目的 l、探討生理情況下: 1) VIP或SST對大鼠腸淋巴細(xì)胞向系統(tǒng)免疫系統(tǒng)遷移的影響; 2) vIP或ssT對大鼠腸淋巴細(xì)胞歸巢至腸相關(guān)淋巴組織(gut一associated lymphoid tissue，GA叮)的調(diào)節(jié); 2、MODS時腸淋巴細(xì)胞再循環(huán)的改變，從豁膜免疫的角度探討MODS的病理生 理機(jī)制: 3、VIP或SST對MODS轉(zhuǎn)歸的影響; 4、MODS時VIP或SST對腸淋巴細(xì)胞歸巢的調(diào)節(jié)，從豁膜免疫的角度理解MODS 的病理生理機(jī)制; 5、viP或SST是否通過腸淋巴細(xì)胞上的相應(yīng)受體調(diào)節(jié)腸淋巴細(xì)胞的歸巢? 6、viP或SST對存在于小腸內(nèi)皮細(xì)胞上決定腸淋巴細(xì)胞歸巢到GALT的關(guān)鍵豁附 分子一豁膜地址素細(xì)胞豁附分子一1(mucosal“枷ssin eella曲esion moleeule一l， MAdCAM一l)的影響，以確定這兩種胃腸多膚調(diào)節(jié)腸淋巴細(xì)胞歸巢的分子機(jī)制。 研究方法 1、從大鼠腸系膜淋巴管插管引流淋巴液，收集腸淋巴細(xì)胞; 2、E花結(jié)分離法測定T細(xì)胞比例; 3、流式細(xì)胞儀檢測腸淋巴CD4+、CDS+淋巴細(xì)胞; 4、slCr標(biāo)記腸淋巴細(xì)胞示蹤其在GALT的分布; 5、采用微型無創(chuàng)動脈夾夾閉腸系膜上動脈造成腸缺血再灌注損傷，誘導(dǎo)大鼠 MODS模型; 6、尸F(xiàn)岡F一a ELISA試劑盒測定腸淋巴液和外周血TNF一a水平; 重慶醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文 7、酶學(xué)分光光度法測定外周血D一乳酸水平; 8、賞試劑盒測定腸淋巴液和外周血內(nèi)毒素水平; 9、免疫組織化學(xué)法檢測腸淋巴細(xì)胞T、B細(xì)胞比例; 10、蘇木素一伊紅染色法觀察大鼠小腸、肝臟、腎臟和肺臟的組織學(xué)改變; 11、采用Rl斗PCR方法檢測腸淋巴細(xì)胞上SST和VIP受體的mRNA表達(dá); 12、采用W七stem blot方法檢測小腸組織MAdCAM一1表達(dá)。 研究結(jié)果 1、生理情況下，由腸勃膜進(jìn)入血循環(huán)的腸淋巴量、單位體積淋巴細(xì)胞數(shù)及單 位時間淋巴細(xì)胞數(shù)保持穩(wěn)定;由血循環(huán)遷移至GALT的腸淋巴細(xì)胞比例:Peyer 淋巴結(jié)為3.83%士1.87%，小腸彌散淋巴組織為1.07%士0.61%。 2、viP(o.2Pmol.g一’·h一‘、7 hour)顯著降低腸淋巴細(xì)胞由腸勃膜向血循環(huán)的遷移: 持續(xù)從靜脈輸入vIP后，5小時腸淋巴液中淋巴細(xì)胞總數(shù)為6.92士0.63、107個，顯 著低于對照組( 9.43士1.38/107個)，P0.05，降低26石%，而腸淋巴液量無顯著 改變，尸0.05，其中，T細(xì)胞降低20.6%，CDS+細(xì)胞降低1 1 .91%，CD4+細(xì)胞無顯 著改變;同時，vIP還抑制腸淋巴細(xì)胞由血循環(huán)進(jìn)入GALT:Peyer淋巴結(jié)’‘cr-腸 淋巴細(xì)胞量系體內(nèi)總”c卜腸淋巴細(xì)胞量的1.83%士0.90%，顯著低于對照組3.85%
【圖文】：

材料和方法一、大鼠MODS模型的建立采用腸缺血再灌注方法制作大鼠MODs模型14一，](圖4一1一l)。雄性wistar大鼠，重250一300克，重慶醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。實驗前12小時禁食，自由喂水。術(shù)前從股靜脈輸入生理鹽水(0.3ml爪)，剖開大鼠腹腔，用微型無創(chuàng)動脈夾夾住大鼠腸系膜動脈根部45分鐘，松夾后再灌注6小時。

與對照1組比較，MODS大鼠小腸絨毛部分脫落，水腫明顯，大量炎癥細(xì)胞浸潤;肝實質(zhì)細(xì)胞空泡化，肝小葉結(jié)構(gòu)不清，匯管區(qū)大量炎癥細(xì)胞浸潤;腎小球結(jié)構(gòu)不清;肺泡間隔增厚，大量炎癥細(xì)胞浸潤(圖4一1一2)。45
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號】：R363

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

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3 姚詠明;盛志勇;吳葉;于燕;陸連榮;;大鼠急性腸缺血后血漿D-乳酸的變化及其與腸粘膜損害的關(guān)系[J];中華整形燒傷外科雜志;1998年04期

4 楊輝,唐承薇;腸血管活性多肽或生長抑素對大鼠腸淋巴細(xì)胞在腸淋巴組織分布的影響[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2003年03期

本文編號：2599575