【摘要】：成熟于生發(fā)中心（GerminalCenter,GC）的高親和力抗體是機(jī)體長效抵抗微生物感染、維持自身健康的關(guān)鍵因素之一。雖然GC區(qū)域主要由活化B細(xì)胞組成，但是正常的GC反應(yīng)還需要一部分CD4+T細(xì)胞遷移到濾泡區(qū)內(nèi)與B細(xì)胞接觸，進(jìn)而輔助GC B細(xì)胞的存活與克隆增殖。由于這群具有很強(qiáng)輔助能力的T細(xì)胞特異性的在濾泡區(qū)發(fā)揮功能，因此被命名為濾泡性輔助T細(xì)胞（FollicularhelperTcells,Tfh cells）。目前，關(guān)于T如何進(jìn)入濾泡區(qū)分化成為Tfh細(xì)胞以及Tfh細(xì)胞調(diào)節(jié)GC反應(yīng)的機(jī)制還有諸多亟待解決的問題。 ICOS是Tfh細(xì)胞高表達(dá)的CD28家族的協(xié)同刺激信號分子。通過體外逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)系統(tǒng)和抗原特異型淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移動物模型，我們發(fā)現(xiàn)ICOS能夠在趨化因子受體表達(dá)量之外，直接調(diào)節(jié)濾泡區(qū)招募輔助T細(xì)胞的過程。利用μMT:Icosl-/-骨髓重建動物模型為基礎(chǔ)的研究表明濾泡區(qū)靜息狀態(tài)B細(xì)胞上的ICOSL是ICOS依賴型招募過程的必要條件。在磷脂雙分子層膜上利用TIRF顯微鏡觀測T細(xì)胞的運(yùn)動，發(fā)現(xiàn)ICOS的刺激能夠通過PI3K通路增強(qiáng)細(xì)胞的隨機(jī)運(yùn)動能力；進(jìn)一步利用活體雙光子顯微鏡觀測發(fā)現(xiàn)ICOS在體內(nèi)也直接促進(jìn)了T細(xì)胞的偽足形成以及運(yùn)動能力，并且該過程依賴于靜息狀態(tài)B細(xì)胞上ICOSL分子的表達(dá)。 T細(xì)胞與抗原特異B細(xì)胞的共定位接觸是Tfh細(xì)胞輔助GC反應(yīng)的主要方式。本文對Icosl+/+: Icosl-/-骨髓嵌合體小鼠的免疫反應(yīng)分析表明ICOSL在GC B細(xì)胞上存在內(nèi)在作用。通過在活體內(nèi)分析胞內(nèi)鈣信號強(qiáng)度與細(xì)胞間的接觸狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)ICOSL能夠通過ICOS增加T細(xì)胞內(nèi)鈣信號，進(jìn)而促進(jìn)T細(xì)胞緊密地纏繞在B細(xì)胞上。對GC B細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組的比較發(fā)現(xiàn)野生型B細(xì)胞通過ICOSL誘導(dǎo)的“纏繞”狀態(tài)獲得了更強(qiáng)的CD40信號；而GCB細(xì)胞被CD40抗體刺激后又能促進(jìn)ICOSL的表達(dá)。進(jìn)一步分析嵌合體小鼠中漿細(xì)胞比例和B6小鼠GC B細(xì)胞的親和力，發(fā)現(xiàn)ICOSL對于漿細(xì)胞的形成和親和力成熟都具有非常直接的調(diào)節(jié)作用。因此，ICOS-ICOSL與CD40L-CD40這兩對配體-受體的相互作用能夠組成Tfh細(xì)胞輔助GC反應(yīng)和親和力成熟的正反饋循環(huán)網(wǎng)絡(luò)。 縱上所述，，本論文在發(fā)現(xiàn)ICOS和ICOSL分子新功能的基礎(chǔ)上，闡明了持續(xù)性隨機(jī)運(yùn)動能力與Tfh細(xì)胞分化的關(guān)系；明確了Tfh細(xì)胞如何通過一個正反饋循環(huán)網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)GC B細(xì)胞的親和力篩選過程。
【圖文】：

與并不能形成正常 GC 反應(yīng)。如圖 1.1 所以，GC 在胞分裂的“暗區(qū)（DarkZone,DZ）”和與其對應(yīng)存在的“明區(qū)中的濾泡性樹突狀細(xì)胞（Follicular DC, FDC）為是為 GC B 細(xì)胞提供抗原的細(xì)胞[29]，并且成為了區(qū)中還有部分 T 細(xì)胞存在，目前已知這部分 T 細(xì)胞力的成熟都是必不可少的。

1.2 TCR與攜帶抗原的MHC分子結(jié)合結(jié)構(gòu)示意圖（綠色與藍(lán)色分別為TCR α和β鏈；綠色和黃色分別為MHC的α和β鏈；紅色為抗原肽斷）[64]2.3 抗原特異性相互作用是 T 細(xì)胞輔助 B 細(xì)胞的重要機(jī)制在體外細(xì)胞培養(yǎng)體系中缺少T細(xì)胞或者利用抗體中和T細(xì)胞表面分子后，B細(xì)
【學(xué)位授予單位】：清華大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R392

【引證文獻(xiàn)】

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1 李明明;表達(dá)鼠CXCL13重組狂犬病病毒的構(gòu)建及免疫原性的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

本文編號：2590364