【摘要】：本研究主要分析外源性免疫調(diào)節(jié)劑百日咳毒素,和內(nèi)源性免疫調(diào)節(jié)劑細胞 因子γ-干擾素,通過專職性抗原呈遞細胞,樹突狀細胞(DC),調(diào)節(jié)T細胞免疫應(yīng) 答和自身免疫病的分子機制。 百日咳毒素做為一種免疫佐劑,被廣泛應(yīng)用于Th1細胞免疫反應(yīng)介導(dǎo)的實驗 性自身免疫病的動物模型的誘導(dǎo)。百日咳毒素具有提升Th1細胞免疫反應(yīng)的生物 學作用,使疾病的低敏感動物品系轉(zhuǎn)變?yōu)榧膊〉拿舾行�。但對于百日咳毒素�?何加強Th1細胞免疫反應(yīng)的細胞學基礎(chǔ),及其分子生物學機制仍未確定。DC對于 免疫反應(yīng)的誘導(dǎo)和維持起著非常重要的作用,它可以激活初始型T細胞和啟動自 身免疫反應(yīng)。我們選擇DC做為假定的細胞類型,來研究百日咳毒素的佐劑作用。 發(fā)現(xiàn)百日咳毒素處理過的DC,可以替代百日咳毒素發(fā)揮佐劑作用,加強誘導(dǎo)Th1 細胞免疫反應(yīng)介導(dǎo)的實驗性自身免疫葡萄膜炎。在體外,百日咳毒素處理過的 DC,誘導(dǎo)T細胞分泌Th1細胞免疫反應(yīng)細胞因子-γ-干擾素。百日咳毒素在體外誘 導(dǎo)了DC的成熟,IL-12 和 TNF-α的分泌。在小鼠體內(nèi)注射百日咳毒素處理過的 DC,增加了小鼠血清中的IL-12含量。進而發(fā)現(xiàn)extracellular signal-regulated kinase (ERK)介導(dǎo)了百日咳毒素對于DC的生物學活性。當ERK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被 抑制后,百日咳毒素處理過的DC的成熟程度和IL-12 和 TNF-α的產(chǎn)生明顯降低。 體外誘導(dǎo)T細胞分泌γ-干擾素的能力,和體內(nèi)誘導(dǎo)實驗性自身免疫葡萄膜炎的能 力均受到抑制。因此,百日咳毒素通過DC的介導(dǎo),促進實驗性自身免疫葡萄膜 - 1 - WP=3 炎誘導(dǎo)。該研究工作,一方面闡明了百日咳毒素在體內(nèi)作為免疫佐劑的分子作 用機制;另一方面,由于Th1細胞的分化是細胞免疫調(diào)節(jié)的關(guān)鍵問題,因為其在 自身免疫病和器官移植排斥反應(yīng)的誘導(dǎo),和抗感染免疫反應(yīng)中起著決定性作用。 故百日咳毒素處理過的DC,提供了一個很好的體內(nèi)外工作系統(tǒng)。其可用于研究 Th1細胞的分化機制,特別是觀察抗原呈遞細胞,提供那些關(guān)鍵性分子作用于初 始型CD4 T細胞,進而調(diào)節(jié)Th1細胞的分化。這些研究成果,也將為疫苗的設(shè)計 和治療自身免疫性疾病提供新的思路。 γ-干擾素,主要由活化的T細胞和NK細胞分泌,對多種不同類型的細胞行使 免疫調(diào)節(jié)功能的細胞因子。晚近發(fā)現(xiàn)γ-干擾素也可以由抗原呈遞細胞,比如, DC和巨噬細胞所分泌。近年來的研究顯示,γ-干擾素對于Th1細胞免疫反應(yīng)介導(dǎo) 的多種實驗性自身免疫疾病具有免疫保護作用,而在γ-干擾素基因敲除(GKO) 小鼠觀察到多種免疫細胞的功能缺陷。我們假定DC的功能是異常的,γ-干擾素 的免疫保護作用來源于下調(diào)DC的功能,進而減弱T細胞的活化、增殖和分化。本 研究采用GKO小鼠,研究γ-干擾素對DC功能和細胞免疫反應(yīng)的調(diào)控作用。數(shù)據(jù)顯 示,GKO小鼠來源的骨髓源DC的體外分化和成熟沒有明顯改變,而其細胞因子分 泌、趨化因子受體表達和體外趨化功能發(fā)生改變。給GKO小鼠腹腔注射LPS,驅(qū) 動各器官的DC向脾臟遷移,觀察到脾臟中積累大量DC。體內(nèi)研究顯示熒光素半 抗原致敏的GKO小鼠,熒光素陽性的朗格漢氏細胞(LC)在引流LN中大量積累。 在誘導(dǎo)實驗性自身免疫葡萄膜炎的早期階段,相對于免疫的正常小鼠而言,在 免疫的GKO小鼠引流淋巴結(jié)中,觀察到DC的數(shù)量和表達CD40的APC的數(shù)量大量增 加。KLH抗原免疫GKO小鼠分析細胞免疫反應(yīng)顯示,抗原特異性淋巴細胞增殖、 和細胞因子IL-2產(chǎn)生都明顯增加。進一步研究發(fā)現(xiàn),GKO小鼠中CD4和CD25雙陽 性調(diào)節(jié)性T細胞,在外周免疫器官的發(fā)育并沒有受到影響。因此,γ-干擾素可以 負調(diào)控DC的遷移及T細胞免疫應(yīng)答。該研究為探討內(nèi)源性細胞因子γ-干擾素,如 - 2 - WP=4 何調(diào)節(jié)機體免疫細胞,特別是DC,提供了一種可能的生物學機制;亦為基于γ- 干擾素和DC的免疫治療提供了新的思路。
【學位授予單位】：中國科學院研究生院（上海生命科學研究院）
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R392

【共引文獻】

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本文編號：2589750