【摘要】：目的：探索可溶性非經(jīng)典主要組織相容抗原G（soluble non-classic MajorHistocompatibility Antigen/Human Leukocyte Antigen-G，sHLA-G）在弓形蟲感染致不良妊娠結(jié)局中的作用機制。方法：1.體內(nèi)試驗:建立C57BL/6小鼠妊娠期弓形蟲感染動物模型，實驗分為正常對照組、感染組。感染組于孕8天腹腔注射弓形蟲速殖子400條；正常組于孕8天腹腔注射等體積的生理鹽水。孕14天，對孕鼠進行眼底靜脈取血，斷頸處死孕鼠，記錄妊娠結(jié)局，收集羊水、分離子宮和胎盤，制備胎盤組織上清。ELISA檢測孕鼠外周血、羊水及胎盤組織上清可溶性非經(jīng)典主要組織相溶性抗原（Qa-2）的濃度；制備子宮和胎盤細胞懸液，流式細胞術(shù)檢測Qa-2受體，即蛻膜NK細胞表面抑制性受體NKG2A表達。2.體外實驗:建立滋養(yǎng)層細胞系BeWo細胞體系，分別設(shè)正常對照組和弓形蟲感染組，ELISA檢測其上清分泌液中非經(jīng)典人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)的水平；建立人早孕期蛻膜NK細胞體系，分別設(shè)正常對照組和弓形蟲感染組，感染組組內(nèi)再分別設(shè)單純感染組、sHLA-G干預(yù)組（sHLA-G組）及sHLA-G抗體中和組（抗體中和組），用流式細胞術(shù)檢測蛻膜NK細胞表面抑制性受體KIR2DL4表達。通過以上實驗明確妊娠期經(jīng)弓形蟲感染后，母胎界面sHLA-G的變化趨勢，并進一步驗證sHLA-G與NK細胞抑制性受體KIR2DL4表達的相關(guān)性，進而揭示sHLA-G在弓形蟲感染致不良妊娠結(jié)局中的作用機制。結(jié)果：1.體內(nèi)試驗：正常對照組孕鼠狀態(tài)較好，行為活動靈活自如，胎盤和胎鼠大小均勻，血供良好，，外觀肉紅色；感染組孕鼠自感染2天后出現(xiàn)聳毛、精神萎靡等現(xiàn)象，感染后7天明顯站立不穩(wěn)、體溫下降，胎盤蒼白缺血，平均重量下降，胎鼠血供缺乏，大小不一，重量下降。與正常對照相比，感染后胎盤組織上清、羊水及孕鼠外周血Qa-2的濃度明顯升高（P＜0.05），蛻膜NK細胞表面的NKG2A的表達亦顯著升高（P＜0.05）。2.體外實驗：與對照組相比，感染組BeWo培養(yǎng)上清中其sHLA-G水平明顯升高（P＜0.05）；與對照組相比，sHLA-G干預(yù)組蛻膜NK細胞表面KIR2DL4表達顯著升高（P＜0.05）；與sHLA-G干預(yù)組相比，sHLA-G抗體中和組蛻膜NK細胞表面KIR2DL4的表達顯著降低（P＜0.05）。結(jié)論：通過體內(nèi)外實驗均證實弓形蟲感染后可導(dǎo)致母胎界面非經(jīng)典主要組織相容性抗原分泌升高，升高了的sHLA-G導(dǎo)致蛻膜NK細胞表面的抑制性受體KIR2DL4表達升高，sHLA-G及其受體KIR2DL4為母胎界面的參與免疫耐受的一對重要免疫分子，二者表達的升高可能會破壞胎盤免疫防御屏障，而導(dǎo)致弓形蟲免疫逃逸，容易穿過胎盤垂直傳播，引起胎兒感染，導(dǎo)致流產(chǎn)、胎兒畸形、死胎等不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。
【圖文】：

05101520253035404550單純感染組sHLA-G組 抗體中和組KI2RLD4性陽胞細分百（率%）圖 8 流式檢測人蛻膜 NK 細胞 KIR2DL4 的表達與單純感染組相比，sHLA-G 組蛻膜 NK 細胞 KIR2DL4 的表達顯著升高（*p＜0.0A-G 組相比，87G 抗體中和組蛻膜 NK 細胞 KIR2DL4 的表達顯著減低（ p＜0.05)。45504550*
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R392

【參考文獻】

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1 陳一心,林節(jié),張菊芬,羅碩軍,虞琳,陳建芳;弓形蟲感染與兒童腦功能損害[J];臨床精神醫(yī)學雜志;2001年06期

2 趙明瑜;張璐;;可溶性人白細胞抗原G與妊娠合并絨毛膜羊膜炎的臨床相關(guān)性研究[J];中華實驗和臨床感染病雜志(電子版);2011年04期

本文編號：2585171