【摘要】：目的利用豬耳廓軟骨細(xì)胞制備軟骨細(xì)胞膜片,與3D打印聚酰胺帶孔管狀支架結(jié)合,構(gòu)建管狀軟骨組織,用于氣管軟骨的缺損重建。方法用酶消化法分離獲得原代豬耳廓軟骨細(xì)胞,以5×105cells/m L的密度將第2代軟骨細(xì)胞接種于6 cm細(xì)胞培養(yǎng)皿上,在軟骨細(xì)胞膜片培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)約14 d,獲得完整軟骨細(xì)胞膜片;4層軟骨細(xì)胞膜片依次卷疊于3D打印的聚酰胺(PA12)帶孔管狀內(nèi)支架上,以構(gòu)建管狀軟骨組織復(fù)合物;體外靜態(tài)培養(yǎng)12周或裸鼠皮下培養(yǎng)8周,對(duì)形成的管狀軟骨組織行大體觀察及石蠟切片組織學(xué)染色鑒定。結(jié)果體外靜態(tài)培養(yǎng)12周后,半透明管狀軟骨組織形成,組織學(xué)染色可見少量分泌的軟骨細(xì)胞外基質(zhì),質(zhì)軟,彈性差;體內(nèi)培養(yǎng)8周后,白色管狀軟骨組織形成,其組織學(xué)染色可見大量軟骨細(xì)胞外基質(zhì)分泌,質(zhì)較硬,有一定彈性。結(jié)論利用軟骨細(xì)胞膜片復(fù)合3D打印聚酰胺支架,可構(gòu)建組織工程管狀軟骨,有望將其用于氣管軟骨缺損的修復(fù)。

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