【摘要】： 目的: 脂肪干細(xì)胞是否可以在特定的誘導(dǎo)環(huán)境下分化形成血管平滑肌細(xì)胞,為構(gòu)建組織工程化血管的血管平滑肌細(xì)胞尋找新的種子細(xì)胞來源。 方法: 應(yīng)用酶消化法消化人脂肪組織獲取原代脂肪干細(xì)胞,待原代細(xì)胞生長至融合后,采用免疫磁珠法分選CD34+的細(xì)胞以取得較高純化的脂肪干細(xì)胞,分選的細(xì)胞生長24小時后采用酶消化法收獲細(xì)胞用于實驗。實驗分實驗組和對照組兩組,對照組培養(yǎng)液為5%M199培養(yǎng)液,實驗組培養(yǎng)液為5%M199培養(yǎng)液內(nèi)添加生長因子PDGF-BB(50ng/ml)、TGF-β1(2.5ng/ml),誘導(dǎo)14天,每日觀察誘導(dǎo)組細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化;14天后分別采用免疫熒光、RT-PCR的方法檢測血管平滑肌細(xì)胞特異性標(biāo)記α-SMA、Calponin、SM22α、SM-MHC的表達情況;流式細(xì)胞術(shù)檢測實驗組細(xì)胞在誘導(dǎo)14天前后α-SMA、Calponin、SM-MHC的陽性表達率。 結(jié)果: 脂肪干細(xì)胞在特定的誘導(dǎo)環(huán)境下誘導(dǎo)14天后,細(xì)胞生長呈現(xiàn)血管平滑肌細(xì)胞所特有的峰-谷樣生長;免疫熒光、RT-PCR檢測細(xì)胞:α-SMA、Calponin、SM22α、SM-MHC呈陽性表達;實驗組細(xì)胞誘導(dǎo)14天后,α-SMA、Calponin、SM-MHC的陽性表達率為50.58±2.71%,42.94±2.76%,49.31±0.67%,誘導(dǎo)前為5.11±0.44%,5.73±0.54%,8.42±0.47%;誘導(dǎo)后較誘導(dǎo)前陽性表達率明顯增加,有非常顯著性差異(P＜0.01)。 結(jié)論: 脂肪干細(xì)胞在體外特定的誘導(dǎo)環(huán)境中培養(yǎng)一段時間后,呈現(xiàn)明顯的血管平滑肌細(xì)胞的特性,有可能成為構(gòu)建組織工程化血管新的種子細(xì)胞來源。
【圖文】：

生長至融合狀態(tài)(圖 1.B)，收集細(xì)胞進行MACS分選，分選獲得的CD34+細(xì)胞，生長呈紡錘形(圖1.C)，加入誘導(dǎo)液48h后，實驗組細(xì)胞形態(tài)較對照組有所增大并有一定方向性(圖1.D)，7天后呈現(xiàn)血管平滑肌細(xì)胞所特有的“谷-

呈紡錘形或梭形，類成纖維細(xì)胞樣生長(圖1.A);原代細(xì)胞生長5一6天后，生長至融合狀態(tài)(圖 1.B)，，收集細(xì)胞進行MACS分選，分選獲得的CD34+細(xì)胞，生長呈紡錘形(圖1.C)，加入誘導(dǎo)液48h后，實驗組細(xì)胞形態(tài)較對照組有所增大并有一定方向性(圖1.D)，7天后呈現(xiàn)血管平滑肌細(xì)胞所特有的“谷-
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R329

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 左玉梅;王媛;劉建平;;真核表達載體pEGFP-N2/AT2R的構(gòu)建及其在原代血管平滑肌細(xì)胞的表達[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2011年09期

2 方海軍;谷志遠(yuǎn);;轉(zhuǎn)化生長因子-β_1和血管內(nèi)皮生長因子在兔下頜骨缺損修復(fù)中的表達[J];國際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年06期

3 謝蟪旭;王萍;汪前彬;程世兵;萬昌秀;李龍江;;鉀鍶復(fù)合摻雜聚磷酸鈣修復(fù)兔下頜骨缺損[J];國際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2010年06期

4 許圣榮;趙勁民;蘇偉;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的實驗研究[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2010年05期

5 李寧毅;陳立強;陳濤;金曉明;袁榮濤;;富血小板血漿與帶血管肌筋膜在組織工程骨血管化中的作用[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年04期

6 夏寧;黃玲;彭兆意;劉新華;熊吉信;;胚胎干細(xì)胞構(gòu)建小口徑組織工程血管的研究[J];江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2008年06期

7 楊亞東;;壓力性尿失禁治療的組織工程學(xué)應(yīng)用進展[J];西南軍醫(yī);2011年02期

8 朱謹(jǐn);歐陽欣;許彪;;豬髂骨不同鈣含量骨基質(zhì)的生物學(xué)性質(zhì)的初步檢測[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年09期

9 黃躍;王旭東;沈國芳;;骨髓基質(zhì)細(xì)胞軟骨向分化調(diào)控的研究進展[J];口腔頜面外科雜志;2007年01期

10 黃躍;王旭東;沈國芳;楊辛;;山羊髁突刨削術(shù)后髁突軟骨面修復(fù)的初步觀察[J];口腔頜面外科雜志;2009年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉曉峰;鹿茸多肽納米復(fù)合材料對成骨細(xì)胞及骨愈合的影響[D];吉林大學(xué);2011年

2 孫德毅;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與骨誘導(dǎo)活性材料構(gòu)建組織工程骨的實驗研究[D];中南大學(xué);2011年

3 彭謙;新型多孔磷酸鈣陶瓷支架構(gòu)建及其體內(nèi)培育大尺寸活體骨修復(fù)體[D];西南交通大學(xué);2010年

4 蔡磊;帶血管蒂的組織工程骨構(gòu)建及修復(fù)骨缺損的動物實驗研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

5 李康杰;脫細(xì)胞骨基質(zhì)聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)動物骨缺損實驗研究[D];延邊大學(xué);2011年

6 廖云君;應(yīng)用去分化脂肪細(xì)胞構(gòu)建工程化脂肪組織的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

7 晏曉青;應(yīng)用人脂肪前體細(xì)胞構(gòu)建工程化脂肪組織的實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

8 吳玉家;構(gòu)建帶內(nèi)支撐的組織工程化軟骨的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

9 景殿英;可降解聚酯組織工程多孔支架的成型、表征及初步應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

10 呂衛(wèi)東;去細(xì)胞結(jié)合光氧化制備牛頸靜脈帶瓣管道的組織學(xué)研究[D];中南大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 郭慶華;BMP-2基因修飾BMSCs復(fù)合nHAC/PLA材料體外構(gòu)建組織工程骨的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

2 楊亮;基因激活基質(zhì)誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

3 張潔;先天性小耳畸形殘耳軟骨細(xì)胞與脂肪干細(xì)胞共培養(yǎng)構(gòu)建組織工程軟骨的實驗研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

4 趙凱;同種異體BMSCs抗原性對兔橈骨缺損修復(fù)的影響[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2011年

5 張述卿;軟骨缺損修復(fù)的有限元模擬及滾壓裝置的設(shè)計[D];天津理工大學(xué);2011年

6 姜金珠;應(yīng)用基質(zhì)金屬蛋白酶脫除豬脫細(xì)胞真皮基質(zhì)抗原成分的研究[D];山東大學(xué);2011年

7 劉萌萌;間充質(zhì)源性種子細(xì)胞復(fù)合異體脫細(xì)胞軟骨構(gòu)建軟骨組織的實驗研究[D];山東大學(xué);2011年

8 謝瑩;大鼠脂肪源性干細(xì)胞分離培養(yǎng)及與成纖纖細(xì)胞間接共培養(yǎng)的實實實究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年

9 竇志;滾壓載荷促進關(guān)節(jié)軟骨體外構(gòu)建的初步研究[D];青海大學(xué);2011年

10 卜娟;膠原酶敏感性聚α-羥基酸基仿生材料合成[D];重慶大學(xué);2011年

本文編號：2575334