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IL-1β對(duì)人體皮膚成纖維細(xì)胞增殖的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-01-30 22:13
【摘要】:目的探討白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)對(duì)人體皮膚成纖維細(xì)胞增殖的影響及其可能機(jī)制。方法膠原酶消化法提取人皮膚成纖維細(xì)胞(human skin fibroblasts,HFB)。分別用0,0.04,0.2,1與5 ng/m L濃度的IL-1β培養(yǎng)HFB 24 h,以0 ng/m L濃度的IL-1β培養(yǎng)HFB 24 h為對(duì)照組,采用流式細(xì)胞分析法測(cè)定各組細(xì)胞周期分布情況,MTT法測(cè)定各組細(xì)胞增殖情況。結(jié)果細(xì)胞周期分析結(jié)果顯示,各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比,S期所占比例增加,且隨著培養(yǎng)液中IL-1β濃度增高,S期所占比例上升。MTT法測(cè)定結(jié)果表明,各實(shí)驗(yàn)組OD值均比對(duì)照組高,且實(shí)驗(yàn)組OD值隨著培養(yǎng)液中IL-1β濃度增高而增高。細(xì)胞周期和MTT結(jié)果均表明,IL-1β濃度為5 ng/m L時(shí),其促進(jìn)細(xì)胞增殖的效果最明顯。結(jié)論 IL-1β濃度是影響HFB增殖的重要因素,本實(shí)驗(yàn)為創(chuàng)傷后表皮細(xì)胞和真皮細(xì)胞大量分泌IL-1β并促進(jìn)HFB增殖的現(xiàn)象提供了參考。
【圖文】:

成纖維細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組,相對(duì)數(shù)量


①and②:×200圖1融合的成纖維細(xì)胞;圖2傳代后第2天的成纖維細(xì)胞;圖3各組HFBS期所占比例;圖4各組HFB相對(duì)數(shù)量比較Fig.1Confluenceoffibroblasts;Fig.2Fibroblastsafter2daysofpassaging;Fig.3S-phasefractionofHFB;Fig.4RelativenumberofHFB實(shí)驗(yàn)組1為(4.11±0.64)%,實(shí)驗(yàn)組2為(5.74±0.63)%,實(shí)驗(yàn)組3為(4.77±0.52)%,,實(shí)驗(yàn)組4為(8.09±1.24)%。實(shí)驗(yàn)組1,2和3中,其S期所占比例差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明這三種濃度IL-1β對(duì)成纖維細(xì)胞增殖的影響差異不顯著。各組HFB細(xì)胞培養(yǎng)24h后:4個(gè)實(shí)驗(yàn)組的S期細(xì)胞所占比例均較對(duì)照組明顯上升(F=19.442,Pb1與a=0.03,Pb2與a=0.003,Pb3與a=0.011,Pc與a=0.0001),說明IL-1β能夠刺激HFB增殖;由實(shí)驗(yàn)組1,2,3和實(shí)驗(yàn)組4相比較可知,隨著培養(yǎng)液中IL-1β濃度升高,S期細(xì)胞所占比例也呈增長趨勢(shì)(Pc與b1=0.003,Pc與b2=0.023,Pc與b3=0.006),以IL-1β濃度為0.20ng/mL(實(shí)驗(yàn)組2)時(shí)的HFB增殖最為明顯。2.3HFB相對(duì)數(shù)值分析見圖4。不同濃度IL-1β作用下的OD值,對(duì)照組為0.22±0.28,實(shí)驗(yàn)組1為0.34±0.18,實(shí)驗(yàn)組2為0.38±0.21,實(shí)驗(yàn)組3為0.33±0.39,實(shí)驗(yàn)組4為0.42±0.19。實(shí)驗(yàn)組1和3的OD值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,即在濃度分別為0.04ng/mL和1.00ng/mL的IL-1β中培養(yǎng)的HFB,MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示其細(xì)胞相對(duì)數(shù)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明這兩種濃度IL-1β對(duì)成纖維細(xì)胞增殖的影響差異不顯著。MTT法結(jié)果還顯示(F=44.503),各組細(xì)胞培養(yǎng)24h后:4個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞相對(duì)數(shù)量較a組均有明顯的上升(Pb1與a=0.0001,Pb2與a=0.0001,Pb3與a=0.0001,Pc與a=0.0001);4個(gè)實(shí)驗(yàn)組相比,除實(shí)驗(yàn)組3外,余后一組比前一組的細(xì)胞相對(duì)數(shù)量增多(Pb1與b2=0.011,Pc與b2=0.010);低濃度

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