【摘要】： 背景：近年來專家學者們開始致力于缺血性心肌病尤其是心肌梗死后心肌細胞的再生和心臟功能的恢復,其中骨髓干細胞移植被公認為是修復損傷心肌糾正心力衰竭的一個有可行性的較有前景的方法。骨髓干細胞具有多向分化潛能使其成為一種非常重要的種子細胞,但多向分化是一把雙刃劍,比如其惡性分化為腫瘤細胞等。 目的：探討體外經化學誘導劑5-氮雜胞苷誘導和模擬的心肌微環(huán)境對骨髓間充質干細胞向心肌樣細胞分化的影響,并通過細胞移植觀察誘導后的心肌樣細胞是否適合細胞移植,是否具有移植后的安全性。 材料：取我科冠心病行冠狀動脈旁路移植術患者胸骨骨髓和先天性心臟病法洛氏四聯(lián)癥伴有右室流出道肌束肥厚患兒行法四根治術時疏通右室流出道時切除的心肌組織約10g。BALB/C清潔級小鼠12只隨機分為經5-aza誘導的心肌樣細胞移植組和經心肌細胞裂解液誘導的心肌樣細胞移植組,6只/組. 方法：分別取傳代至第3代的骨髓問充質干細胞經化學誘導劑5-氮雜胞苷誘導和制取的心肌細胞裂解液模擬的心肌微環(huán)境體外誘導21d；將得到的心肌樣細胞分別制成3.0×1010/L的單細胞懸液0.3ml分別接種于經5-aza誘導的心肌樣細胞移植組和經心肌細胞裂解液誘導的心肌樣細胞移植組,3W后留取裸鼠皮下局部組織和心肌組織對比觀察。 結果：經5-氮雜胞苷和心肌細胞裂解液模擬的心肌微環(huán)境均能夠誘導骨髓間充質干細胞向心肌樣細胞分化,實驗組較對照組之間有統(tǒng)計學差異(P0.05),實驗組之間無顯著差異(P0.05)。移植心肌樣細胞的兩組皮下組織檢測惡性腫瘤細胞均未發(fā)現(xiàn)惡性細胞,兩組心肌組織免疫組化測定間質細胞標志Vimentin和心肌特異性標記CX43和Troponin T為陽性。 結論：1.MSCs在合適的條件下具有向心肌樣細胞分化的潛能。 2.5-Aza可以在體外誘導MSCs向心肌樣細胞分化,而且通過心肌細胞裂解液模擬的心肌微環(huán)境和MSCs接觸也可以誘導MSCs向心肌樣細胞分化,表現(xiàn)出“環(huán)境依賴性分化”的特性。 3.MSCs體外分化的心肌樣細胞通過移植到裸鼠皮下觀察,短期內沒有發(fā)現(xiàn)成瘤性,并且具有向心臟遷移和歸巢的能力。
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R329

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本文編號：2574887