【摘要】：誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(IPS)是近年來(lái)研究的熱門,而IPS細(xì)胞體外培養(yǎng)需要飼養(yǎng)層細(xì)胞。小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)可分泌白血病抑制因子,作為IPS細(xì)胞的飼養(yǎng)層細(xì)胞。目的建立分離培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞的體系,制作高質(zhì)量的IPS飼養(yǎng)層細(xì)胞。方法選妊娠11.5~15.5d的昆明小鼠制作MEF細(xì)胞,選擇第三代MEF細(xì)胞用不同濃度絲裂霉素C處理,制作飼養(yǎng)層細(xì)胞,在飼養(yǎng)層細(xì)胞上接種IPS細(xì)胞,觀察各組IPS細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)并計(jì)算克隆數(shù)目。結(jié)果妊娠第13.5天的胚胎制作的MEF,經(jīng)10μg/ml的絲裂霉素C處理3h的飼養(yǎng)層細(xì)胞狀態(tài)較好,其IPS生長(zhǎng)狀況最好,克隆數(shù)目和質(zhì)量最佳。結(jié)論不同胎齡胚胎分離的MEF可用做IPS飼養(yǎng)層,第13.5d的胚胎分離的MEF細(xì)胞經(jīng)10μg/ml的絲裂霉素C處理3h制成的飼養(yǎng)層細(xì)胞最適于IPS細(xì)胞生長(zhǎng)。

【共引文獻(xiàn)】

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