糖尿病大鼠慢性難愈合創(chuàng)面模型的制備
發(fā)布時間:2019-11-11 21:05
【摘要】: 目前,糖尿病的發(fā)病人數(shù)逐年增多,已成為世界上繼腫瘤、心血管病后的第三位嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量的慢性疾病。在糖尿病患者的發(fā)病過程中,有30%的患者會發(fā)生皮膚感染,而且經(jīng)常反復(fù)發(fā)作,持久不愈;继悄虿〉娜,一旦發(fā)生皮膚感染后,糖尿病的癥狀就會加重,而且不容易控制,如果治療不及時就會向縱深發(fā)展,甚至最后會導(dǎo)致截肢,嚴(yán)重地影響患者的生活質(zhì)量。據(jù)統(tǒng)計由于糖尿病潰瘍所導(dǎo)致的截肢在非創(chuàng)傷性截肢患者中達(dá)到50%以上,因此糖尿病患者發(fā)生皮膚潰瘍越來越引起醫(yī)務(wù)工作者及研究人員的重視。為了研究糖尿病患者慢性難愈合創(chuàng)面的發(fā)病機(jī)制,尋找治療糖尿病慢性難愈合創(chuàng)面的有效方法,本實驗首先復(fù)制了糖尿病大鼠,然后在實驗性糖尿病大鼠背部造成方形(2cm×2cm)的創(chuàng)面,并觀察創(chuàng)面的愈合情況。 本實驗的目的是建立糖尿病慢性難愈合創(chuàng)面,由于其發(fā)病過程、愈合過程及組織病理學(xué)的改變與臨床糖尿病潰瘍相似,這一模型為探討糖尿病慢性難愈合創(chuàng)面的發(fā)生機(jī)制與臨床藥物治療研究提供一理想的動物模型。 在本實驗中,先通過腹腔注射鏈尿佐菌素(Streptozotocin, STZ)建立糖尿病大鼠模型,在給藥后72h檢測大鼠血糖,同時觀察其體重、飲水量、飲食量的變化,在成模60天時,將大鼠處死,取胰腺做石蠟切片,進(jìn)行形態(tài)觀察。結(jié)果顯示實驗組大鼠在給藥后第3天,非空腹血糖明顯高于對照組而達(dá)到了成模標(biāo)準(zhǔn):血糖值≥16.7mmol/L。大鼠的飲水量、飲食量也分別在給藥后的第7天明顯高于對照組,體重觀察結(jié)果表明在造模后的第30天,實驗組與對照組有了明顯的區(qū)別。實驗組大鼠呈現(xiàn)出了糖尿病患者的典型的“三多一少”癥狀,直到建模后的60天,實驗組大鼠的血糖仍維持在成模標(biāo)準(zhǔn)之上。胰島形態(tài)觀察也顯示:對照組大鼠胰腺結(jié)構(gòu)正常,胰島細(xì)胞數(shù)量多,胞漿飽滿,細(xì)胞輪廓規(guī)則整齊;實驗組大鼠胰島細(xì)胞數(shù)量減少,部分細(xì)胞退化萎縮,細(xì)胞輪廓不規(guī)則,排列紊亂,二者對比,實驗組大鼠的胰島細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生了較為明顯的病理改變。 本實驗依據(jù)此藥量和方法批量復(fù)制糖尿病大鼠,在糖尿病大鼠模型的基礎(chǔ) 上,于大鼠的背部人工制作(2×2cm)的方形創(chuàng)面,在創(chuàng)面部位接種金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌,同時觀察大鼠的創(chuàng)面愈合情況。結(jié)果顯示:實驗組大鼠在接菌后的第3-5天創(chuàng)面有淺黃色的膿性分泌物出現(xiàn);而對照組創(chuàng)面較為干燥,兩組創(chuàng)面有比較明顯的區(qū)別。實驗組創(chuàng)面在前12天愈合速度比對照組明顯減慢,12天后有加快的趨勢,至接菌后的第30天,仍有2只大鼠有殘余創(chuàng)面;而接菌后的第17天,對照組創(chuàng)面已完全愈合,無殘余創(chuàng)面,兩組創(chuàng)面的愈合情況有非常明顯的區(qū)別。 一般來講,糖尿病大鼠較難發(fā)生自發(fā)性潰瘍,且不易定量與標(biāo)準(zhǔn)化。根據(jù)以往經(jīng)驗,在實驗性糖尿病動物的背部人工造成創(chuàng)傷,然后定量觀察大鼠在糖尿病狀態(tài)下傷口的愈合情況,這種創(chuàng)傷模型的特點(diǎn)是愈合50%創(chuàng)面面積的時間較對照組明顯延長,它不僅可再見糖尿病創(chuàng)面的組織病理學(xué)特征,而且還具有方法簡單,易于復(fù)制等特點(diǎn),便于推廣應(yīng)用。該模型可用于糖尿病狀態(tài)下慢性難愈合創(chuàng)面的發(fā)生機(jī)制與治療的研究,也可用于研究各種藥物對創(chuàng)面修復(fù)的影響。如果將該模型創(chuàng)面的成纖維細(xì)胞與表皮細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),可能有助于進(jìn)行慢性難愈合創(chuàng)面發(fā)生的分子生物學(xué)機(jī)制的研究。
【圖文】:
大鼠麻醉后備皮
用龍膽紫標(biāo)記創(chuàng)面區(qū)域
【學(xué)位授予單位】:山東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號】:R587.1;R-332
本文編號:2559435
【圖文】:
大鼠麻醉后備皮
用龍膽紫標(biāo)記創(chuàng)面區(qū)域
【學(xué)位授予單位】:山東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號】:R587.1;R-332
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號:2559435
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