【摘要】：目的:建立一種快速檢測人星狀病毒1型的逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導等溫擴增方法。方法:針對人星狀病毒ORF1a序列設(shè)計特異引物,并優(yōu)化反應條件。對1株人星狀病毒1型實驗株和7株其他腸道病毒對照株,及80份臨床糞便標本進行檢測,并與RT-PCR法比較,確定該方法的特異性、靈敏性和實用性。結(jié)果:60℃反應需時1.5h,可通過肉眼目測或電泳檢測判定結(jié)果。該方法特異性較好,糞便標本中人星狀病毒1型檢出限為5pg/管。臨床糞便標本檢測結(jié)果與RT-PCR法一致。結(jié)論:本方法實用性強,有望用于人星狀病毒1型現(xiàn)場監(jiān)測和流行病學調(diào)查。
【圖文】：

陽性；2，陰性對照；3，空白對照圖2 RT-LAMP 擴增產(chǎn)物 SYBR Green I 染色肉眼觀察圖注：M，marker；1，產(chǎn)物酶切前；2，產(chǎn)物酶切后；N，，RT-LAMP 陰性對照；N′，酶切陰性對照圖3 HAstV-1 RNA RT-LAMP 擴增產(chǎn)物和酶切電泳分析bpM 1 N N′ 2244 bp225 bp206 bp1 000700500400300200100


本文編號：2558983