發(fā)布時(shí)間：2019-11-10 18:42

【摘要】：目的:建立一種快速檢測(cè)人星狀病毒1型的逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法。方法:針對(duì)人星狀病毒ORF1a序列設(shè)計(jì)特異引物,并優(yōu)化反應(yīng)條件。對(duì)1株人星狀病毒1型實(shí)驗(yàn)株和7株其他腸道病毒對(duì)照株,及80份臨床糞便標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),并與RT-PCR法比較,確定該方法的特異性、靈敏性和實(shí)用性。結(jié)果:60℃反應(yīng)需時(shí)1.5h,可通過肉眼目測(cè)或電泳檢測(cè)判定結(jié)果。該方法特異性較好,糞便標(biāo)本中人星狀病毒1型檢出限為5pg/管。臨床糞便標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果與RT-PCR法一致。結(jié)論:本方法實(shí)用性強(qiáng),有望用于人星狀病毒1型現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查。
【圖文】：

陽(yáng)性；2，陰性對(duì)照；3，空白對(duì)照?qǐng)D2 RT-LAMP 擴(kuò)增產(chǎn)物 SYBR Green I 染色肉眼觀察圖注：M，marker；1，產(chǎn)物酶切前；2，產(chǎn)物酶切后；N，，RT-LAMP 陰性對(duì)照；N′，酶切陰性對(duì)照?qǐng)D3 HAstV-1 RNA RT-LAMP 擴(kuò)增產(chǎn)物和酶切電泳分析bpM 1 N N′ 2244 bp225 bp206 bp1 000700500400300200100


本文編號(hào)：2558983