【摘要】： 本課題研究了鋅指蛋白zbtb20對(duì)巨噬細(xì)胞TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控作用。主要構(gòu)建了zbtb20真核表達(dá)載體并建立了小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的zbtb20干擾模型和小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7的zbtb20穩(wěn)定表達(dá)模型,發(fā)現(xiàn)干擾zbtb20的表達(dá)可以抑制LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞分泌炎癥細(xì)胞因子和Ⅰ型干擾素,并抑制ERK,JNK,P38的活化；以zbtb20基因缺陷小鼠的巨噬細(xì)胞為模型進(jìn)一步驗(yàn)證了該結(jié)果。相反,過(guò)表達(dá)zbtb20具有促進(jìn)效應(yīng)。因此,zbtb20是TLR4信號(hào)通路的正向調(diào)控分子。
【圖文】：

展鋅指蛋白zbtbZo的研究，我們首先對(duì)其進(jìn)行了克隆，以小鼠巨克隆了zbtb20的全長(zhǎng)序列，并將其連入PcDNA3.1載體，構(gòu)建了表達(dá)載體，為下面的研究奠定了基礎(chǔ)。同時(shí)我們觀察了LPS刺激的表達(dá)情況，，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著LPS的刺激zbtb20表達(dá)量下降。與方法要材料載體和分子克隆試劑:菌菌株nH5a為本室常規(guī)保存。penNA3.1載體(見圖l一l)購(gòu)自INA聚合酶來(lái)自Promega。瓊脂糖DNA回收試劑盒、質(zhì)粒提取和純化試劑盒均來(lái)自QIAGEN。T4DNA連接酶和各種限制性內(nèi)切Biolab.瓊脂糖和總RNA抽提試劑盒來(lái)自華舜生物工程公司。引工程有限公司合成。

NewEnglandBiolab.瓊脂糖和總RNA抽提試劑盒來(lái)自華舜生物工程公司。引物由上海生工生物工程有限公司合成。圖1一1真核表達(dá)載體 PcDNA3.1質(zhì)粒圖譜Figurel一 1PhysicalmaPofttlePeDNA3.1exPressionveetor2.細(xì)胞株及其相關(guān)試劑
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R329

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6 尚Z腪

本文編號(hào)：2558620