【摘要】：目的:利用昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)重組表達(dá)中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-Co V)S1蛋白,并對其免疫效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法:構(gòu)建含有MERS-Co V S1基因的重組桿狀病毒質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染Sf9細(xì)胞包裝桿狀病毒;重組病毒傳代3次獲得種子病毒,感染Sf9細(xì)胞,收獲感染上清,通過鎳離子親和層析純化獲得S1重組蛋白;用純化的S1蛋白免疫BALB/c小鼠,采用ELISA檢測免疫小鼠血清抗原特異性的抗體水平;采用假病毒中和試驗(yàn)檢測血清中抗體的中和活性。結(jié)果:獲得了表達(dá)MERS-Co V S1蛋白的重組病毒株,在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)并純化了S1重組蛋白;利用重組表達(dá)的S1蛋白免疫小鼠3次,血清S1特異性Ig G抗體滴度可達(dá)1∶102 400,免疫小鼠血清稀釋至1/5120后中和百分比仍達(dá)50%以上。結(jié)論:利用昆蟲細(xì)胞重組表達(dá)的MERS-Co V S1蛋白具有良好的免疫原性,并能有效誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度中和抗體,為發(fā)展MERS-Co V重組蛋白疫苗奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所 病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家“十二五”傳染病防治重大專項(xiàng)(2014ZX10004001004)
【分類號(hào)】：R373;R392

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6 ;簡訊[J];國外醫(yī)學(xué).生物制品分冊;1984年03期

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6 余澤華;劉冬連;陳曲候;;昆蟲細(xì)胞無血清培養(yǎng)基的研究[A];全國生物防治學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];1995年

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4 徐侃彥;AVP(4-8)調(diào)控基因的新途徑研究及大鼠CCTβ在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2002年

5 林董;RSV五個(gè)基因及GFP-CP、GFP-SP融合基因在sf9昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)[D];福建農(nóng)林大學(xué);2007年

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2 李守信;轉(zhuǎn)p～（35）基因昆蟲細(xì)胞系的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2005年

3 李玲;豬圓環(huán)病毒2型的分子流行病學(xué)分析及病毒衣殼蛋白在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

4 邱平明;人ZP3嵌合肽在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)及其活性研究[D];暨南大學(xué);2004年

5 張欣;兩種鞘翅目昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)及昆蟲細(xì)胞系染色體分析[D];中國林業(yè)科學(xué)研究院;2006年

6 許雪蓮;利用桿狀病毒—昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)表達(dá)人細(xì)胞色素P450 2C9酶[D];吉林大學(xué);2008年

7 王振亞;雞干擾素α、γ在昆蟲細(xì)胞中的共表達(dá)[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

8 張茹君;重組桿狀病毒介導(dǎo)的人組織激肽釋放酶在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)[D];揚(yáng)州大學(xué);2009年

9 師文娟;人Ⅱ型CD74及人源與瘧原蟲來源MIF在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

10 田建肖;轉(zhuǎn)SV40大T抗原基因昆蟲細(xì)胞系的研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

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本文編號(hào)：2546447