【摘要】： 目的：經(jīng)rhIL-10或CsA作用,觀察家兔皮膚移植后移植皮片出現(xiàn)排斥的時(shí)間、移植皮片存活時(shí)間及外周血液中Treg細(xì)胞、IL-10.TGF-β的變化,研究IL-10在抗移植排斥反應(yīng)治療中Treg細(xì)胞、調(diào)節(jié)因子IL-10.TGF.β的變化,探討IL-10抗免疫排斥作用的機(jī)制。觀察IL-10單獨(dú)或與CsA協(xié)同應(yīng)用的抗免疫排斥效果,為減少CsA藥品副作用尋找新型抗移植免疫的藥物,為IL-10的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：(1)家兔36只,分受體和供體各18只,每只供體兔為1只受體兔供皮,于背部行皮膚移植手術(shù)。受體隨機(jī)分成6組分別為①rhIL-10小劑量組：rhIL-105μg/kg/d；②rhIL-10大劑量組：rhIL-10 10μg/kg/d；③CsA小劑量組：CsA 5mg/kg/d；④CsA大劑量組：CsA 10mg/kg/d；⑤聯(lián)合組：rhIL-10 5μg/kg/d+CsA 5mg/kg/d；⑥陰性對(duì)照組：NS 1ml/d.各組均于術(shù)前1天開(kāi)始肌注給藥,連續(xù)用藥10天。(2)術(shù)后每天觀察移植皮片情況,以移植皮片色澤變暗、發(fā)黑變硬、紅腫水皰及皮片翹起等現(xiàn)象來(lái)判定移植排斥,以移植皮片面積80%出現(xiàn)以上現(xiàn)象視為皮片壞死,記錄排斥反應(yīng)時(shí)間及皮片存活時(shí)間。(3)各組分別于術(shù)前1天、術(shù)后1、4、7、14、21、28天采集外周血,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T細(xì)胞比值,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)外周血細(xì)胞因子IL-10、TGF-β水平。比較各組方案對(duì)皮片存活時(shí)間及各項(xiàng)指標(biāo)的影響。(4)術(shù)后30天采集外周血,檢測(cè)血清IL-10抗體。結(jié)果：(1)實(shí)驗(yàn)組家兔移植皮片出現(xiàn)排斥的時(shí)間與⑥對(duì)照組相比均有一定程度延緩,除①組外其他實(shí)驗(yàn)組與⑥組相比差異均有顯著性(P0.05)。(2)家兔移植皮片存活時(shí)間較⑥組明顯延長(zhǎng),且差異顯著(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組之間比較,⑤組較①組皮片存活時(shí)間長(zhǎng),且差異顯著(P0.05)。⑤組較③組皮片存活時(shí)間長(zhǎng),差異無(wú)顯著性(P0.05)。(3)皮膚移植術(shù)后各組家兔外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T細(xì)胞比值較術(shù)前明顯升高(P0.05)。術(shù)后4天、術(shù)后7天①組與②組均高于⑥組、③組、④組且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后7天④組比⑥組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。⑤組與①組及③組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(4)皮膚移植術(shù)后各組家兔外周血IL-10水平較術(shù)前明顯升高(P0.05)。①組、②組在術(shù)后1、4、7天均較③組、④組、⑤組高(P0.05)。(5)皮膚移植術(shù)后各組家兔外周血TGF-β水平較術(shù)前明顯升高(P0.05)。①組、②組、③組、④組、⑤組在術(shù)后各采樣點(diǎn)TGF-β水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(6)家兔術(shù)后外周血IL-10水平與CD4+CD25+Treg/CD4+T細(xì)胞水平呈正相關(guān)。(7)各組家兔用藥血清IL-10抗體與抗體陽(yáng)性對(duì)照組有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論：(1)IL-10可推遲家兔移植皮片出現(xiàn)排斥的時(shí)間,可以延長(zhǎng)移植皮片的存活時(shí)間。(2)IL-10抗皮膚移植反應(yīng)與CsA有一定的協(xié)同作用。(3)IL-10抑制移植排斥反應(yīng)的作用,有可能與CD4+CD25+T細(xì)胞及IL-10升高有關(guān),IL-10在體內(nèi)起作用的機(jī)制可能與TGF-β無(wú)關(guān)。(4)外源性rhIL-10注射家兔未產(chǎn)生IL-10抗體。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：2544506