【摘要】： 目的:研究ACE2基因轉(zhuǎn)染SD大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞后對(duì)血管緊張素Ⅱ1型受體mRNA表達(dá)的影響。 方法:使用SD大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMC),用脂質(zhì)體法將ACE2轉(zhuǎn)染SD大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞,設(shè)正常細(xì)胞組、空載體組、ACE2組、AngⅡ組、ACE2 +AngⅡ組,通過(guò)RT-PCR檢測(cè)AT1受體mRNA的表達(dá)。 結(jié)果: ACE2轉(zhuǎn)染組AT1受體mRNA表達(dá)的OD值較正常細(xì)胞組和空載體組的OD值有明顯降低,且呈現(xiàn)時(shí)間(8h—72h)和濃度(6ug—8ug)依賴性(P0.05)。AngⅡ?qū)T1受體mRNA表達(dá)的影響與AngⅡ濃度有關(guān),當(dāng)AngⅡ濃度≤10-8mol/L時(shí),AT1受體mRNA的表達(dá)較正常細(xì)胞組明顯增加(P0.05),以濃度為10-9mol/L時(shí)最明顯。對(duì)同時(shí)轉(zhuǎn)染pm-ACE2和用AngⅡ孵育細(xì)胞,與正常細(xì)胞組和空載體組相比,能明顯降低AT1受體mRNA的OD值(P0.05),但作用強(qiáng)度不如單用pm-ACE2轉(zhuǎn)染強(qiáng)(P0.05)。 結(jié)論:ACE2基因轉(zhuǎn)染SD大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞后能降低血管緊張素Ⅱ受體1 mRNA的表達(dá),且呈現(xiàn)時(shí)間(8h—72h)和濃度(6ug—8ug)依賴性,ACE2轉(zhuǎn)染后能夠逆轉(zhuǎn)AngⅡ?qū)ρ芫o張素Ⅱ1型受體mRNA表達(dá)的影響。
【圖文】：

結(jié) 果1、大鼠 VSMC 的鑒定結(jié)果細(xì)胞形態(tài)學(xué)鑒定：采用組織貼塊法在體外成功培養(yǎng)出 SD 大鼠胸主動(dòng)肌細(xì)胞。倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)狀況。從第 4-5 天起，組圍可見有細(xì)胞生長(zhǎng)，，此時(shí)細(xì)胞形態(tài)多樣（梭形、紡錘形、不規(guī)則形），以為中心向外呈放射性生長(zhǎng)，形成細(xì)胞暈。一般 7-10 天時(shí)，相鄰組織塊的相互融合，且鋪滿培養(yǎng)瓶底的 2/3 以上，出現(xiàn)“峰和谷”樣的生長(zhǎng)模式：胞交叉重疊生長(zhǎng)而形成“峰”，“峰”與“峰”之間細(xì)胞呈單層或?qū)訑?shù)少，少散在，而稱為“谷”�！胺搴凸取睒拥纳L(zhǎng)模式，為血管平滑肌細(xì)胞特異特征。（圖 1A）

圖 1B 物鏡×102、提取的質(zhì)粒 pm—ACE2 及 pcDNA3.1/Hygro（+）與電泳比較1 2 M 3 4M：Maker DL：10000,1：擴(kuò)增后提取的 pm-ACE2，2：擴(kuò)增后提取的 pcDNA3.1/H3：原質(zhì)粒 pm-ACE2，4：原質(zhì)粒 pcDNA3.1/Hygro（+）圖 2 擴(kuò)增的質(zhì)粒 pm—ACE2 及 pcDNA3.1/Hygro（+）與原泳結(jié)果
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R346

【參考文獻(xiàn)】

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1 張紅,張梅,趙榮瑞;血管緊張素Ⅱ?qū)χ鲃?dòng)脈平滑肌中血管緊張素AT_1受體的影響[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1998年03期

2 戚文航;;高血壓領(lǐng)域研究進(jìn)展[J];心血管病學(xué)進(jìn)展;2006年05期

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本文編號(hào)：2542563