【摘要】： 目的:探討鹽酸米托蒽醌(mitoxantrone hydrochloride,MIT)對(duì)B16細(xì)胞鈣網(wǎng)蛋白(CRT)表達(dá)的影響,觀察高表達(dá)CRT的黑素瘤B16細(xì)胞膜抗原疫苗對(duì)小鼠抗腫瘤免疫反應(yīng)所產(chǎn)生的影響;同時(shí)觀察高表達(dá)CRT的B16細(xì)胞膜抗原沖擊后DCs誘導(dǎo)的CTL細(xì)胞對(duì)荷黑素瘤小鼠的治療效果。 方法:用MIT處理B16細(xì)胞,免疫熒光法檢測(cè)B16細(xì)胞膜表面CRT的表達(dá),檢測(cè)得知MIT可以上調(diào)B16細(xì)胞CRT的表達(dá)。分別用不同劑量的MIT治療荷瘤小鼠,用普通B16細(xì)胞膜抗原和MIT處理過(guò)的B16細(xì)胞膜蛋白作為疫苗對(duì)荷瘤小鼠模型進(jìn)行預(yù)防接種。體外用普通B16細(xì)胞膜抗原和MIT處理過(guò)的B16細(xì)胞膜抗原分別沖擊DCs之后誘導(dǎo)特異性CTLs治療荷瘤小鼠。流式細(xì)胞學(xué)觀察小鼠腫瘤組織中CRT表達(dá),脾臟不同T細(xì)胞比例變化,免疫組化檢測(cè)小鼠腫瘤內(nèi)T淋巴細(xì)胞、DCs的浸潤(rùn)情況,描計(jì)小鼠腫瘤體積曲線,觀察對(duì)荷黑素瘤小鼠的治療效果。 結(jié)果: 1.分別用0.0μg/ml、0.25μg/ml、1.0μg/ml、4.0μg/ml濃度MIT處理B16細(xì)胞,4組腫瘤細(xì)胞CRT的表達(dá)陽(yáng)性率分別為:(29.40±3.57)%;(42.80±4.59)%;(56.20±5.55)%;(72.20±2.94)%,CRT表達(dá)均上調(diào)(P0.05),且CRT表達(dá)呈劑量依賴性(P0.05)。Western blotting鑒定顯示,4.0μg/ml濃度MIT組B16細(xì)胞膜CRT相對(duì)表達(dá)為472±23,0.0μg/ml MIT組B16細(xì)胞膜CRT相對(duì)表達(dá)為117±18(P0.01)。 2.用2.0、4.0、8.0 mg/kg MIT注射治療荷瘤小鼠,與對(duì)照組相比3種劑量MIT可以不同程度可以提高小鼠模型腫瘤組織CRT表達(dá),流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)其CRT表達(dá)量分別為:5.13±0.95; 7.40±0.86;9.17±1.06,與對(duì)照組3.21±1.37相比有顯著差別(P0.05)。 3.免疫組化實(shí)驗(yàn)顯示:2.0、4.0、8.0 mg/kg MIT組和MIT-B16蛋白疫苗組小鼠模型腫瘤組織內(nèi)部的DCs數(shù)量均顯著高于荷瘤對(duì)照組小鼠(P0.05);2.0、4.0 mg/kg MIT組和MIT-B16蛋白疫苗組小鼠模型腫瘤組織內(nèi)部的T細(xì)胞數(shù)量均顯著高于荷瘤對(duì)照組小鼠(P0.01) 4.流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞顯示:4.0 mg/kg MIT組、MIT-B16蛋白疫苗組、B16-DCs-CTLs組、MIT-B16-DCs-CTLs組小鼠脾臟中CD4~+T淋巴細(xì)胞比例與荷瘤小鼠相比有顯著提高(P0.01);2.0、4.0、8.0 mg/kg MIT組、MIT-B16蛋白疫苗組、B16-DCs-CTLs組、MIT-B16-DCs-CTLs組小鼠脾臟中CD8~+T淋巴細(xì)胞比例與荷瘤小鼠相比有顯著提高(P0.05) 5.第14日處死小鼠測(cè)量腫瘤體積(cm3),各實(shí)驗(yàn)組腫瘤體積均明顯小于與荷瘤對(duì)照組小鼠6.94±0.81(P0.01),其中2.0、4.0、8.0 mg/kg MIT組小鼠腫瘤體積分別為4.07±0.77、2.35±0.54、1.21±0.39,3組有明顯差別(P0.05);B16蛋白疫苗組,MIT-B16蛋白疫苗組腫瘤體積分別為4.15±0.57、1.67±0.33,2組有明顯差別(P0.05);B16-DCs-CTLs組、MIT-B16-DCs-CTLs組腫瘤體積分別為:1.09±0.25、0.59±0.21,2組有明顯差別(P0.05);其中各治療組中MIT-B16-DCs-CTLs組腫瘤體積均小于其他各組(P0.05)。 結(jié)論: 1. MIT能夠上調(diào)CRT在B16腫瘤細(xì)胞表面的表達(dá),相似的MIT可以提高小鼠黑色素瘤組織中CRT的表達(dá),且在小鼠承受的范圍內(nèi)CRT表達(dá)呈現(xiàn)劑量依賴性;適當(dāng)劑量的MIT能夠提高小鼠黑色素瘤組織中浸潤(rùn)的DCs和T細(xì)胞的數(shù)量,提高小鼠脾臟中CD4~+、CD8~+T淋巴細(xì)胞比例,形成特異性的抗腫瘤免疫。 2.高表達(dá)CRT的B16細(xì)胞膜蛋白疫苗能夠提高腫瘤組織中浸潤(rùn)的DCs和T細(xì)胞的數(shù)量,提高小鼠黑色素瘤組織中浸潤(rùn)的DCs和T細(xì)胞的數(shù)量,提高小鼠脾臟中CD4~+、CD8~+T淋巴細(xì)胞比例,改善小鼠機(jī)體抗腫瘤免疫環(huán)境,對(duì)小鼠產(chǎn)生腫瘤特異性保護(hù)。 3.利用高表達(dá)CRT的B16腫瘤膜抗原沖擊后的DCs-CTLs細(xì)胞治療荷瘤小鼠,小鼠脾臟中CD4~+、CD8~+T淋巴細(xì)胞比例提高,改善小鼠機(jī)體抗腫瘤免疫環(huán)境,能夠取得理想療效。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 姜擁軍，周正任，楊曉臨，侯美華，張彥澤，侯繼東;CD_3AK細(xì)胞和LAK細(xì)胞的表型測(cè)定[J];中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1996年02期

2 方耀華,梁東標(biāo);學(xué)習(xí)障礙兒童智力因素及學(xué)習(xí)適應(yīng)性調(diào)查研究[J];中國(guó)心理衛(wèi)生雜志;1998年02期

3 胡云,劉穎,鄭建華;子宮內(nèi)膜腺癌中細(xì)胞膜抗原表達(dá)的研究[J];黑龍江醫(yī)學(xué);2000年05期

4 何曉東,翟志敏,吳竟生;白血病的免疫表型分析[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2000年04期

5 趙春;;淺談?dòng)?jì)算機(jī)實(shí)驗(yàn)室輻射及對(duì)工作人員的影響[J];新鄉(xiāng)學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2009年05期

6 杜衛(wèi)東，楊雪梅，許杰;癌胚抗原、上皮細(xì)胞膜抗原及Ⅳ型膠原與胃癌分化、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J];腫瘤防治研究;1994年04期

7 毛應(yīng)華;糜漫天;許紅霞;承海;;SP2/0細(xì)胞膜抗原負(fù)載DC誘導(dǎo)體外特異性CTL效應(yīng)[J];免疫學(xué)雜志;2006年01期

8 郭繼鴻;;從循證醫(yī)學(xué)看CRT治療適應(yīng)證的進(jìn)展[J];心血管病學(xué)進(jìn)展;2007年06期

9 梁艷;周海桃;連珍;林加鋒;;16例心力衰竭患者植入CRT的護(hù)理體會(huì)[J];心腦血管病防治;2009年06期

10 秦?zé)?韓鈺;曹春雨;任玉珊;王艷林;;融合基因CRT/vGPCR的構(gòu)建及其在真核細(xì)胞膜上的表達(dá)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 方丹紅;吳高俊;黃偉劍;;CRT超反應(yīng)2例分析[A];2011年浙江省心電生理與起搏學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

2 丁守謙;;陰極射線管(CRT)誕生一百周年紀(jì)念 國(guó)際信息顯示會(huì)議(SID'97)介紹之一[A];中國(guó)電子學(xué)會(huì)真空電子學(xué)分會(huì)第十一屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];1997年

3 辛化梅;杜秉初;;CRT分辨率及會(huì)聚測(cè)量技術(shù)分析[A];中國(guó)電子學(xué)會(huì)真空電子學(xué)分會(huì)第十屆年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];1995年

4 杜秉初;曾慶軍;;CRT顯示(象)管特性測(cè)試儀掃描系統(tǒng)分析[A];中國(guó)電子學(xué)會(huì)真空電子學(xué)分會(huì)第十屆年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];1995年

5 謝大剛;吳楠;喻菁;楊向松;侯冬云;;CRT顯示器電磁敏感性初探[A];2010年全國(guó)電磁兼容會(huì)議論文集[C];2010年

6 馬江順;;離子色譜分析在CRT玻殼生產(chǎn)控制中的應(yīng)用[A];中國(guó)電子學(xué)會(huì)真空電子學(xué)分會(huì)第十二屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];1999年

7 葛全杰;孫國(guó)家;;CRT用熒光粉和低壓熒光粉的性能探討[A];中國(guó)電子學(xué)會(huì)真空電子學(xué)分會(huì)第十二屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];1999年

8 李婷;史蓉芳;李劍明;;平衡法心血池顯像評(píng)價(jià)心力衰竭患者CRT療效二例[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)核醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2011年

9 李海鷹;黃偉劍;孫成超;吳高俊;崔麗麗;董逢泉;;心外膜途徑左室電極植入心室再同步化治療(CRT)心力衰竭(附4例報(bào)道)[A];2011年浙江省心電生理與起搏學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

10 龔劭工;李文華;陳文清;章秋明;劉紅;姚戴陽(yáng);;住院精神分裂癥患者CRT的測(cè)試研究[A];二零零四年度全國(guó)精神病專業(yè)第八次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 張文娟;CRT電視生命力依然旺盛[N];政府采購(gòu)信息報(bào);2008年

2 實(shí)習(xí)記者 衣明蕾;CRT電視機(jī)成上半年采購(gòu)主角[N];政府采購(gòu)信息報(bào);2009年

3 編譯 王迪;CRT——Ds獲準(zhǔn)更大范圍使用[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

4 實(shí)習(xí)記者 楊穎樺　本報(bào)記者 簡(jiǎn)俊東;家電下鄉(xiāng)CRT巨頭 深康佳隱憂暗生[N];21世紀(jì)經(jīng)濟(jì)報(bào)道;2008年

5 本報(bào)記者 桑雪騏;CRT電視加速退市LED電視是主要推手[N];中國(guó)消費(fèi)者報(bào);2010年

6 曲奇;CRT電視退市誰(shuí)說(shuō)了算[N];第一財(cái)經(jīng)日?qǐng)?bào);2009年

7 奧維咨詢(AVC)副總經(jīng)理 金曉鋒;液晶降價(jià)加速CRT企業(yè)轉(zhuǎn)型[N];中國(guó)電子報(bào);2008年

8 本報(bào)記者 吳蔚;CRT玻殼企業(yè)遭遇轉(zhuǎn)型難題[N];中國(guó)計(jì)算機(jī)報(bào);2010年

9 陳攀;觀看CRT和等離子電視更省眼[N];中國(guó)信息報(bào);2009年

10 本報(bào)記者 周凈;平板提前兩年取代CRT[N];消費(fèi)日?qǐng)?bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前8條

1 李琳;RT3DE和STI技術(shù)評(píng)估心室同步性和預(yù)測(cè)CRT療效的臨床研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

2 騫憲忠;樹模型在社會(huì)心理流行病學(xué)研究中的應(yīng)用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2007年

3 方建珍;信用風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)移機(jī)制研究[D];武漢理工大學(xué);2011年

4 王歡;心臟再同步化治療起搏器新的監(jiān)測(cè)功能在充血性心力衰竭患者中的應(yīng)用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

5 汪曉敏;Calreticulin蛋白在食管癌轉(zhuǎn)移中作用機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

6 向陽(yáng);小麥Jacalin基因家族和鈣網(wǎng)聯(lián)蛋白基因的鑒定和分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

7 孫連榮;社會(huì)偏見對(duì)攻擊行為影響的理論和實(shí)驗(yàn)[D];華東師范大學(xué);2011年

8 董侃;植入性器械治療心功能不全的臨床研究[D];浙江大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張峻嶺;腫瘤細(xì)胞CRT表達(dá)對(duì)荷瘤小鼠免疫環(huán)境的影響及其應(yīng)用于過(guò)繼免疫治療的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

2 劉婷婷;柴油機(jī)排氣后處理系統(tǒng)CRT老化及失效故障診斷研究[D];北京交通大學(xué);2012年

3 鄒強(qiáng);信用風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)移（CRT）工具對(duì)商業(yè)銀行風(fēng)險(xiǎn)的影響研究[D];華東理工大學(xué);2011年

4 林海燕;CRT術(shù)后亞急性深靜脈血栓形成[D];浙江大學(xué);2011年

5 彭欽;比較中晚期宮頸癌IMRT與 CRT及3D-CRT的劑量分布[D];蘇州大學(xué);2012年

6 晁慧娟;CRT術(shù)后QRS時(shí)限縮短值對(duì)反應(yīng)性預(yù)測(cè)價(jià)值的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2011年

7 李煒;高血壓大鼠血管平滑肌細(xì)胞CRT和caspase-12的表達(dá)對(duì)血管重構(gòu)的影響及拉西地平干預(yù)的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

8 杜斌祥;可控并聯(lián)電抗器應(yīng)用于特高壓交流輸電線路的研究[D];蘭州交通大學(xué);2011年

9 劉新莉;CRT/MAGE-A3重組腺病毒載體的構(gòu)建及表達(dá)[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

10 胡濱;EMA在腎細(xì)胞癌和腎盂移行細(xì)胞癌中的表達(dá)情況研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2004年

，

本文編號(hào)：2532440