【摘要】： 第一部分不同強(qiáng)度磁刺激對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移的影響及機(jī)制研究 實(shí)驗(yàn)一：不同強(qiáng)度磁刺激對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移的影響 [摘要]目的研究不同強(qiáng)度磁刺激對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移作用的量效關(guān)系。方法24只Sprague-Dawley大鼠按刺激強(qiáng)度被隨機(jī)分為對(duì)照組(刺激強(qiáng)度：0Tesla)、0.76T組(刺激強(qiáng)度0.76Tesla)、1.52T組(刺激強(qiáng)度：1.52Tesla)、1.9T組(刺激強(qiáng)度：1.9Tesla),4組的刺激頻率為1Hz,刺激量為30脈沖,均采用溴乙錠(EB)注射入脊髓左側(cè)背索復(fù)制局灶性的脊髓損傷模型。刺激14天后,處死大鼠,Western-Blot檢測(cè)GFAP、MAP-2,采用圖像分析系統(tǒng)觀察GFAP、Brdu和MAP-2的免疫組化表達(dá)及脊髓損傷空洞體積的變化。結(jié)果隨著磁刺激強(qiáng)度的增加,在14天時(shí)空洞的體積逐漸縮小,組間差異具有顯著性差異(P＜0.05)。在空洞縮小的區(qū)域中,可以觀察到GFAP的陽(yáng)性表達(dá),而無(wú)Brdu、MAP-2的陽(yáng)性表達(dá)。隨著磁刺激強(qiáng)度的增加,GFAP的陽(yáng)性表達(dá)顯著增強(qiáng)(P0.05)。Western-Blot顯示：隨著磁刺激強(qiáng)度的增加,GFAP的光密度值相應(yīng)增加,而MAP-2的光密度值沒(méi)有明顯變化,與組化的變化趨勢(shì)一致。結(jié)論刺激頻率為1Hz,刺激強(qiáng)度不大于1.9Tesla的條件下,磁刺激可促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞的遷移,隨著刺激強(qiáng)度的增強(qiáng),星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移的能力亦增強(qiáng)。 實(shí)驗(yàn)二：不同強(qiáng)度磁刺激對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移作用的機(jī)制研究 [摘要]目的研究不同劑量ERK抑制劑U0126對(duì)1Hz磁刺激促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移作用的影響,以探討不同強(qiáng)度磁刺激促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移作用和ERK信號(hào)通路的關(guān)系,并選擇U0126合適的阻滯劑量。方法24只Sprague-Dawley大鼠按U0126劑量被隨機(jī)分為對(duì)照組(Omg/kg U0126, n=6)、低劑量組(0.1mg/kgU0126,n=6)、中劑量組(0.2mg/kg U0126, n= 6)、高劑量組(0.4mg/kg U0126,n=6),4組的刺激參數(shù)都為頻率1Hz,強(qiáng)度1.52Tesla,刺激量為30脈沖；均采用溴乙錠(EB)注射入脊髓左側(cè)背索復(fù)制局灶性的脊髓損傷模型。刺激14天后,處死大鼠,Western-Blot檢測(cè)GFAP、ERK1/2和MAP-2,采用圖像分析系統(tǒng)觀察GFAP、ERK1/2和MAP-2的免疫組化表達(dá)及脊髓損傷空洞體積的變化。結(jié)果隨著U0126劑量的增加,在14天時(shí)空洞的體積逐漸增大,GFAP和ERK1／2的陽(yáng)性表達(dá)逐漸減弱,與對(duì)照組相比具有顯著性差異(P0.05)；并且,GFAP和ERK1／2的陽(yáng)性表達(dá)呈相同的趨勢(shì)；U0126中劑量組和高劑量組作用則無(wú)明顯差異(P0.05)；而病灶區(qū)域MAP-2呈陰性表達(dá)。Western-Blot顯示：隨著U0126劑量的增加,ERK1／2逐漸被抑制,0.2mg/kg和0.4mg/kgU0126都可完全抑制ERK1／2的表達(dá),隨著ERK逐漸被抑制,GFAP的表達(dá)亦逐漸減弱。結(jié)論不同劑量的U0126可抑制1Hz磁刺激引起的星形膠質(zhì)細(xì)胞的遷移,0.2mg/kg是較合適的劑量；1.52Tesla,1Hz磁刺激引起的星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移與ERK信號(hào)通路有關(guān)。 第二部分不同頻率磁刺激對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移的影響及機(jī)制研究 實(shí)驗(yàn)一：不同頻率磁刺激對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移的影響 [摘要]目的研究不同頻率磁刺激對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移作用的量效關(guān)系。方法30只Sprague-Dawley大鼠按刺激頻率被隨機(jī)分為對(duì)照組(刺激頻率：0Hz,強(qiáng)度：1.52Tesla)、1Hz組(刺激頻率：1Hz,強(qiáng)度：1.52Tesla)、5Hz組(刺激頻率：5Hz,強(qiáng)度：1.52Tesla)、10Hz組(刺激頻率：10Hz,強(qiáng)度：1.52Tesla)和20Hz組(刺激頻率：20Hz,強(qiáng)度：1.52Tesla),5組的刺激量均為30個(gè)脈沖,采用溴乙錠(EB)注射入脊髓左側(cè)背索復(fù)制局灶性的脊髓損傷模型。刺激14天后,處死大鼠,Western-Blot檢測(cè)GFAP、MAP-2,采用圖像分析系統(tǒng)觀察GFAP、Brdu和MAP-2的表達(dá)及脊髓損傷區(qū)空洞體積的變化。結(jié)果隨著磁刺激頻率的增加,在第14天時(shí)空洞的體積逐漸縮小,組間差異具有顯著性差異(P0.05)。在空洞縮小的區(qū)域中,可以觀察到GFAP的陽(yáng)性表達(dá),而無(wú)Brdu和MAP-2的陽(yáng)性表達(dá)。隨著磁刺激頻率的增加,GFAP的陽(yáng)性表達(dá)亦顯著增強(qiáng)(P＜0.05)。Western-Blot顯示：隨著磁刺激頻率的增加,GFAP的光密度值相應(yīng)增加,而MAP-2的光密度值沒(méi)有明顯變化,與組化變化趨勢(shì)一致。結(jié)論刺激強(qiáng)度為1.52 Tesla,刺激頻率不大于20Hz的條件下,磁刺激可促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞的遷移,并隨著刺激頻率的提高,星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移的能力亦增強(qiáng)。 實(shí)驗(yàn)二：不同頻率磁刺激對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移作用的機(jī)制研究 [摘要]目的研究不同頻率磁刺激促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移過(guò)程中ERK1／2所起的作用,以探討不同頻率磁刺激促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移作用的機(jī)制,并選擇U0126合適的阻滯劑量。方法24只Sprague-Dawley大鼠按U0126劑量被隨機(jī)分為對(duì)照組(0mg/kg U0126, n= 6)、低劑量組(0.1mg/kg U0126, n=6)、中劑量組(0.2mg/kg U0126, n=6)、高劑量組(0.4mg/kg U0126, n=6)，4組的磁刺激參數(shù)均為頻率10Hz、強(qiáng)度1.52 Tesla,刺激量30脈沖,均采用溴乙錠(EB)注射入脊髓左側(cè)背索復(fù)制局灶性的脊髓損傷模型。刺激14天后,處死大鼠,Western-Blot檢測(cè)3FAP、ERK1/2和MAP-2,采用圖像分析系統(tǒng)觀察GFAP、ERK1/2和MAP-2的表達(dá)及脊髓損傷空洞體積的變化。結(jié)果隨著U0126劑量的增加,在第14天時(shí)空洞的體積逐漸增大,GFAP和ERK1／2的陽(yáng)性表達(dá)逐漸減弱,與對(duì)照組相比具有顯著性差異(P0.05),U0126中劑量組和高劑量組的作用相似無(wú)明顯差異(P0.05)。而病灶區(qū)域MAP-2呈陰性表達(dá)。Western-Blot顯示：隨著U0126劑量的增加,ERK1／2逐漸被抑制,0.2mg/kg和0.4mg/kgU0126都可完全抑制ERK1／2的表達(dá),隨著ERK逐漸被抑制,GFAP的表達(dá)亦逐漸減弱。結(jié)論不同劑量的U0126可抑制10Hz磁刺激引起的星形膠質(zhì)細(xì)胞的遷移,0.2mg/kg是較合適的劑量；1.52 Tesla,10Hz磁刺激引起的星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移與ERK信號(hào)通路有關(guān)；
【圖文】：

立體定位儀下定位(左側(cè)背索，脊膜下深0.7mm)

圖3A:造模成功，形成局灶性病灶圖3B:注藥速度過(guò)快造成藥物彌散二.治療干預(yù)磁刺激器為武漢依瑞德醫(yī)療設(shè)備新技術(shù)有限公司生產(chǎn)CCY一I型(圖4)，圓形刺激線圈直徑為9cm，脈沖磁場(chǎng)峰值強(qiáng)度為3.5T。于脊髓損傷后24h開(kāi)始給予磁刺激，將線圈水平置于大鼠脊柱上方，線圈邊緣對(duì)準(zhǔn)T10節(jié)段、距背部皮膚1cm的位置lv](圖5)，刺激頻率為1Hz，每天1次，每次30個(gè)脈沖，連續(xù)14d。對(duì)照組置相同環(huán)境下，未予磁刺激。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R35

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 于洪麗;磁刺激穴位腦電特征信號(hào)提取及分析[D];河北工業(yè)大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：2522541