【摘要】： 目的：探討結核分枝桿菌MPT64基因重組腺病毒疫苗的免疫原性及其對結核分支桿菌感染的免疫保護作用,為研究新的結核疫苗提供理論依據(jù)。 方法：將50只雌性C57BL/6小鼠隨機分為5組(A為陰性對照組或正常組、B為陽性對照組或模型組、C為腺病毒載體組、D為實驗疫苗組、E為卡介苗組),各組10只,每組再分為免疫原性組4只,保護效力組6只。分別將生理鹽水(A、B組)、空腺病毒載體(C組)、結核分枝桿菌MPT64基因重組腺病毒疫苗(D組)、卡介苗(E組)免疫各組小鼠,4周后無菌取免疫原性組小鼠脾臟,研磨勻漿培養(yǎng),取脾淋巴細胞培養(yǎng)上清液用ELISA法檢測細胞因子(IFN-γ、IL-4)；用MTT法檢測淋巴細胞增值活性。保護效力組小鼠除A組予生理鹽水外均予5×106CFU結核分枝桿菌H37Rv標準毒力株經(jīng)尾靜脈攻毒,4周后,稱取左肺及脾臟濕重計算臟器指數(shù),并行組織病理檢查及肺結核菌培養(yǎng)行菌落計數(shù)。 結果：①ELISA法檢測脾淋巴細胞培養(yǎng)上清液中細胞因子,D組IFN-γ顯著高于A、B、C組,比較差異有統(tǒng)計學意義,與E組比較差異無統(tǒng)計學意義；②IL-4水平5組均較低,各組間差異無統(tǒng)計學意義；③MTT法檢測脾淋巴細胞增殖實驗結果顯示,D組的刺激指數(shù)最高,與A、B、C比較,差異有統(tǒng)計學意義,與E組差異無統(tǒng)計學意義；④大體病理結果顯示D組和E組肺組織和脾組織病變明顯較B、C組輕。⑤肺組織勻漿液結核菌菌落計數(shù)A組無菌生長,E組菌落數(shù)最少,其次是D組；D組與B、C組間差異有統(tǒng)計學意義,與E組間差異無統(tǒng)計學意義。 結論：初步實驗表明：①結核分枝桿菌MPT64基因重組腺病毒疫苗具有較強的免疫原性,在小鼠體內能夠誘導較強的細胞免疫應答,誘導的IFN-γ與BCG相比無明顯差異,表明該疫苗免疫效果較好；②結核分枝桿菌MPT64基因重組腺病毒疫苗能增強小鼠對結核分枝桿菌感染的保護作用,其保護作用與卡介苗效果相當。
文內圖片：
圖片說明： 可見類上皮細胞和Langhan細胞;B組和C組肺結構有較多區(qū)域破壞，，肺組織可見多個散在結核病灶，其中干酪樣壞死較多，液體滲出和淋巴細胞滲出較明顯，大量結核結節(jié)形成，纖維化罕見，部分結果見圖2。A為陰性對照組小鼠肺H五(xZoo)B為陽性對照組小鼠肺HE(x2oo)c為載體組小鼠肺HE(xZoo)D為實驗疫苗組小鼠肺HE(xZoo)
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R392

【引證文獻】

相關博士學位論文 前1條

1 藺國珍;布魯氏菌病LAMP檢測方法的建立及雙基因共表達分子疫苗研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2012年

本文編號：2515787