發(fā)布時間：2019-07-18 09:20

【摘要】： 目的：探討結(jié)核分枝桿菌MPT64基因重組腺病毒疫苗的免疫原性及其對結(jié)核分支桿菌感染的免疫保護(hù)作用,為研究新的結(jié)核疫苗提供理論依據(jù)。 方法：將50只雌性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為5組(A為陰性對照組或正常組、B為陽性對照組或模型組、C為腺病毒載體組、D為實驗疫苗組、E為卡介苗組),各組10只,每組再分為免疫原性組4只,保護(hù)效力組6只。分別將生理鹽水(A、B組)、空腺病毒載體(C組)、結(jié)核分枝桿菌MPT64基因重組腺病毒疫苗(D組)、卡介苗(E組)免疫各組小鼠,4周后無菌取免疫原性組小鼠脾臟,研磨勻漿培養(yǎng),取脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清液用ELISA法檢測細(xì)胞因子(IFN-γ、IL-4)；用MTT法檢測淋巴細(xì)胞增值活性。保護(hù)效力組小鼠除A組予生理鹽水外均予5×106CFU結(jié)核分枝桿菌H37Rv標(biāo)準(zhǔn)毒力株經(jīng)尾靜脈攻毒,4周后,稱取左肺及脾臟濕重計算臟器指數(shù),并行組織病理檢查及肺結(jié)核菌培養(yǎng)行菌落計數(shù)。 結(jié)果：①ELISA法檢測脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子,D組IFN-γ顯著高于A、B、C組,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義,與E組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；②IL-4水平5組均較低,各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義；③MTT法檢測脾淋巴細(xì)胞增殖實驗結(jié)果顯示,D組的刺激指數(shù)最高,與A、B、C比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,與E組差異無統(tǒng)計學(xué)意義；④大體病理結(jié)果顯示D組和E組肺組織和脾組織病變明顯較B、C組輕。⑤肺組織勻漿液結(jié)核菌菌落計數(shù)A組無菌生長,E組菌落數(shù)最少,其次是D組；D組與B、C組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,與E組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論：初步實驗表明：①結(jié)核分枝桿菌MPT64基因重組腺病毒疫苗具有較強(qiáng)的免疫原性,在小鼠體內(nèi)能夠誘導(dǎo)較強(qiáng)的細(xì)胞免疫應(yīng)答,誘導(dǎo)的IFN-γ與BCG相比無明顯差異,表明該疫苗免疫效果較好；②結(jié)核分枝桿菌MPT64基因重組腺病毒疫苗能增強(qiáng)小鼠對結(jié)核分枝桿菌感染的保護(hù)作用,其保護(hù)作用與卡介苗效果相當(dāng)。
文內(nèi)圖片：
圖片說明： 可見類上皮細(xì)胞和Langhan細(xì)胞;B組和C組肺結(jié)構(gòu)有較多區(qū)域破壞，，肺組織可見多個散在結(jié)核病灶，其中干酪樣壞死較多，液體滲出和淋巴細(xì)胞滲出較明顯，大量結(jié)核結(jié)節(jié)形成，纖維化罕見，部分結(jié)果見圖2。A為陰性對照組小鼠肺H五(xZoo)B為陽性對照組小鼠肺HE(x2oo)c為載體組小鼠肺HE(xZoo)D為實驗疫苗組小鼠肺HE(xZoo)
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R392

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 藺國珍;布魯氏菌病LAMP檢測方法的建立及雙基因共表達(dá)分子疫苗研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

本文編號：2515787