【摘要】： 背景與目的:近年來(lái)心理社會(huì)因素在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用越來(lái)越受到關(guān)注,但其具體作用機(jī)制尚不清楚,本研究旨在探討慢性束縛應(yīng)激對(duì)昆明小鼠脾淋巴細(xì)胞免疫功能及其小鼠前胃癌(mouse forestomach carcinoma,MFC)移植瘤生長(zhǎng)和血管形成的影響,以期為探討心理社會(huì)因素對(duì)惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用及其機(jī)制提供一些依據(jù)。 方法: 第一部分:昆明小鼠慢性束縛應(yīng)激模型的建立 將60只昆明小鼠按完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分為正常飼養(yǎng)組、單純腫瘤組、單純束縛組及腫瘤加束縛組,每組15只,在統(tǒng)計(jì)分析時(shí)將正常飼養(yǎng)組和單純腫瘤組視為對(duì)照組,單純束縛組和腫瘤加束縛組視為慢性束縛應(yīng)激組。對(duì)慢性束縛應(yīng)激組小鼠采用自制束縛筒進(jìn)行慢性束縛應(yīng)激,對(duì)照組正常飼養(yǎng),共3周,觀察小鼠大體行為、體重、進(jìn)食量、飲水量變化并測(cè)定小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)不動(dòng)時(shí)間。 第二部分:慢性束縛應(yīng)激對(duì)昆明小鼠脾淋巴細(xì)胞免疫功能及其小鼠前胃癌(MFC)移植瘤生長(zhǎng)的影響 單純腫瘤組及腫瘤加束縛組小鼠于實(shí)驗(yàn)第4周時(shí)建立MFC皮下移植瘤模型,種瘤后10d處死全部小鼠,測(cè)量移植瘤體重量,MTT法檢測(cè)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖及對(duì)MFC細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制能力,酶連免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunoabsorbent assay, ELISA)檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-2的能力。 第三部分:慢性束縛應(yīng)激對(duì)昆明小鼠移植瘤血管形成的影響 酶連免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)小鼠血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表達(dá)水平,免疫組織化學(xué)法檢測(cè)MFC移植瘤組織VEGF蛋白和微血管密度(MVD)表達(dá)水平。 結(jié)果: 第一部分:昆明小鼠慢性束縛應(yīng)激模型的建立束縛應(yīng)激3周后小鼠表現(xiàn)為精神萎靡、呆滯,活動(dòng)減少,進(jìn)食、飲水量下降,毛色無(wú)光澤,束縛應(yīng)激期間小鼠體重增長(zhǎng)緩慢,慢性束縛應(yīng)激組小鼠懸尾和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)不動(dòng)時(shí)間均較對(duì)照組延長(zhǎng)。 第二部分:慢性束縛應(yīng)激對(duì)昆明小鼠脾淋巴細(xì)胞免疫功能及其小鼠前胃癌(MFC)移植瘤生長(zhǎng)的影響 單純腫瘤組瘤重1.39±0.39g,腫瘤加束縛組瘤重2.10±0.52g,與單純腫瘤組相比,腫瘤加束縛組的MFC移植瘤生長(zhǎng)較快,腫瘤增長(zhǎng)率達(dá)51.08%(Ρ0.01);正常飼養(yǎng)組、單純腫瘤組、單純束縛組和腫瘤加束縛組小鼠脾T淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)分別為1.77±0.22、1.70±0.17、1.69±0.18、1.22±0.15,脾B淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)分別為1.73±0.14、1.65±0.17、1.64±0.21、1.33±0.11,效靶比在5∶1和10∶1時(shí)小鼠脾淋巴細(xì)胞對(duì)MFC細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率分別為(23.01±4.76)%、(19.47±3.70)%、(16.81±3.68)%、(7.14±5.00)%和(33.03±3.91)%、(28.34±4.58)%、(24.94±2.97)%、(13.49±7.94)%,脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-2含量分別為260.03±14.96 pg/ml、239.78±10.93 pg/ml、238.11±13.50 pg/ml、186.34±10.42 pg/ml,兩因素方差分析揭示慢性束縛應(yīng)激和MFC移植瘤均使小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力、對(duì)MFC細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制能力及產(chǎn)生IL-2的能力減弱,并且兩者具有交互效應(yīng),其中以慢性束縛應(yīng)激的影響程度較大(Ρ0.01)。 第三部分:慢性束縛應(yīng)激對(duì)昆明小鼠移植瘤血管形成的影響 正常飼養(yǎng)組、單純腫瘤組、單純束縛組和腫瘤加束縛組小鼠的血清VEGF水平分別為497.424±19.427 pg/ml、519.286±17.343 pg/ml、515.676±14.153 pg/ml、559.620±11.724 pg/ml,兩因素方差分析揭示慢性束縛應(yīng)激和MFC移植瘤都使小鼠血清VEGF含量增加,兩者存在交互效應(yīng),其中以慢性束縛應(yīng)激的影響程度較大(Ρ0.01),單純腫瘤組和腫瘤加束縛組MFC移植瘤組織中VEGF和MVD表達(dá)分別為0.117±0.012(OD值)、0.145±0.011(OD值)和22.87±3.68(條)、26.53±4.41(條),兩組間相比,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Ρ0.01)。 結(jié)論: 第一部分:昆明小鼠慢性束縛應(yīng)激模型的建立 該模型小鼠在心理情緒方面發(fā)生了變化,表現(xiàn)出明顯的應(yīng)激抑郁狀態(tài),可進(jìn)一步應(yīng)用于慢性束縛應(yīng)激與小鼠脾淋巴細(xì)胞免疫功能以及MFC移植瘤間關(guān)系的研究。 第二部分:慢性束縛應(yīng)激對(duì)昆明小鼠脾淋巴細(xì)胞免疫功能及其小鼠前胃癌(MFC)移植瘤生長(zhǎng)的影響 慢性束縛應(yīng)激可使小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力、對(duì)MFC細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制能力及產(chǎn)生IL-2的能力減弱,從而削弱小鼠免疫功能,促進(jìn)MFC移植瘤生長(zhǎng)。 第三部分:慢性束縛應(yīng)激對(duì)昆明小鼠MFC移植瘤血管形成的影響 慢性束縛應(yīng)激可促進(jìn)小鼠血清VEGF水平升高和MFC移植瘤組織中VEGF與MVD表達(dá),通過(guò)血管形成促進(jìn)MFC移植瘤生長(zhǎng)。
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圖片說(shuō)明： 附圖 1 慢性束縛應(yīng)激模型的建立 附圖 2 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)Photo 1 The establishment of chronicrestraint stress modelPhoto 2 The tail suspension test附圖 3 小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) 附圖 4 實(shí)驗(yàn) 3 周后慢性束縛應(yīng)激組小鼠Photo 3 The forced swimming test Photo 4 The mouse in chronic restraintstress group after 3 weeks
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圖片說(shuō)明： 40附圖 3 小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) 附圖 4 實(shí)驗(yàn) 3 周后慢性束縛應(yīng)激組小鼠Photo 3 The forced swimming test Photo 4 The mouse in chronic restraintstress group after 3 weeks附圖 5 實(shí)驗(yàn) 3 周后正常飼養(yǎng)組小鼠 附圖 6 小鼠脾臟Photo 5 The mouse in normal contral groupafter 3 weeksPhoto 6 The spleen of mouse
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R392;R735.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 苗青;孔北華;;山東省上皮性卵巢癌發(fā)病因素分析——病例配對(duì)研究[J];癌癥;2006年07期

2 曹碧茵,施建蓉,童瑤,鄒軍;心理應(yīng)激動(dòng)物模型的研制及其應(yīng)用[J];中國(guó)行為醫(yī)學(xué)科學(xué);2005年02期

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本文編號(hào)：2514904