【摘要】：TTRAP是一個(gè)最近發(fā)現(xiàn)的與NF-kB通路相關(guān)的PML核體蛋白。在這項(xiàng)研究中,通過(guò)酵母雙雜交分析,TTRAP被鑒定為一個(gè)HIV-1整合酶相互作用蛋白。這樣的相互作用被進(jìn)一步通過(guò)免疫共沉淀,GST pull down和細(xì)胞內(nèi)共定位實(shí)驗(yàn)加以證明。并且,截?cái)囿w分析表明,TTRAP的N端的180個(gè)氨基酸殘基直接與HIV-1整合酶結(jié)合。在穩(wěn)定敲除TTRAP的細(xì)胞系中,病毒載體的整合效率相比整合non-silencing載體的對(duì)照細(xì)胞系大大下降;而另一方面,感染病毒載體前瞬時(shí)轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-TTRAP質(zhì)粒過(guò)表達(dá)TTRAP增加了整合事件發(fā)生的百分率。綜上,本實(shí)驗(yàn)報(bào)道了細(xì)胞內(nèi)蛋白TTRAP具有與HIV-1整合酶結(jié)合的能力,并且促進(jìn)慢病毒載體的整合。這些發(fā)現(xiàn)揭示了TTRAP的一個(gè)新功能,并且拓展了我們關(guān)于細(xì)胞應(yīng)答HIV-1感染的知識(shí)。TTRAP和HIV-1整合酶存在的相互作用可能幫助我們?cè)O(shè)計(jì)新的抗病毒藥物和提高慢病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移的效率。
[Abstract]:TTRAP is a recently discovered PML nucleosome protein related to NF-kB pathway. In this study, TTRAP was identified as a HIV-1 integrase interacting protein by yeast two-hybrid analysis. This interaction was further proved by immunoprecipitation, GST pull down and intracellular co-localization. Moreover, the analysis of truncated body showed that the N-terminal amino acid residues of TTRAP were directly bound to HIV-1 integrase. In the cell line stably knockout TTRAP, the integration efficiency of virus vector was much lower than that of the control cell line integrated with non-silencing vector. On the other hand, transient transfer of TTRAP into pcDNA3.1-TTRAP plasmid before infection of virus vector increased the percentage of integration events. In summary, this study reported that intracellular protein TTRAP has the ability to bind to HIV-1 integrase and promote the integration of lentivirus vector. These findings reveal a new feature of TTRAP. The interaction between TTRAP and HIV-1 integrase may help us design new antiviral drugs and improve the efficiency of lentivirus mediated gene transfer.
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R341

【共引文獻(xiàn)】

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3 趙海生;王一;;rhLEDGF p52基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建、誘導(dǎo)表達(dá)及蛋白純化[J];眼科新進(jìn)展;2007年01期

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5 曲利軍;晶狀體上皮源生長(zhǎng)因子的基礎(chǔ)與臨床[J];中國(guó)實(shí)用眼科雜志;2004年01期

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本文編號(hào)：2483876