【摘要】： 目的制備日本血吸蟲(Schistosome japonicum)雄蟲生殖細胞減數(shù)分裂(meiotic mitosis)時期的染色體(chromosome)和體細胞有絲分裂時期的染色體,探索血吸蟲染色體C帶和G帶制備方法,分析其染色體核型和C帶、G帶帶型特征;在掃描電鏡下觀察染色體的形態(tài)特征,進一步豐富對日本血吸蟲染色體結(jié)構(gòu)組成的認識,為深入研究日本血吸蟲染色體和血吸蟲基因組工程提供基礎(chǔ)。 方法向感染日本血吸蟲尾蚴的小鼠腹腔注射秋水仙素,4-6h小時后處死小鼠,收集成蟲,快速切下多條雄蟲睪丸部分,經(jīng)剪碎、胰酶消化、低滲、固定后,氣干法制片,Giemsa染色,顯微鏡下觀察、拍照,進行染色體核型分析;按上述方法制備日本血吸蟲體細胞染色體,部分染色體標本Giemsa染色、觀察、拍照,部分染色體標本室溫放置后依次用HCl溶液、飽和氫氧化鋇溶液、2×SSC溶液處理,Giemsa染色,觀察C帶;另一部分染色體標本用低濃度胰酶溶液處理,Giemsa染色,觀察G帶;將分裂好、分散好的日本血吸蟲染色體標本在顯微鏡下做好標記,置于離子濺射儀中噴金,日立S-4700型掃描電鏡觀察,攝影。 結(jié)果(1)日本血吸蟲生殖細胞減數(shù)分裂染色體數(shù)目為8條,根據(jù)Levan標準,日本血吸蟲生殖細胞染色體可分為3組加上性染色體,其中m組中部著絲粒染色體為2對,Sm組亞中部著絲粒染色體為3對,St組亞端部著絲粒染色體為2對,性染色體為1對,核型公式為n = 2m+ 3Sm + 2St +性染色體。 (2)日本血吸蟲體細胞有絲分裂染色體數(shù)目為16條,核型公式為2n= 4m +6Sm + 4St + 2性染色體,與生殖細胞染色體核型公式相符。C帶特征為:每條染色體都有著絲粒帶,除此之外,No.1號長、短臂上各有一條末端帶;No.2號短臂上有一條中間帶;No.3號長、短臂上各有一條中間帶;No.4號長臂上有兩條中間帶;No.5號長臂上有一條中間帶;No.6號長臂上有一條末端帶;No.7號短臂上有一條中間帶;Z染色體長臂上有一條中間帶;W染色體短臂上一條中間帶,長臂上有兩條中間帶,其核型公式為2n= 5CI+ + 4CI+ + 3CI + 2CT +2CT+。G帶特征為:No.1號染色體長、短臂上各有1條顯帶;No.2號染色體短臂1條顯帶,長臂2條顯帶;No.3~4號染色體短臂1條顯帶,長臂4條顯帶;No.5~7號染色體短臂1條顯帶,長臂2條顯帶;No.8號染色體短臂2條顯帶,長臂4條顯帶。 (3)血吸蟲染色體標本直接用離子濺射儀鍍膜后掃描電鏡觀察,不用胰酶處理的染色體表面光滑,未見螺旋狀結(jié)構(gòu),而用胰酶處理過的染色體標本,表面可見螺旋狀結(jié)構(gòu)。 結(jié)論本研究方法可成功制備日本血吸蟲生殖細胞減數(shù)分裂各時期染色體和體細胞有絲分裂各時期的染色體,獲得了較理想的染色體核型圖像和C帶、G帶帶型;染色體標本直接噴金法可以清楚的觀察到染色體結(jié)構(gòu)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R383

【參考文獻】

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本文編號：2465048