發(fā)布時間：2019-04-13 21:31

【摘要】：背景和目的： 高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)具有促進脂質(zhì)逆轉(zhuǎn)運、抗氧化及抗炎癥等功能,因而在抗動脈粥樣硬化中起著重要作用。在臨床上,人們通過檢測高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),即HDL中的膽固醇成分,從一定程度上來反映人體內(nèi)循環(huán)血液中HDL的水平。人們很早就發(fā)現(xiàn),HDL-C的水平與冠心病風險呈負相關(guān),因此將升高HDL-C水平作為抗動脈粥樣硬化治療的靶標之一。然而近年來,人們發(fā)現(xiàn),HDL的功能具有兩面性,在某些急性應(yīng)激或慢性炎癥狀態(tài)下,HDL膽固醇逆轉(zhuǎn)運的能力減弱,抗炎和抗氧化活性降低,甚至可能會變成促炎癥的作用。因而人們認識到,HDL的功能比水平更重要。 吸煙是動脈粥樣硬化的重要危險因素,其中,影響血脂代謝是其主要機制之一。大量橫斷面的研究表明,長期吸煙會導致總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的水平升高,而HDL-C水平則會降低,然而,我們對吸煙過程中HDL的功能學方面的變化卻幾乎一無所知,目前仍不清楚以下幾個問題：①長期吸煙者的HDL功能有何變化?機制是什么?②在單次吸煙后,HDL的功能是否會發(fā)生變化,機制是什么?③吸煙的急性期和慢性期,HDL的功能是否不同?本研究即旨在觀察不吸煙的健康人在吸煙前后,以及長期吸煙的健康人,其HDL的抗氧化及抗炎癥功能有何變化,并探尋其機制。 方法： 1.收集8名不吸煙的健康受試者吸煙前后以及12名長期吸煙的健康受試者的血漿及血清樣本,并將血樣分成3組：不吸煙組、單次吸煙組以及長期吸煙組,保存于-80℃待用； 2.通過密度梯度離心方法分離高密度脂蛋白,測定其濃度并鑒定；3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測HDL上淀粉樣蛋白A(SAA)的含量； 4.將各受試者的LDL及HDL先通過檢測紫外吸收OD234nm測定脂質(zhì)基礎(chǔ)氧化程度,后加入Cu2+氧化,記錄氧化曲線各部分參數(shù),評估各組LDL及HDL的基礎(chǔ)氧化程度和氧化易感性； 5.將各組受試者HDL與健康受試者低密度脂蛋白(LDLpool)混合,通過檢測紫外吸收OD234nm測定脂質(zhì)基礎(chǔ)氧化程度,后加入Cu2+氧化LDL,記錄氧化曲線各部分參數(shù),評估HDL抗氧化能力,并分析其機制； 6.熒光法測定血清對氧磷酶-1(PON-1)活性； 7.通過Transwell(?)、室法測定LDL對THP-1細胞化學趨化的促進作用； 8.通過Transwell小室法測定HDL對THP-1細胞化學趨化的抑制作用。 結(jié)果： 1.吸煙組與不吸煙組的年齡(37±7.6歲比36±7.1歲,p=0.87)、BMI (22.9±0.76比22.8±±0.48,p=0.67)相匹配。 2.與吸煙前相比,單次吸煙后,受試者的收縮壓(SBP,120.6±10.5mmHg比106.9±12.5mmHg, p0.01)、脈壓(42.5±6.0mmHg比31.9±4.6mmHg, p0.01)、心率(84±4bpm比68±6bpm, p0.01)及丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT,28.98±12.04U/L比26.49±±12.61U/L,p0.01)均明顯升高,而舒張壓(DBP,78.1±8.0mmHg比75.0±10.4mmHg, p=0.09),天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST,27.01±4.66U/L比24.30±±6.32U/L,p=0.06)及血糖(5.57±0.98mmol/L比4.93±0.63mmol/L, p=0.06)也均有上升趨勢。 3.長期吸煙組與不吸煙組相比,脈壓明顯增大(38.3±7.8mmHg比31.9±4.6mmHg, p=0.02),總膽紅素(TBil,10.27±3.70umol/L比14.13±4.24umol/L, p=0.04)及直接膽紅素(DBil,3.39±1.06umol/L比4.70±1.51umol/L, p=0.03)均明顯降低。 4.單次吸煙后,HDL中SAA含量明顯升高(15.66±7.8ng/μg比10.10±4.8ng/μg, p 0.001);而長期吸煙組與單次吸煙組相比,則含量明顯下降(7.75±2.1ng/μg比15.66±7.8ng/μg, p0.001)。 5.長期吸煙組的LDL基礎(chǔ)OD值明顯高于不吸煙組(0.28±0.06比0.21±0.03,p=0.01),也明顯高于單次吸煙組(0.28±0.06比0.20±0.06,p=0.02)。 6.長期吸煙組的LDL氧化速度達峰時間明顯短于不吸煙組(40.5±9.3min比53.8±12.5min, p=0.016),也明顯短于單次吸煙組(40.5±9.3min比57.50±14.9min, p=0.007)。 7.單次吸煙后,HDL+LDLpool的氧化遲滯時間(Tlag)有下降的趨勢(87.3±5.8min比91.6±7.7min, p=0.093);而長期吸煙組與不吸煙組相比,則顯著延長(98.3±5.3min比91.63±7.7min, p=0.032),與單次吸煙組相比,也顯著延長(98.3±±5.3min比87.3±5.8min, p0.01)。 8.單次吸煙后,HDL+LDLpool的氧化速度達峰時間有下降的趨勢(131.3±±7.4min比126.3±6.4min, p=0.10);而長期吸煙組與不吸煙組相比,則顯著延長(139.2±±7.9min比131.3±7.4min, p=0.038),與單次吸煙組相比,也顯著延長(139.2±7.9min比126.3±6.4min, p0.01)。 9.不吸煙組與單次吸煙組相比,血清PON-1活性沒有顯著差異(0.21±0.05U/μL比0.21±0.05U/μL,p=0.90)；而長期吸煙組分別與不吸煙組(0.21±0.05U/μL比0.2±0.05U/μL,p=0.23)和單次吸煙組(0.2±0.05U/μL比0.21±0.05U/μL,p=0.30)相比,其血清PON-1活性也均無明顯差異。 10.單次吸煙后,經(jīng)LDL孵育的THP-1細胞遷移數(shù)沒有明顯變化(58±13/視野比63±10/視野,p=0.21)；而長期吸煙組與不吸煙組相比,有升高的趨勢(69±11/視野比55±13/視野,p=0.07)。 11.單次吸煙后,經(jīng)HDL+LDLpool孵育的THP-1細胞遷移數(shù)有升高的趨勢(21±6/視野比16±4/視野,p=0.09)；而長期吸煙組與不吸煙組相比,THP-1細胞遷移數(shù)無明顯差異(17±4/視野比1±4/視野,p=0.63),而與單次吸煙組相比,則有下降的趨勢(17±4/視野比21±6/視野,p=0.09)。 結(jié)論： 1.單次吸煙后,機體處于急性應(yīng)激及炎癥狀態(tài),表現(xiàn)為收縮壓、脈壓、心率、ALT及HDL上SAA的濃度明顯上升,舒張壓、AST、血糖有上升趨勢。 2.單次吸煙后,HDL的抗氧化和抗炎癥功能均下降,可能與HDL中SAA含量明顯升高有關(guān)； 3.長期吸煙者處于慢性氧化應(yīng)激及炎癥狀態(tài),表現(xiàn)為血液中TBil及DBil等抗氧化物質(zhì)水平明顯降低,LDL氧化嚴重,LDL及HDL氧化易感性升高。 4.長期吸煙者,可能由于機體存在適應(yīng)性代償機制,使其HDL抗LDL氧化的能力明顯升高,但這并不能糾正長期吸煙導致的體內(nèi)氧化應(yīng)激狀態(tài),而且HDL本身的氧化易感性也同時升高。 5.長期吸煙者,LDL促細胞遷移的能力有升高的趨勢,可能與LDL的促炎癥作用增強有關(guān)。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R363

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 黃維義,曹林生,賀立群,馮義柏,曾秋棠,李裕舒;吸煙對血清總膽紅素濃度的影響及其在致冠心病中的作用[J];臨床心血管病雜志;1999年08期

，

本文編號：2457962