【摘要】： 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?瘧疾是由瘧原蟲感染引起的,最為嚴(yán)重的寄生原蟲感染性疾病。全球瘧疾流行區(qū)域正以驚人的速度不斷擴(kuò)展,嚴(yán)重的瘧疾疫情正是造成發(fā)展中國(guó)家兒童高死亡率和成人高發(fā)病率的主要原因。而瘧原蟲抗原變異和耐藥性原蟲的出現(xiàn),又進(jìn)一步阻礙了瘧疾疫苗的研制和抗瘧藥物的開(kāi)發(fā)。因此,進(jìn)一步闡明誘導(dǎo)抗瘧保護(hù)性免疫應(yīng)答的相關(guān)機(jī)制,無(wú)疑將為瘧疾的有效控制提供必須的前提依據(jù)。 嚙齒類瘧原蟲感染小鼠為深入探討抗人瘧保護(hù)性免疫應(yīng)答機(jī)制,提供了一種寶貴的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。約氏瘧原蟲(Plasmodium yoelii 17XL,P.yoelii 17XL)感染的不同小鼠,會(huì)呈現(xiàn)不同的Th1細(xì)胞免疫應(yīng)答模式,因而導(dǎo)致其出現(xiàn)自愈和死亡兩種截然相反的感染結(jié)局。因此,瘧疾感染早期Th1細(xì)胞免疫應(yīng)答的有效建立明顯影響著感染進(jìn)程和最終結(jié)局。然而,目前關(guān)于參與調(diào)控宿主抵抗紅內(nèi)期瘧疾感染的Th1細(xì)胞免疫應(yīng)答的相關(guān)機(jī)制尚不明確。 表達(dá)不同模式識(shí)別受體(pattern recognition receptors,PRRs)Toll樣受體(Toll-like receptors,TLRs)的樹(shù)突狀細(xì)胞(Dendritic ceils,DCs),在T細(xì)胞活化和適應(yīng)性免疫應(yīng)答建立過(guò)程中,發(fā)揮著舉足輕重的作用。有研究已經(jīng)證實(shí),DCs可分為髓樣DCs(CD11c~+CD11b~+)和漿樣DCs(CD11c~+CD45R/B220~+)兩種不同亞群,兩者在病原體刺激下通常呈現(xiàn)不同的增殖模式。體外的研究也進(jìn)一步表明,DCs可選擇性吞噬瘧原蟲寄生的紅細(xì)胞(pRBC),加工和提呈瘧原蟲抗原給CD4~+T細(xì)胞進(jìn)而誘導(dǎo)保護(hù)性Th1細(xì)胞免疫應(yīng)答的建立。這一結(jié)果充分提示,作為抗原提呈細(xì)胞(Antigen Present Cell,APC)的DCs在瘧疾感染過(guò)程中可能發(fā)揮重要作用。然而,其它的研究卻顯示,瘧原蟲感染明顯抑制DCs的活化和功能的發(fā)揮。 我們利用成功建立的P.yoelii 17XL感染的BALB/c和DBA/2鼠瘧模型,分析了參與抗瘧免疫應(yīng)答調(diào)控的相關(guān)因素。前期的研究結(jié)果顯示,兩種小鼠由于誘導(dǎo)Th1細(xì)胞免疫應(yīng)答的能力不同,因而呈現(xiàn)易感和抵抗兩種不同的應(yīng)答模式。為探討Pyoelii 17XL感染早期易感和抵抗小鼠Th1細(xì)胞免疫應(yīng)答的差異是否與DCs的調(diào)控作用具有一定的相關(guān)性,本研究動(dòng)態(tài)觀察了感染早期DCs細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)TLR的表達(dá)水平、亞群的增殖變化、表面及共刺激分子的表達(dá)水平和細(xì)胞因子的分泌模式,以期闡明DCs在瘧疾感染早期的作用地位及其相關(guān)機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)方法 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其模型構(gòu)建 6-8周齡、雌性BALB/c和DBA/2小鼠,經(jīng)腹腔分別感染1×10~6 P.yoelii 17XL寄生的紅細(xì)胞(pRBC),構(gòu)建不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。 2、采用流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)易感和抵抗小鼠感染早期脾臟DCs細(xì)胞內(nèi)TLR9和細(xì)胞表面TLR4的表達(dá)水平 (1)無(wú)菌取出感染前(0d)和感染后第3d、5d小鼠脾臟,常規(guī)方法制備脾細(xì)胞懸液,用0.17 mol/L NH_4Cl裂解紅細(xì)胞。以含10%胎牛血清(FCS)的RPMI 1640調(diào)整脾細(xì)胞終濃度為1×10~7/ml。每份樣品用抗-CD11c-FITC單克隆抗體和抗-TLR9-PE單克隆抗體進(jìn)行雙色分析,另設(shè)陰性對(duì)照管。預(yù)先加入FcγⅢ/Ⅱ封閉抗體的流式細(xì)胞儀專用染色管中加入脾細(xì)胞懸液0.1ml,再加入抗-CD11c-FITC單克隆抗體進(jìn)行表面染色。按試劑說(shuō)明書所示,進(jìn)行固定和透膜后,再分別加入biotinylated anti-TLR9單克隆抗體和PE-conjugated streptavidin。離心去上清后,洗滌兩次,靜置15 min,流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。 (2)每份樣品用抗-CD11c-FITC單克隆抗體和抗-TLR4-PE單克隆抗體進(jìn)行雙色分析,另設(shè)陰性對(duì)照管。在預(yù)先加入FcγⅢ/Ⅱ封閉抗體的流式細(xì)胞儀專用染色管中加入脾細(xì)胞懸液0.1ml,再加入抗-CD11c-FITC單克隆抗體和抗-TLR4-PE單克隆抗體進(jìn)行表面染色。離心去上清后,洗滌兩次,靜置15 min,流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。 3、采用流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)易感和抵抗小鼠感染早期脾臟DCs亞群的數(shù)量及細(xì)胞表面MHCⅡ類分子和共刺激分子CD40、CD80的表達(dá)水平 (1)每份樣品用抗-CD11c-FITC單克隆抗體、抗-CD11b-PE單克隆抗體和抗-CD45R/B220-PerCP單克隆抗體進(jìn)行三色分析,另設(shè)陰性對(duì)照管。預(yù)先加入FcγⅢ/Ⅱ封閉抗體的流式細(xì)胞儀專用染色管中加入脾細(xì)胞懸液0.1 ml,再加入抗-CD11c-FITC單克隆抗體、抗-CD11b-PE單克隆抗體和抗-CD45R/B220-PerCP單克隆抗體進(jìn)行表面染色。離心去上清后,洗滌兩次,靜置15 min,流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。 (2)每份樣品用抗-CD11c-FITC單克隆抗體和抗-MHCⅡ-PE單克隆抗體或抗-CD40-PE單克隆抗體或抗-CD80-PE單克隆抗體進(jìn)行雙色分析,另設(shè)陰性對(duì)照管。在預(yù)先加入FcγⅢ/Ⅱ封閉抗體的流式細(xì)胞儀專用染色管中加入脾細(xì)胞懸液0.1 ml,再加入抗-CD11c-FITC單克隆抗體和抗-MHCⅡ-PE單克隆抗體或抗-CD40-PE單克隆抗體或抗-CD80-PE單克隆抗體進(jìn)行表面染色。離心去上清后,洗滌兩次,靜置15 min,流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。 4、采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)感染早期易感和抵抗小鼠DCs培養(yǎng)上清中IL-12p40以及免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子IL-10和TGF-β1的含量 (1)脾DCs的純化及培養(yǎng)分別于感染前和感染后第3d和5d常規(guī)無(wú)菌取出小鼠脾臟,用1 mg/ml膠原酶Ⅳ(Sigma Aldrich)37℃作用30 min,以0.17mol/L NH_4Cl裂解紅細(xì)胞。以含10%胎牛血清(FCS)的RPMI 1640調(diào)整脾細(xì)胞終濃度為1×10~7/ml。按照小鼠脾DCs純化試劑盒(BD Pharmingen San Diego,CA)說(shuō)明書所示,從小鼠脾細(xì)胞懸液中陰性選擇純化脾DCs。生物素標(biāo)記的小鼠DCs純化雞尾酒抗體能夠識(shí)別除了DCs以外的所有白細(xì)胞表面表達(dá)的抗原并與之結(jié)合。鏈酶親和素標(biāo)記的磁珠可以與生物素標(biāo)記的雞尾酒抗體特異性結(jié)合。因?yàn)檫@兩種試劑在純化DCs過(guò)程中,并不與DCs直接作用,因而可以避免DCs的異�；罨�。具體操作如下:20×10~6個(gè)脾細(xì)胞首先與2.4G2 mAb冰上共同孵育15 min,阻斷Fc受體。每1×10~6個(gè)脾細(xì)胞加入5μl生物素標(biāo)記的小鼠DCs純化雞尾酒抗體,冰上孵育15 min,洗滌、離心后,再加入5μl鏈酶親和素標(biāo)記的磁珠,6～12℃冷藏作用30 min。將標(biāo)記細(xì)胞轉(zhuǎn)移至17×100mm圓底實(shí)驗(yàn)管中,并置于細(xì)胞分選器中作用8 min。仔細(xì)吸取上清(即為純化的DCs),并置于無(wú)菌管中。用抗-CD11c-FITC單克隆抗體標(biāo)記純化的DCs,經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)確定,CD11c~+DCs純度可達(dá)到約70～85%。將脾DCs終濃度調(diào)整為1×10~6/ml,于24孔培養(yǎng)板中,每孔加入500μl,培養(yǎng)48 h后,收集培養(yǎng)上清,-80℃保存,待IL-12p40、IL-10和TGF-β1檢測(cè)。 (2)用雙抗體夾心ELISA法對(duì)小鼠脾DCs培養(yǎng)上清中IL-12p40、IL-10和TGF-β1的含量分別進(jìn)行檢測(cè),酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處OD值。應(yīng)用SoftMax Pro 4.3.1LS軟件分析,繪制標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算細(xì)胞因子含量(pg/ml)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1、易感和抵抗小鼠感染早期脾臟DCs細(xì)胞內(nèi)TLR9和細(xì)胞表面TLR4表達(dá)水平的比較 BALB/c和DBA/2小鼠表達(dá)TLR9的CD11c~+ DCs的數(shù)量從感染后第3d開(kāi)始均明顯升高,并于感染后第5d達(dá)到最高水平,但在任一時(shí)間點(diǎn),兩者比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與感染前的對(duì)照組相比,BALB/c和DBA/2小鼠在感染后第3d和第5d表達(dá)TLR4的CD11c~+ DCs的數(shù)量均未見(jiàn)有意義的變化。 2、易感和抵抗小鼠感染早期脾臟DCs亞群數(shù)量的比較 BALB/c和DBA/2小鼠脾臟CD11c~+CD11b~+DCs的數(shù)量從感染后第3d開(kāi)始均明顯升高,并于感染后第5d達(dá)到最高水平。在感染后第3d,BALB/c小鼠脾臟CD11c~+CD11b~+DCs的數(shù)量明顯低于DBA/2小鼠。與此相反,兩種小鼠脾臟CD11c~+CD45R/B220~+DCs的數(shù)量在感染后3～5d,盡管也呈逐漸增高趨勢(shì),但BALB/c小鼠CD11c~+CD45R/B220~+DCs的數(shù)量在感染后第3d和第5d均顯著高于DBA/2小鼠。 3、易感和抵抗小鼠感染早期脾臟DCs細(xì)胞表面MHCⅡ類分子和共刺激分子CD40、CD80表達(dá)水平的比較 BALB/c和DBA/2小鼠表達(dá)MHCⅡ類分子和CD40分子的CD11c~+DCs的數(shù)量從感染后第3d開(kāi)始均明顯升高,并于感染后第5d達(dá)到最高水平。在感染后第3d和第5d,BALB/c小鼠表達(dá)MHCⅡ類分子和CD40分子的CD11c~+DCs的數(shù)量明顯低于DBA/2小鼠。與此同時(shí),DBA/2小鼠表達(dá)CD80分子的CD11c~+DCs的數(shù)量從感染后第3d開(kāi)始迅速升高,并于感染后第5d達(dá)到峰值水平。而BALB/c小鼠表達(dá)CD80分子的CD11c~+DCs的數(shù)量?jī)H在感染后第5d明顯升高,但其水平明顯低于DBA/2小鼠。 4、易感和抵抗小鼠感染早期脾臟DCs培養(yǎng)上清中IL-12p40以及免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子IL-10和TGF-β1的含量比較 感染后第3d,DBA/2小鼠DCs培養(yǎng)上清中IL-12p40的水平迅速升高,感染后第5d盡管呈下降趨勢(shì),但仍明顯高于正常水平。相比,BALB/c小鼠DCs培養(yǎng)上清中IL-12p40的水平在感染后第3d和第5d均未見(jiàn)有意義的升高,而且其水平均明顯低于DBA/2小鼠。 兩種小鼠DCs培養(yǎng)上清中IL-10和TGF-β1水平在感染后第3～5d均明顯升高,但BALB/c小鼠DCs培養(yǎng)上清中IL-10和TGF-β1水平明顯高于DBA/2小鼠。 結(jié)論 1、P.yoelii 17XL感染早期,TLR9是介導(dǎo)小鼠DCs活化的重要模式識(shí)別受體。 2、P.yoelii 17XL感染早期,易感BALB/c小鼠和抵抗DBA/2小鼠DCs亞群的分化模式存在顯著差異。 3、P.yoelii 17XL感染早期,易感BALB/c小鼠和抵抗DBA/2小鼠成熟表型的特征性分子MHCⅡ類分子、CD40和CD80分子在表達(dá)水平和時(shí)相上均存在顯著差異。 4、P.yoelii 17XL感染早期,DCs可通過(guò)分泌IL-12啟動(dòng)感染早期Th1細(xì)胞免疫應(yīng)答的建立。 5、P.yoelii 17XL感染早期,DCs可通過(guò)分泌免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子IL-10和TGF-β調(diào)節(jié)Th1細(xì)胞免疫應(yīng)答的水平和效應(yīng)強(qiáng)度。 6、P.yoelii 17XL感染早期,DCs是決定Th1細(xì)胞免疫應(yīng)答有效建立的關(guān)鍵免疫效應(yīng)細(xì)胞之一。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 曾春蘭;鐘正賢;盧文杰;王娟;李善斌;李祥江;;大葉千斤拔的藥理作用研究[J];中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2011年07期

2 連雪科;肖百全;黃遠(yuǎn)鏗;歐慧瑜;梁惠嬋;楊威;;電刺激鼠尾實(shí)驗(yàn)條件的探討[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2011年20期

3 李美玲;劉鳳姣;劉玲;;小鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志;2011年06期

4 蔡琳;劉瑩;叢峰;王秋雨;;膳食纖維復(fù)合沖劑及其輔劑的降血糖作用研究[J];食品與藥品;2011年05期

5 王冬梅;陳偉;;銀杏葉提取物對(duì)小鼠耐缺氧作用的影響[J];社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志;2011年12期

6 蘇健裕;沈會(huì)平;石磊;劉國(guó)琴;唐昭;溫葉明;;吐瀉肚痛膠囊急性毒性的研究[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2011年06期

7 李潤(rùn)峰;何蓉蓉;栗原博;陳建新;;蘋果多酚體內(nèi)外抗甲型流感病毒作用[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年14期

8 向志光;林樹(shù)柱;董娜;袁偉;徐艷峰;秦川;;結(jié)核分枝桿菌感染小鼠的脾臟和肺臟組織荷菌量與病理變化[J];中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志;2011年08期

9 王紅梅;王世平;譚壯生;趙超英;李國(guó)君;鄭珊;;14種國(guó)產(chǎn)香煙煙霧提取物的體內(nèi)外毒性比較試驗(yàn)[J];毒理學(xué)雜志;2011年04期

10 程瀾;;新一代免疫抑制劑依維莫司對(duì)db/db小鼠的腎臟保護(hù)作用[J];心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志;2011年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 賈丹兵;李乃民;劉珊;李春杰;張永豐;;參姜鎖陽(yáng)益氣片的急性毒性實(shí)驗(yàn)研究[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)診斷專業(yè)委員會(huì)2009’年會(huì)論文集[C];2009年

2 張偉;馮娟;陳煒;張小娟;袁樹(shù)民;廉虹;張連峰;;系統(tǒng)表達(dá)HB-EGF轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[A];實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與藥理學(xué)、毒理學(xué)研究學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2009年

3 宋根娣;柴保國(guó);趙衛(wèi)東;李春麗;鄭振宇;;卵子突變基因在小鼠早期胚胎發(fā)育過(guò)程中作用機(jī)理研究[A];中國(guó)動(dòng)物遺傳育種研究進(jìn)展——第十五次全國(guó)動(dòng)物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2009年

4 閔靜;;竹節(jié)參皂苷抗炎作用的實(shí)驗(yàn)性研究[A];2009年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第九屆中國(guó)藥師周論文集[C];2009年

5 陳福偉;楊國(guó)宇;李宏基;郭豫杰;魯維飛;;小鼠脂肪組織中孤啡肽及其受體基因表達(dá)的研究[A];全國(guó)動(dòng)物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2010年

6 劉向前;吳少庭;秦莉;袁仕善;黃達(dá)娜;雷明軍;潘暉榕;林綺萍;張仁利;高世同;劉能保;;幾種SARS DNA疫苗對(duì)Balb/c小鼠重要器官影響的組織病理學(xué)研究[A];全國(guó)寄生蟲學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

7 李文麗;梁欣;海春旭;;光氣誘導(dǎo)小鼠肺水腫的凋亡相關(guān)基因表達(dá)[A];2008陜西省環(huán)境與健康論壇論文集[C];2008年

8 張玉仙;王文利;陳耀星;王子旭;李然;張凡健;;不同濃度大蒜溶液對(duì)小鼠小腸黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞數(shù)量變化影響的研究[A];新型疫苗研發(fā)及基因工程疫苗應(yīng)用研討會(huì)論文集[C];2010年

9 趙剛;倪婭;徐云丹;;一種基于實(shí)驗(yàn)新理念的小鼠微核實(shí)驗(yàn)方法[A];基因開(kāi)啟未來(lái)：新時(shí)代的遺傳學(xué)與科技進(jìn)步——湖北省遺傳學(xué)會(huì)第八次代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2009年

10 劉玉龍;周劍影;王國(guó)權(quán);戴宏;段瑩瑩;郭曉葵;李元;;人重組白細(xì)胞介素-8(rhIL-8)對(duì)受照小鼠抗放作用的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)學(xué)分會(huì)第三次全中國(guó)青年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2001年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 王雪飛;日本：用冷凍小鼠克隆健康小鼠[N];健康報(bào);2008年

2 記者 杜華斌　張巍巍;科學(xué)家成功創(chuàng)建小鼠痛苦表情指數(shù)[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

3 阿倫;小鼠標(biāo)也人性化[N];中國(guó)信息報(bào);2003年

4 張?bào)?南京專家建立可調(diào)控小鼠生物鐘模型[N];江蘇科技報(bào);2010年

5 王鳳梅;上�；蛐∈笊硎捞矫豙N];遼寧日?qǐng)?bào);2003年

6 編譯 傳說(shuō);科學(xué)家鑒定可能會(huì)脫發(fā)的基因[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

7 常麗君;哈佛育出能“聞”出光線的小鼠[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

8 鄒德慶 記者 馬云霄;克隆的小鼠名叫“哈爾濱”[N];黑龍江日?qǐng)?bào);2005年

9 辛華;小鼠神經(jīng)元讓機(jī)器人“聽(tīng)話”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

10 黃敏;吃鹽也上癮[N];新華每日電訊;2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 周蓮娣;香菇多糖對(duì)約氏瘧原蟲感染BALB/c小鼠紅內(nèi)期免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2008年

2 劉琰;五羥色胺對(duì)小鼠社會(huì)行為的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2008年

3 馬寧;小鼠神經(jīng)行為測(cè)試組合建立及鄰苯二甲酸二異丁酯對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶影響的研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2011年

4 王芳;應(yīng)激和豐富環(huán)境及1-脫氧野尻霉素對(duì)小鼠衰老相關(guān)行為改變的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

5 張斌;適于微米切片的小鼠全腦標(biāo)本制備方法研究[D];華中科技大學(xué);2011年

6 鄭偉;樹(shù)突狀細(xì)胞在約氏瘧原蟲感染早期作用的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

7 許袖;谷胱甘肽過(guò)氧化物酶3在小鼠圍著床期子宮中的表達(dá)、調(diào)節(jié)與功能[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

8 吳憶;CD4～+CD25～+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在瘧疾感染中作用的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2006年

9 馮秋婷;PDK1在小鼠心血管發(fā)育過(guò)程中的作用和機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

10 張松林;誘導(dǎo)受體產(chǎn)生一氧化碳減輕小鼠移植心缺血再灌注損傷和排斥反應(yīng)的機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 熊會(huì)海;針灸中藥對(duì)腫瘤模型小鼠細(xì)胞免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津中醫(yī)學(xué)院;2003年

2 楊煒曦;新肌纖生成調(diào)節(jié)因子MR-1基因功能的初步探討[D];吉林大學(xué);2004年

3 趙學(xué)明;雙重套式PCR對(duì)小鼠桑椹胚OPS法冷凍后性別鑒定[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

4 代小華;醋酸棉酚對(duì)小鼠精母細(xì)胞中染色體配對(duì)行為的影響[D];河南大學(xué);2005年

5 井小會(huì);人參皂甙Rg3治療小鼠惡性腹腔積液的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2007年

6 廖海艷;一氧化氮對(duì)小鼠胚胎植入的影響[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

7 曲玉秀;兩種遺傳工程小鼠的檢測(cè)、鑒定與種質(zhì)保存方法的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

8 顧克菊;免疫抑制宿主Toll樣受體表達(dá)及對(duì)煙曲霉菌感染免疫應(yīng)答[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

9 陳永衛(wèi);肝癌微波治療后殘留腫瘤生物學(xué)特性的變化及對(duì)機(jī)體的影響[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2005年

10 劉玉香;二氧化硫?qū)π∈髱追N臟器超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞因子水平的影響[D];山西大學(xué);2005年

，

本文編號(hào)：2430712