【摘要】： 糖尿病在臨床上是一種常見病多發(fā)病,并發(fā)癥多,患者的生活質(zhì)量受嚴重影響。目前糖尿病的治療手段有注射胰島素,胰島移植,干細胞移植等。常規(guī)療法中注入胰島素只具有降低血糖的作用,而糖尿病的細胞治療不止是單純的降血糖,其根本在于恢復機體調(diào)節(jié)血糖的功能。干細胞在特定的環(huán)境下,具有分化為各種組織、器官的潛能性。因此,利用干細胞誘導分化后的胰島細胞移植治療糖尿病,成為一種新的途徑。 本實驗以人胚胎肝臟組織中分離出的多潛能干細胞為研究對象,在高糖環(huán)境下,利用bFGF,胰升血糖素樣肽和尼克酰胺在體外誘導分化成胰島素分泌細胞。然后通過形態(tài)學檢測,RT-PCR,雙硫腙染色,免疫熒光染色等對其進行胰島素分泌功能和活性的檢測,從而研究人胚胎多潛能干細胞經(jīng)誘導分化為胰島素分泌細胞的潛能和可能性機制。結(jié)果顯示:在高糖型DMEM培養(yǎng)環(huán)境和bFGF、GLP-1、煙酰胺的作用下,人胚胎多潛能干細胞可以分化為胰島素分泌細胞,RT-PCR可以檢測到胰島素基因、Somatostain和PDX-1的表達,雙硫腙染色呈陽性,且胰島素的分泌受到外環(huán)境中葡萄糖濃度的變化。本實驗初步探索了人胚胎多潛能干細胞向胰島素分泌細胞的誘導分化,為糖尿病治療提供了新的種子細胞來源。
[Abstract]:Diabetes mellitus (DM) is a common disease with many complications, and its quality of life is seriously affected. At present, the treatment of diabetes is insulin injection, islet transplantation, stem cell transplantation and so on. The effect of insulin injection in conventional therapy is only to reduce blood sugar, but the cell therapy of diabetes is not only hypoglycemia, but also restore the function of regulating blood sugar. Stem cells have the potential to differentiate into various tissues and organs in a specific environment. Therefore, transplantation of islet cells induced by stem cells has become a new approach in the treatment of diabetes mellitus. In this study, multipotent stem cells isolated from human embryonic liver tissue were used to differentiate into insulin-secreting cells in vitro using bFGF, glucagon like peptide and nicotinamide. Then the function and activity of insulin secretion were detected by morphological examination, RT-PCR, dithizone staining and immunofluorescence staining. To study the potential and possible mechanism of differentiation of human embryonic pluripotent stem cells into insulin secreting cells. The results showed that human embryonic pluripotent stem cells could differentiate into insulin-secreting cells under high glucose DMEM culture environment and bFGF,GLP-1, nicotinamide, and RT-PCR could detect the expression of insulin gene, Somatostain and PDX-1. Dithizone staining was positive and insulin secretion was affected by glucose concentration in external environment. In this study, the induction and differentiation of human embryonic pluripotent stem cells into insulin-secreting cells were preliminarily explored, which provided a new source of seed cells for the treatment of diabetes.
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R329

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