【摘要】：目的探討人體外周血樹突狀細(xì)胞在體外培養(yǎng)誘導(dǎo)其成熟的方法,通過得到成熟的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),對樹突狀細(xì)胞功能的研究奠定實驗基礎(chǔ).方法通過Ficoll-Hypaque梯度離心法得到單個核細(xì)胞,再誘導(dǎo)使其分化、擴(kuò)增、純化形成穩(wěn)定的樹突狀細(xì)胞,通過樹突狀細(xì)胞自身形態(tài)、特異性表型,抗原攝取能力,鑒別培養(yǎng)的細(xì)胞,從而得到具有典型特征的樹突狀細(xì)胞.結(jié)果樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)第7天,加入LPS后,倒置顯微鏡及掃描電鏡下觀察,樹突狀細(xì)胞成熟中,細(xì)胞胞質(zhì)增大,細(xì)胞膜表面能形成大量樹突狀突起,表面標(biāo)志物CD80、CD86、CD11c、HLA-DR的表達(dá)增高(P0.05),共聚焦顯微鏡下,成熟的樹突狀細(xì)胞對抗原的吞噬能力減弱.結(jié)論Ficoll-Hypaque梯度離心法能夠得到穩(wěn)定的樹突狀細(xì)胞體外培養(yǎng)體系.
[Abstract]:Objective to investigate the method of inducing human peripheral blood dendritic cells to mature in vitro, and to establish the experimental foundation for the study of the function of dendritic cells by obtaining mature cell culture techniques. Methods Mononuclear cells were obtained by Ficoll-Hypaque gradient centrifugation, then induced to differentiate, amplify and purify into stable dendritic cells. The dendritic cells were identified by their own morphology, specific phenotype, ability of antigen uptake and identification of cultured cells. Thus, dendritic cells with typical characteristics were obtained. Results the dendritic cells were cultured on the 7th day. After the addition of LPS, the cytoplasm of dendritic cells increased, and a large number of dendritic processes were formed on the surface of the dendritic cells, and the surface marker CD80,CD86,CD11c, was observed by inverted microscope and scanning electron microscope. The expression of HLA-DR was increased (P0.05), and the phagocytosis of mature dendritic cells to antigen was decreased under confocal microscope. Conclusion Ficoll-Hypaque gradient centrifugation can obtain a stable dendritic cell culture system in vitro.
【作者單位】： 昆明市第一人民醫(yī)院肝膽胰一科;
【基金】：云南省科技廳-昆明醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合專項基金資助項目(2011FZ299)
【分類號】：R392.12

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2406307