【摘要】：目的:建立大豆苷的快速免疫分析檢測方法。方法:該研究通過大豆苷單克隆抗體與葛根素、蘆丁等共9種中藥小分子的交叉反應(yīng)證明該抗體具有特異性,并以制備出的大豆苷特異性單克隆抗體為基礎(chǔ),建立了大豆苷間接競爭酶聯(lián)免疫分析方法(Ic-ELISA),并用此方法檢測大豆中大豆苷的含量。結(jié)果:抗體與葛根素的交叉反應(yīng)率為115%,與蘆丁、甘草酸、梔子苷等小分子無交叉反應(yīng)。該方法線性范圍為10~10 000 ng·m L-1,孔內(nèi)差和板間差均小于6.3%,平均回收率為105.4%%。采用該方法檢測大豆中大豆苷的含量,所得結(jié)果與HPLC法的結(jié)果一致。結(jié)論:該研究建立了大豆苷的Ic-ELISA方法,可為含大豆苷的中藥及復(fù)方的質(zhì)量控制分析提供更加快速靈敏的檢測方法。
[Abstract]:Objective: to establish a rapid immunoassay method for detection of daidzein. Methods: the cross-reaction of daidzein monoclonal antibody with puerarin, rutin and other Chinese medicine small molecules proved that the antibody was specific and based on the prepared daidzein specific monoclonal antibody. An indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay (Ic-ELISA) was established for the determination of daidzein in soybean. Results: the cross reaction rate between antibody and puerarin was 115, and there was no cross reaction with rutin, glycyrrhizic acid, geniposide and other small molecules. The linear range of the method is 10 ~ 10 000 ng ml ~ (-1), the difference between holes and plates is less than 6.3, and the average recovery is 105.4%. The content of daidzein in soybean was determined by this method, and the results were consistent with those obtained by HPLC method. Conclusion: a Ic-ELISA method for the determination of daidzein was established, which can provide a more rapid and sensitive method for the quality control analysis of daidzein in traditional Chinese medicine and compound.
【作者單位】： 北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院;北京中醫(yī)藥大學(xué)"經(jīng)典方劑的應(yīng)用基礎(chǔ)研究"創(chuàng)新團(tuán)隊(duì);北京中醫(yī)藥大學(xué)科研實(shí)驗(yàn)中心;北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81373542,81274043)
【分類號】：R392-33

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本文編號：2383176