【摘要】： 豚鼠是一種應用廣泛的實驗動物�？梢杂糜诿庖邔W、傳染病、藥物學、兒科學等方面的研究。無菌豚鼠在生物醫(yī)學實驗中因為排除了病原體和環(huán)境因素的影響,受抗原刺激時,免疫反應強烈且單一,因此在生命科學研究中有著廣闊的應用前景。1932年Reyniers獲得無菌豚鼠。我所自1980年開始研究無菌豚鼠并培育成功,為我國無菌豚鼠的發(fā)展和應用奠定了基礎。但限于當時的生物醫(yī)學發(fā)展水平,國內對無菌豚鼠的需求較少,而沒能進行規(guī)范化培育與推廣、應用。隨著生命科學的發(fā)展和生物醫(yī)學的進步,重大疾病特別是重大傳染病研究的深入,無菌豚鼠將逐漸顯示出其重要價值。 EV71是一種含有正向RNA單鏈無包膜病毒,屬于腸道病毒屬,小核糖核酸病毒科。EV71和CA10、CA16等共屬于A性腸道病毒,容易引起手足口病。但是EV71的感染有時會產生嚴重的神經系統(tǒng)疾病,如無菌性腦炎、腦干腦炎、和脊椎灰質炎相似的麻痹。自1974年首次報道以來，，EV71已在世界范圍內引起十多次爆發(fā)與流行。例如澳大利亞、歐洲、亞洲和美國。近年來在亞太地區(qū)有上升的趨勢。雖然HFMD的流行性很強,但是對其致病機理以及感染后比較醫(yī)學方面的研究很少。其主要原因之一是EV71很難感染動物,制作成穩(wěn)定的動物模型。并且國內外建立成功的動物模型多為出生七日以內的乳鼠,難以采集血液、器官材料進行比較醫(yī)學方面的研究。 基于以上理由,本論文開展了無菌豚鼠制作技術的規(guī)范化和無菌豚鼠EV71比較醫(yī)學的研究。 無菌豚鼠制作技術的規(guī)范化實驗采取子宮摘除術的方法對普通級豚鼠進行剖腹凈化,在無菌隔離器內剝離子宮取仔,用人工哺乳的方法將仔豚鼠培育成無菌豚鼠,并每隔一段時期進行無菌檢測。以保證無菌豚鼠的質量。同時對孕豚鼠、豚鼠子宮摘除手術日期、豚鼠人工乳、人工飼料等進行對比選擇。40日左右時,分別對動物心臟取血,自動生化分析儀測定無菌豚鼠、普通級豚鼠血液學參數。比較三組動物血常規(guī)、血生化有無差異。為無菌豚鼠的應用和推廣奠下基礎。 無菌豚鼠EV71比較醫(yī)學研究實驗利用第一部分得到的無菌豚鼠作為模型動物,利用多種接種方法接種病毒。分別進行臨床觀察、病原學檢查,用來驗證動物感染動物模型成立。同時對不同組感染后動物模型的一些免疫指標如：EV71特異性抗體,動物基礎性IgG、IgA、IL-2、IL-6水平及CD4/CD8變化進行比較分析。感染了EV71的無菌豚鼠出現(xiàn)皰疹、腹瀉等臨床癥狀,普通豚鼠無明顯的臨床癥狀。病原學檢測無菌豚鼠100%感染病毒,在多個組織中可檢測到病毒；普通豚鼠病毒檢出率低并無明顯的規(guī)律性。免疫學檢測中,首次發(fā)現(xiàn)無菌豚鼠在EV71感染后血清中無特異性抗體產生,但是基礎抗體值增加；普通豚鼠血清中檢測出特異性抗體,且基礎抗體值增高程度較無菌豚鼠高,具體原因不明。CD4/CD8比值升高,且CD4、CD8細胞數均有不同程度的降低。皰疹出現(xiàn)處的組織有明顯的水腫現(xiàn)象,無炎性因子浸潤。結果表明無菌豚鼠更易感染EV71病毒。無菌豚鼠和普通豚鼠在感染病毒后免疫指標檢測結果差異大,需要進一步的探討其原因。本文首次嘗試使用無菌豚
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【學位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R-332

【參考文獻】

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1 顧為望,王洪濤,張嘉寧,李建軍,林繼紅,王若宇,魏冬,詹純列;封閉群FMMU白化豚鼠與短毛三色豚鼠血液成分比較[J];中國實驗動物學報;1997年01期

本文編號：2254852