【摘要】：目的:探尋小鼠睪丸支持細(xì)胞不同發(fā)育階段和功能狀態(tài)下的特異性標(biāo)志蛋白。方法:通過對小鼠睪丸組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色和實(shí)時(shí)定量(real-time)RT-PCR,觀察受精后16 d胚胎(E16)到出生后6周的雄性小鼠睪丸組織蛋白和m RNA表達(dá)。結(jié)果:雄激素受體(AR)在出生后1周、2周、6周小鼠的睪丸支持細(xì)胞、外周小管肌樣細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞核內(nèi)都有表達(dá),且表達(dá)量逐漸增強(qiáng),但在E16不表達(dá);Wilms腫瘤基因(WT1)在E16、出生后1周、2周、6周的睪丸支持細(xì)胞細(xì)胞核內(nèi)表達(dá),但不表達(dá)于其它細(xì)胞;苗勒氏管抑制素(AMH)在E16、出生后2周的睪丸支持細(xì)胞胞質(zhì)中表達(dá),而在出生后6周不表達(dá);β-鏈蛋白(β-catenin)和胞質(zhì)緊密粘連蛋白-1(Zo-1)是血睪屏障特異性蛋白,出生后2周時(shí)它們分布于整個(gè)曲細(xì)精管,而出生后4周時(shí)規(guī)則地分布于靠近外壁的一圈,此時(shí)它們的血睪屏障已經(jīng)完全建立。Real-time PCR分析睪丸組織m RNA表達(dá),佐證了這些結(jié)果。結(jié)論:WT1可以作為支持細(xì)胞的特異性標(biāo)志,而AMH則標(biāo)記不成熟的睪丸支持細(xì)胞;AR單獨(dú)不適合作為睪丸支持細(xì)胞的標(biāo)志物,但與其他標(biāo)志物結(jié)合,可能可區(qū)分睪丸支持細(xì)胞的成熟與否。而通過β-catenin和Zo-1染色,可以判斷血睪屏障是否完全形成,為支持細(xì)胞是否成熟提供判斷標(biāo)記。
[Abstract]:Objective: to explore the specific marker proteins of mouse testicular Sertoli cells in different developmental stages and functional states. Methods: immunohistochemical staining and real-time quantitative (real-time) RT-PCR were used to detect the expression of protein and mRNA in testis of male mice from 16 days after fertilization (E16) to 6 weeks after birth. Results: the expression of androgen receptor (AR) in testicular Sertoli cells, peripheral tubuloid cells and interstitial nuclei of mice at 1 week, 2 weeks and 6 weeks after birth was gradually increased. However, the Wilms tumor gene (WT1) was not expressed in the Sertoli nuclei of testis in E16, but not in other cells, and AMH was expressed in the cytoplasm of Sertoli cells 2 weeks after birth. 尾 -catenin and cytoplasmic compact adhesion protein 1 (Zo-1) are blood-testis barrier specific proteins, which are distributed throughout the seminiferous tubules at 2 weeks after birth, and regularly in a circle near the outer wall at 4 weeks after birth. By this time, their blood-testis barrier had been completely established. Real-time PCR was used to analyze the expression of mRNA in testis, which confirmed these results. Conclusion: WT1 can be used as a specific marker for Sertoli cells, and AMH for immature Sertoli cells alone is not suitable as a marker of testicular Sertoli cells, but combined with other markers. It may be possible to distinguish the maturation of testicular Sertoli cells. 尾 -catenin and Zo-1 staining can be used to determine whether the blood-testis barrier is completely formed and provide a marker for the maturation of Sertoli cells.
【作者單位】： 廈門大學(xué)物理與機(jī)電工程學(xué)院;廈門大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助(基金編號31171375)
【分類號】：R339.21

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 王玉萍;石玉琴;李好文;劉長江;楊克敵;;p,p’-DDE和β-BHC對大鼠支持細(xì)胞卵泡刺激素受體的影響[J];環(huán)境與健康雜志;2011年02期

2 嚴(yán)茂勝;王玉萍;石玉琴;莫昕;王璨;周君;全超;劉長江;楊克敵;;p,p’-DDE和β-六氯化苯對青春期大鼠睪丸組織波形蛋白和N-鈣粘蛋白及卵泡刺激素受體mRNA和蛋白表達(dá)的影響[J];環(huán)境與健康雜志;2012年07期

3 殷金龍;徐淵;吳斌;;五子衍宗復(fù)方對睪丸支持細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷和細(xì)胞凋亡的影響[J];中華男科學(xué)雜志;2013年03期

4 劉曉珍;王小銀;黃丹菲;謝明勇;;壬基酚異構(gòu)體對小鼠Sertoli TM4細(xì)胞內(nèi)黏著連接、雄激素結(jié)合蛋白和抑制素B的影響[J];南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(理科版);2013年05期

5 胡青;楊嬌艷;高宇;郭威;李大鵬;;黃鱔WT1基因序列分析及在性腺發(fā)育過程中的表達(dá)[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年01期

6 劉歡歡;陳曦;余樹民;宋品;沈留紅;曹隨忠;左之才;馬曉平;;以GDNF為核心的哺乳動(dòng)物精原干細(xì)胞調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2015年03期

7 王俊龍;楊施;田汝輝;朱子玨;郭英;袁青青;何祖平;李錚;;人精原干細(xì)胞分離、培養(yǎng)與鑒定[J];中華男科學(xué)雜志;2015年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 李海龍;櫛孔扇貝（Chlamys farreri）Wnt4，β-catenin及Dax1基因的克隆及其與性腺發(fā)育相關(guān)性的研究[D];中國海洋大學(xué);2013年

2 李明輝;羅非魚基因敲除技術(shù)的建立及其在性別決定與分化研究中的應(yīng)用[D];西南大學(xué);2014年

3 高飛;WT1基因下調(diào)對豬卵母細(xì)胞和早期胚胎發(fā)育的影響[D];吉林大學(xué);2014年

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 薛社普 ,宗書東 ,蘇樹蕓 ,吳[?婉 ,劉毅 ,周增樺 ,馬希信;棉酚對大鼠抗精子發(fā)生作用的細(xì)胞學(xué)、放射自顯影及超微結(jié)構(gòu)的觀察[J];中國科學(xué);1979年09期

2 邵桐蓀;張炳常;葉惟三;游美梅;;醋酸棉酚對人體精子的影響——精子的細(xì)胞學(xué)、細(xì)胞化學(xué)及電鏡的觀察[J];解剖學(xué)報(bào);1982年02期

3 王代學(xué);游美梅;薛社普;;棉酚對大鼠生精上皮支持細(xì)胞影響的電鏡觀察[J];解剖學(xué)報(bào);1982年02期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 郭杰;方南洙;李鐘淑;任利強(qiáng);;睪丸支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能及研究進(jìn)展[J];畜牧獸醫(yī)雜志;2008年01期

2 ;六、曲細(xì)精管的支持細(xì)胞和血睪屏障[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1978年02期

3 白咸勇;丁蔚;都興海;;睪丸支持細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1992年02期

4 朱培元,黃宇烽;支持細(xì)胞功能和分化的激素調(diào)控[J];中華男科學(xué);2001年01期

5 劉民;羅蘭;;睪丸支持細(xì)胞功能的研究進(jìn)展[J];實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);2012年01期

6 胡志剛,張適,沙家豪;棉酚對睪丸支持細(xì)胞緊密連接的影響[J];南京醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1985年02期

7 葛秀國;張偉;丁向彬;李吉霞;;成年犬睪丸支持細(xì)胞體外分離培養(yǎng)的研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2014年15期

8 上官芳芳,史小林;睪丸支持細(xì)胞的功能及其應(yīng)用的探討[J];解剖學(xué)報(bào);2002年04期

9 胡承閱;配子細(xì)胞對支持細(xì)胞的黏附及細(xì)胞間相互作用[J];國外醫(yī)學(xué)(計(jì)劃生育分冊);2003年02期

10 采克俊;劉莉;丁海雷;張易祥;丁志麗;張念慈;;雞胚睪丸支持細(xì)胞的分離、純化與鑒定[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2008年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 陳小玉;;睪丸支持細(xì)胞功能研究進(jìn)展[A];中國環(huán)境誘變劑學(xué)會(huì)致癌專業(yè)委員會(huì)09年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

2 葉世雋;陳詠梅;;支持細(xì)胞中微絲對精子發(fā)生調(diào)控的研究[A];中國動(dòng)物學(xué)會(huì)全國顯微與亞顯微形態(tài)科學(xué)（細(xì)胞及分子顯微技術(shù)科學(xué)）分會(huì)第十一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2002年

3 采克俊;張易祥;丁海雷;丁志麗;張念慈;劉莉;;18天雞胚睪丸支持細(xì)胞的分離純化與鑒定[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨青年學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2007年

4 鄭明華;林海龍;陳永平;;睪丸支持細(xì)胞與移植[A];2008年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

5 吳應(yīng)積;羅奮華;旭日干;;絨山羊睪丸支持細(xì)胞與生殖細(xì)胞的長期培養(yǎng)和觀察[A];第十屆全國生殖生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

6 周莉;吳純啟;馬華智;廖明陽;;羥基脲對大鼠Sertoli-germ細(xì)胞共培養(yǎng)的影響[A];2006年全國藥物毒理學(xué)會(huì)議論文集[C];2006年

7 周銀濤;王鮮忠;周玉蘭;趙伯川;陳永軍;張家驊;;仔豬睪丸組織在出生后早期細(xì)胞增殖能力變化[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)產(chǎn)科學(xué)分會(huì)第五屆全體會(huì)議第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

8 孔慶學(xué);江紅;段翠密;李洪波;吳靖芳;韓曉明;王常勇;;微重力條件下胰島與睪丸支持細(xì)胞共培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];提高全民科學(xué)素質(zhì)、建設(shè)創(chuàng)新型國家——2006中國科協(xié)年會(huì)論文集（下冊）[C];2006年

9 鄭明華;林海龍;陳永平;;睪丸支持細(xì)胞與移植[A];第十次浙江省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

10 米美玲;鄒挺;楊蓓;熊明娣;王晶磊;徐斯凡;;睪丸支持細(xì)胞與大鼠海馬細(xì)胞培養(yǎng)作用的初步研究[A];Proceedings of the 7th Biennial Meeting and the 5th Congress of the Chinese Society for Neuroscience[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 李天舒;干細(xì)胞功能下降可致人類衰老[N];健康報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張勇;缺氧對于大鼠原代支持細(xì)胞的損傷作用和機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2013年

2 江小華;支持細(xì)胞依賴的結(jié)構(gòu)和功能對小鼠生殖細(xì)胞發(fā)育影響的研究[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2014年

3 周德榮;棉酚對睪丸支持細(xì)胞間隙連接蛋白43表達(dá)的調(diào)節(jié)作用的研究[D];汕頭大學(xué);2009年

4 邱志群;鄰苯二甲酸二丁酯和苯并[a]芘對大鼠睪丸支持細(xì)胞的聯(lián)合毒性研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

5 汪秀星;兒童時(shí)期腮腺炎病毒感染導(dǎo)致成年男性不育與支持細(xì)胞的蛋白質(zhì)異戊二烯化修飾的改變相關(guān)[D];南京大學(xué);2013年

6 宋楊;P，p'-DDE誘導(dǎo)ROS在線粒體和MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的作用[D];華中科技大學(xué);2009年

7 張順;MTA2在睪丸支持細(xì)胞中的表達(dá)及功能研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 張明;鎘誘導(dǎo)仔豬睪丸支持細(xì)胞凋亡及機(jī)理研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

9 李潔;雄性小鼠睪丸支持細(xì)胞中Attractin的功能研究[D];華中科技大學(xué);2009年

10 季佳佳;CS_2致男（雄）性下丘腦—垂體—性腺軸功能紊亂機(jī)制初探及NO的干預(yù)作用[D];華中科技大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 武海軍;犢牛睪丸支持細(xì)胞的分離培養(yǎng)及其對淋巴細(xì)胞的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2007年

2 王冰冰;五味子中殘留農(nóng)藥對睪丸支持細(xì)胞的毒性研究[D];哈爾濱商業(yè)大學(xué);2013年

3 田歡;睪丸支持細(xì)胞對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和遷移影響的基礎(chǔ)研究[D];華東理工大學(xué);2014年

4 王勇梅;鄰苯二甲酸二丁酯損傷大鼠睪丸支持細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2011年

5 石之虎;鎘對大鼠睪丸支持細(xì)胞的損傷及黃芪的拮抗作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

6 張波;超聲靶向微泡破壞對支持細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

7 李周;鈷60-γ射線致小鼠睪丸支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)及功能的損害[D];鄭州大學(xué);2013年

8 趙吉存;不同溫度下大鼠睪丸支持細(xì)胞膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)生長因子的表達(dá)[D];青島大學(xué);2014年

9 李翠珍;苯并（a）芘對大鼠睪丸支持細(xì)胞連接蛋白基因表達(dá)的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

10 孫紅艷;小鼠支持細(xì)胞重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

，

本文編號：2133757