本文選題：子宮內(nèi)膜細(xì)胞 + 免疫細(xì)胞��； 參考：《西北農(nóng)林科技大學(xué)》2009年碩士論文

【摘要】： 本試驗(yàn)建立了小鼠子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞(Endometrial Epithelial Cells, EECs)和基質(zhì)細(xì)胞(Endometrial Stromal Cells, ESCs)的分離培養(yǎng)體系,探討了小鼠子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞的分離純化方法,并研究了EECs和ESCs培養(yǎng)上清液對小鼠脾淋巴細(xì)胞、山羊和豬外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC)轉(zhuǎn)化和分泌活性的影響。為闡明子宮內(nèi)膜細(xì)胞對免疫系統(tǒng)的影響提供試驗(yàn)依據(jù),獲得了以下結(jié)果: 1.小鼠子宮內(nèi)膜經(jīng)1.5 g/L膠原酶Ⅱ消化1.5 h,采用過濾-低速離心-自然沉降的方法分離單個(gè)細(xì)胞和團(tuán)塊樣細(xì)胞團(tuán)。將分離得到的單個(gè)細(xì)胞用含10%新生牛血清的D-MEM/F-12在37℃,體積分?jǐn)?shù)為5%CO_2條件下培養(yǎng)。接種培養(yǎng)0.5 h后開始貼壁,細(xì)胞呈梭形和三角形,4 d左右可長成單層,波形蛋白檢測陽性,角蛋白檢測陰性,證明此為基質(zhì)細(xì)胞,純度達(dá)95%以上。將分離得到的葡萄串狀腺團(tuán)用含10%新生牛血清的D-MEM/F-12在37℃,體積分?jǐn)?shù)為5%CO_2條件下培養(yǎng)。接種培養(yǎng)24 h后開始貼壁生長,腺團(tuán)向外部擴(kuò)散,生長2~3 d,細(xì)胞擴(kuò)散并出現(xiàn)明顯的鋪路石狀,4~5 d腺團(tuán)基本擴(kuò)散開來并呈一定走向繼續(xù)生長,細(xì)胞免疫組化染色角蛋白的陽性,純度達(dá)95%以上。 2.證明小鼠EECs和ESCs培養(yǎng)上清液單獨(dú)作用時(shí)能夠顯著刺激小鼠脾淋巴細(xì)胞以及山羊和豬的PBMC轉(zhuǎn)化; EECs和ESCs培養(yǎng)上清液分別和植物血凝素(Phytohemagglutimin,PHA)混合作用時(shí)能夠抑制PHA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞和PBMC增殖作用。提示子宮內(nèi)膜細(xì)胞可通過旁分泌作用影響淋巴細(xì)胞以及PBMC的活性,參與子宮免疫平衡的調(diào)節(jié)。 3.EEC和ESC培養(yǎng)上清單獨(dú)作用既可無種屬差異的刺激白細(xì)胞介素2(Interleukin-2,IL-2)分泌,又能刺激白介素4(Interleukin-4, IL-4)的分泌;EECs和ESCs培養(yǎng)上清液和PHA混合作用時(shí)抑制PHA誘導(dǎo)的IL-2的分泌,而促進(jìn)PHA誘導(dǎo)的IL-4的分泌。提示EECs、ESCs對淋巴細(xì)胞的作用是非特異的,可能主要刺激Th2型細(xì)胞的活化和分泌功能,而抑制由抗原誘導(dǎo)的Th1型淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化,這種作用在小鼠、豬、山羊之間沒有種屬差異。表明EECs、ESCs在子宮局部內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)中可以發(fā)揮調(diào)節(jié)性作用,這種特性可能對于胚胎附植有重要意義。
[Abstract]:In this experiment, the isolation and culture systems of mouse endometrial epithelial cells (EECs) and stromal cells (ESCs) were established, and the methods of isolation and purification of mouse endometrial glandular epithelial cells and stromal cells were studied. The effects of EECs and ESCs culture supernatants on the transformation and secretion of peripheral blood mononuclear cells (PBMCCs) from mouse spleen lymphocytes, goat and pig peripheral blood mononuclear cells were studied. In order to elucidate the effect of endometrial cells on the immune system, the following results were obtained: 1. Mouse endometrium was digested by 1.5 g / L collagenase 鈪，

本文編號(hào)：2002916