發(fā)布時(shí)間：2018-05-29 10:54

  本文選題：幽門(mén)螺桿菌 + 培養(yǎng)　； 參考：《揚(yáng)州大學(xué)》2008年碩士論文

【摘要】： 目前世界上感染幽門(mén)螺桿菌的人越來(lái)越多,傳統(tǒng)的抗生素療法由于耐藥株的增多限制了它的治療效果,尋找高效、低毒、廉價(jià)的抗幽門(mén)螺桿菌( Helicobacter pylori, H.pylori)的防治方法已經(jīng)迫在眉捷。本試驗(yàn)以幽門(mén)螺桿菌NCTC11637為材料,采用不同培養(yǎng)基對(duì)H.pylori進(jìn)行培養(yǎng),以研究不同培養(yǎng)基對(duì)H.pylori生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明:(1)采用固體培養(yǎng)H.pylori時(shí),在微需氧條件下,培養(yǎng)基分別為哥倫比亞瓊脂+混合抗生素+6%脫纖維山羊血,哥倫比亞瓊脂+混合抗生素+6%兔血清, 37℃培養(yǎng)4d,均可培養(yǎng)出H.pylori;在嚴(yán)格無(wú)菌的條件下,不添加混合抗生素,培養(yǎng)基為哥倫比亞瓊脂+6%兔血清,對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)沒(méi)有影響,且不會(huì)造成雜菌污染。(2)采用液體培養(yǎng)H.pylori時(shí),培養(yǎng)基為布氏肉湯基礎(chǔ)加混合抗生素和6%山羊血清, H.pylori增菌迅速。菌株采取冷凍保存液法保存于- 70℃- 80℃低溫條件下,可以成功復(fù)蘇。 利用蒙古沙土鼠(MG)建立H.pylori NCTC11637株胃內(nèi)感染模型。感染方法有兩種,一種方法是MG禁食18h后用50%酒精0.5ml預(yù)處理,6h后接種H.pylori,間隔12、24h分別再次接種。另一種方法的接種方法與前述的方法相同,但接種后每日口服雷尼替丁5mg/kg體重。胃內(nèi)接種H.pylori后,于第7d、15 d、35 d、45 d分別用幽門(mén)螺桿菌抗原酶聯(lián)免疫法診斷試劑盒、細(xì)菌培養(yǎng)和胃組織切片的方法檢測(cè)胃內(nèi)是否已感染,觀察MG胃內(nèi)細(xì)菌感染情況和胃病理組織學(xué)變化。結(jié)果表明,胃內(nèi)灌服酒精損傷胃粘膜與每日口服雷尼替丁相結(jié)合,在人工感染35 d后,胃內(nèi)有大量H.pylori感染定植,胃組織固有層有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和腸化生現(xiàn)象。 利用蒙古沙土鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,觀察H.pylori特異卵黃抗體對(duì)胃內(nèi)H.pylori感染的治療效果。實(shí)驗(yàn)鼠間隔48h兩次口服接種H.pylori(NCTC11637)布氏培養(yǎng)液1ml(1.15×108CFU),首次接種7 d后將實(shí)驗(yàn)鼠隨機(jī)分為四組(15只/組),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別灌服生理鹽水、復(fù)合抗菌素和抗H.pylori卵黃抗體,1次/天,連續(xù)12 d;Ⅳ組間隔48h皮下注射抗H.pylori卵黃抗體兩次。在用藥前實(shí)驗(yàn)鼠胃內(nèi)均有大量H.pylori定植,感染率100%;用藥后第14 d,Ⅱ組鼠的H.pylori清除率為60%;Ⅲ組、Ⅳ組鼠胃內(nèi)均有少量H.pylori存在。用藥25 d后,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的胃內(nèi)H.pylori清除率分別為80%、60%、60%。灌服和注射抗H.pylori卵黃抗體,可以抑制沙土鼠胃內(nèi)H.pylori感染,其抑制效果與抗菌素相似。 在成功研制出抗H.pylori卵黃抗體的基礎(chǔ)上,利用蒙古沙土鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,觀察抗H.pylori卵黃抗體對(duì)H.pylori感染的防制作用。實(shí)驗(yàn)鼠分為四組(36只/組),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別灌服生理鹽水、復(fù)合抗菌素和抗H.pylori卵黃抗體,連續(xù)14 d。Ⅳ組皮下注射抗H.pylori卵黃抗體,1次/天,每間隔48h后注射1次,連續(xù)預(yù)防兩周。在首次用藥后第8d口服接種幽門(mén)螺桿菌(NCTC11637)2.75×108CFU(布氏培養(yǎng)液),連續(xù)口服4 d。在接種后第23、30、45 d,Ⅰ組鼠胃內(nèi)均有大量H.pylori定植,感染率100%;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的感染率低于44%。灌服和注射抗H.pylori卵黃抗體,可以抑制沙土鼠感染H.pylori,其抑制效果與抗菌素組無(wú)明顯差異(p0.05)。
[Abstract]:The results showed that : ( 1 ) Under the condition of strict aseptic condition , the medium is Columbia agar + mixed antibiotic + 6 % rabbit serum , and the culture medium is Columbia agar + 6 % rabbit serum . The culture medium is Columbia agar + 6 % rabbit serum .


Methods Two kinds of methods were established for the establishment of H . pylori NCTC11637 strain in the stomach . Two kinds of methods were used . One method was to pre - treat the gastric mucosa with 50 % alcohol for 18 h . After 6 hours inoculation , it was inoculated with H . pylori .


The effect of H . pylori - specific yolk antibody on H . pylori infection in stomach was observed by using Mongolian gerbil as an experimental animal . After 7 days of administration , H . pylori eradication rate was 80 % , 60 % and 60 % respectively in group 鈪，

本文編號(hào)：1950618