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陰道毛滴蟲核酶嵌合型病毒載體FRzS的構(gòu)建

發(fā)布時間:2018-05-28 11:53

  本文選題:陰道毛滴蟲 + 病毒載體; 參考:《吉林大學》2009年碩士論文


【摘要】: 本研究用肝浸湯培養(yǎng)基對陰道毛滴蟲攜病毒株進行了體外純培養(yǎng);將包含兩個鐵氧化還原蛋白短臂的錘頭狀核酶插入到陰道毛滴蟲病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染載體pTVV289/NEO+MCS/TVV174中,構(gòu)建了核酶嵌合型陰道毛滴蟲病毒載體FRzS(為短反義序列,上游24nts,下游19nts);經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄電穿孔的方法轉(zhuǎn)染到陰道毛滴蟲體內(nèi),通過蟲體計數(shù)、光學顯微鏡觀察的方法觀察其對蟲體的影響。結(jié)果顯示,陰道毛滴蟲滋養(yǎng)體在轉(zhuǎn)染后4d內(nèi),轉(zhuǎn)染蟲體數(shù)量顯著低于正常對照組(P0.01);顯微鏡觀察顯示轉(zhuǎn)染蟲體變形。表明核酶嵌合型陰道毛滴蟲病毒載體FRzS對蟲體的生長、細胞形態(tài)均有顯著影響。本試驗成功構(gòu)建了陰道毛滴蟲核酶嵌合型病毒載體FRzS,為進一步研究Fd蛋白在陰道毛滴蟲體內(nèi)的生理功能提供了途徑,為陰道毛滴蟲病毒載體在毛滴蟲細胞生物進化和分子生物學等研究中的應用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In this study, Trichomonas vaginalis carrying virus strain was cultured in vitro on liver-immersed decoction medium, and hammerhead ribozyme containing two iron redox protein short arms was inserted into the stable transfection vector pTVV289/NEO MCS/TVV174 of Trichomonas vaginalis virus. A ribozyme chimeric Trichomonas vaginalis virus vector FRzSwas constructed, which was transfected into Trichomonas vaginalis by electroporation in vitro. The effect of optical microscope on insect body was observed. The results showed that the number of trophozoites of Trichomonas vaginalis was significantly lower than that of the control group within 4 days after transfection, and the deformation of the transfected trophozoites was observed by microscope. The results showed that ribozyme chimeric trichomonas vaginalis virus vector FRzS had a significant effect on the growth and cell morphology of the parasite. In this study, we successfully constructed the vector FRzS of Trichomonas vaginalis ribozyme, which provided a way to further study the physiological function of FD protein in Trichomonas vaginalis. The results laid a foundation for the application of Trichomonas vaginalis virus vector in Trichomonas vaginalis cell biological evolution and molecular biology.
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2009
【分類號】:R382.21

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本文編號:1946604

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