本文選題：胰腺干細(xì)胞 + 移植��； 參考：《醫(yī)學(xué)綜述》2015年02期

【摘要】：目的探討分離、培養(yǎng)及初步鑒定新生大鼠胰腺干細(xì)胞的方法。方法取30只無特定病原體(SPF)級(jí)新生大鼠的胰腺組織,用完整胰腺膠原酶消化法分離胰島。以低糖改良Eagel培養(yǎng)液為基礎(chǔ)培養(yǎng)液,于不同時(shí)期分別添加血清、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒添加劑、白血病抑制因子、神經(jīng)干細(xì)胞原代培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)因子B27、神經(jīng)元培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)因子N2等進(jìn)行培養(yǎng),倒置相差顯微鏡下觀察其形態(tài)學(xué)特征及生長(zhǎng)特性。應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)法對(duì)培養(yǎng)不同時(shí)期的細(xì)胞進(jìn)行巢蛋白(Nestin)及細(xì)胞角質(zhì)蛋白19(CK-19)檢測(cè),并進(jìn)行初步鑒定。結(jié)果 1新生大鼠胰腺內(nèi)纖維組織少,體積小,完整胰腺膠原酶消化法簡(jiǎn)化了胰島分離步驟,減少了污染機(jī)會(huì),有利于進(jìn)一步培養(yǎng)。2培養(yǎng)24 h可見細(xì)胞貼壁,但貼壁細(xì)胞數(shù)量較少,改用無血清培養(yǎng)后,貼壁細(xì)胞快速生長(zhǎng),10~15 d形成單層細(xì)胞匯集,細(xì)胞形態(tài)較一致。3培養(yǎng)所得細(xì)胞一直較多表達(dá)胰腺干細(xì)胞的標(biāo)志物Nestin,隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),表達(dá)CK-19的細(xì)胞數(shù)量逐漸增多。結(jié)論新生大鼠胰腺消化后,獲得的細(xì)胞于不同時(shí)期表達(dá)胰腺干細(xì)胞的標(biāo)志物Nestin、CK-19。
[Abstract]:Objective to investigate the method of isolation, culture and identification of pancreatic stem cells in neonatal rats. Methods Pancreatic tissues of 30 neonatal rats without specific pathogen were isolated by collagenase digestion. Serum, basic fibroblast growth factor (bFGF), epidermal growth factor (EGF), insulin-transferrin selenium additive, leukemia inhibitory factor were added in low glucose modified Eagel medium. The nutrition factor B27 in the serum-free culture medium of neural stem cells and N2 in the serum-free culture medium of neuron culture were cultured. The morphological characteristics and growth characteristics were observed under inverted phase contrast microscope. Nestin (Nestin) and CK-19 (cytokeratin 19) were detected by immunocytochemistry and identified preliminarily. Results 1Intrapancreatic fibrous tissue of neonatal rats was small and small. Collagenase digestion of intact pancreas simplified the separation of pancreatic islets, reduced the chance of contamination, and was beneficial to the adherence of visible cells to the cells cultured for 24 h in the further culture of .2 hours. However, the number of adherent cells was relatively small. After serum-free culture, monolayer cells converged after 10 15 days of rapid growth of adherent cells, and Nestin, a marker of pancreatic stem cells, was expressed more frequently in the cells cultured in a consistent form of 3. 3. The expression of Nestin in pancreatic stem cells was increased with the increase of culture time. The number of cells expressing CK-19 increased gradually. Conclusion after pancreatic digestion, Nestinine CK-19, a marker of pancreatic stem cells, was obtained in different stages of pancreatic digestion in neonatal rats.
【作者單位】： 內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院腫瘤外科;內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室;
【分類號(hào)】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1919386