體外誘導(dǎo)雞原始生殖細(xì)胞向精子分化的研究
本文選題:雞原始生殖細(xì)胞 + 維甲酸 ; 參考:《佳木斯大學(xué)》2014年碩士論文
【摘要】:目的:建立雞原始生殖細(xì)胞體外培養(yǎng)細(xì)胞系,體外誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞向精子分化,為干細(xì)胞研究應(yīng)用于臨床不育癥,提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。 方法:通過(guò)雞原始生殖細(xì)胞的體外培養(yǎng),利用維甲酸體外誘導(dǎo)雞原始生殖細(xì)胞向精子分化,運(yùn)用RT-PCR技術(shù)、免疫熒光技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、類(lèi)胚體及畸胎瘤的制備等細(xì)胞分子生物學(xué)技術(shù)手段,,對(duì)雞原始生殖細(xì)胞及誘導(dǎo)出的精子的生物學(xué)特性展開(kāi)研究。 結(jié)果:建立了穩(wěn)定的雞原始生殖細(xì)胞體外培養(yǎng)細(xì)胞系;分析了雞原始生殖細(xì)胞的分子生物學(xué)特性;制備了具有自主節(jié)律性收縮,最大直徑約440μm的類(lèi)胚體;建立了畸胎瘤雛雞模型;成功獲得了具有運(yùn)動(dòng)能力的精子。 結(jié)論:利用雞原始生殖細(xì)胞成功誘導(dǎo)出有運(yùn)動(dòng)能力精子的研究,為干細(xì)胞向精子誘導(dǎo)的機(jī)理研究,提供可靠的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型以及技術(shù)方法,能夠?yàn)楦杉?xì)胞向精子誘導(dǎo)應(yīng)用于臨床研究提供有力的佐證材料,為臨床上無(wú)數(shù)弱精癥、少精癥等不育患者帶來(lái)新的希望。
[Abstract]:Objective: to establish a culture cell line of chicken primordial germ cells in vitro, and to induce the differentiation of primordial germ cells into spermatozoa in vitro, and to provide basic theoretical basis for the application of stem cells in clinical infertility. Methods: chicken primordial germ cells were cultured in vitro, and spermatozoa differentiation was induced by retinoic acid in vitro. RT-PCR technique, immunofluorescence technique and flow cytometry were used to induce the differentiation of chicken primordial germ cells into spermatozoa. The biological characteristics of chicken primordial germ cells and induced spermatozoa were studied by means of cell molecular biological techniques such as the preparation of embryoid bodies and teratoma. Results: a stable chicken primordial germ cell culture cell line in vitro was established, the molecular biological characteristics of chicken primordial germ cells were analyzed, and the embryoid bodies with an autonomous rhythmic contraction with a maximum diameter of 440 渭 m were prepared. The teratoma chicken model was established and the motility spermatozoa was obtained successfully. Conclusion: the study of inducing motility spermatozoa from chicken primordial germ cells provides a reliable experimental animal model and technical method for the study of the mechanism of inducing stem cells to spermatozoa. It can provide strong supporting materials for the application of stem cells to the clinical study of spermatozoa induction, and bring new hope for countless infertile patients such as oligozoospermia and oligozoospermia.
【學(xué)位授予單位】:佳木斯大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類(lèi)號(hào)】:R321.1
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本文編號(hào):1918709
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