發(fā)布時間：2018-05-05 21:14

  本文選題：表皮干細(xì)胞 + 血清濃度��； 參考：《南京醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的 比較不同血清濃度培養(yǎng)體系對表皮干細(xì)胞增殖分化的影響。 方法 采用兩步酶消化法和Ⅳ型膠原差速貼壁相結(jié)合的方法獲得人原代表皮干細(xì)胞,分別以0%、5%、10%、15%和20%血清濃度的培養(yǎng)基在96孔板中進(jìn)行培養(yǎng)。觀察表皮干細(xì)胞形態(tài),克隆形成及增殖的情況,應(yīng)用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測各組細(xì)胞存活和生長情況,分析量效和時效關(guān)系;持續(xù)傳代培養(yǎng)細(xì)胞,每次傳代的同時取適量細(xì)胞,用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法進(jìn)行表皮干細(xì)胞和表皮細(xì)胞相應(yīng)標(biāo)志物(K19、K14和K10)的測定。 結(jié)果 表皮干細(xì)胞在各種血清濃度的培養(yǎng)基內(nèi)均能形成克隆,增殖良好。用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法測定,所得相同時間點(diǎn)各組OD值在統(tǒng)計(jì)學(xué)上沒有差異(P0.05),表皮干細(xì)胞生長速度各組間無差異。第1代表皮干細(xì)胞K19均有表達(dá),而K14和K10表達(dá)均為陰性;其后高血清濃度(15%、20%)培養(yǎng)基中細(xì)胞較低血清濃度(0%、5%)先出現(xiàn)K14、K10蛋白的表達(dá);培養(yǎng)至第10代是各組細(xì)胞均出現(xiàn)K10高表達(dá),而K19、K14表達(dá)陰性。 結(jié)論 在低血清濃度(0%、5%)的培養(yǎng)基中表皮干細(xì)胞生長良好,且能夠相對較好保持表皮干細(xì)胞的特性。
[Abstract]:Purpose The effects of different serum concentrations on the proliferation and differentiation of epidermal stem cells were compared. Method Human primary dermal stem cells were obtained by two-step enzyme digestion and differential adhesion of type 鈪，

本文編號：1849326