主動(dòng)外排系統(tǒng)介導(dǎo)鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性研究
本文選題:鮑曼不動(dòng)桿菌 + 主動(dòng)外排 ; 參考:《重慶醫(yī)科大學(xué)》2008年碩士論文
【摘要】: 鮑曼不動(dòng)桿菌(Acinetobacter baumannii,Ab)是一種條件致病菌,主要導(dǎo)致肺炎、泌尿系感染、腦膜炎等疾病,為重要的醫(yī)院感染病原菌。近年來隨著抗菌藥物的臨床廣泛應(yīng)用,其耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重。因此有關(guān)該菌對(duì)抗菌藥物耐藥機(jī)制的研究以及如何減少耐藥株的產(chǎn)生已成為當(dāng)前該領(lǐng)域關(guān)注的熱點(diǎn)。 研究表明,鮑曼不動(dòng)桿菌可以通過產(chǎn)生修飾酶、基因突變、整合子基因擴(kuò)散、菌膜通透性降低等多種方式形成對(duì)抗菌藥物的耐藥性。然而細(xì)菌耐藥的另一重要機(jī)制——藥物主動(dòng)外排機(jī)制在鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性中的作用尚未得以充分闡明。目前僅有少數(shù)研究初步證實(shí)了鮑曼不動(dòng)桿菌可能存在主動(dòng)外排泵AbeABC及AbeM,對(duì)主動(dòng)外排泵的編碼基因介導(dǎo)鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性研究未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過研究編碼主動(dòng)外排泵AbeABC的結(jié)構(gòu)基因adeB和編碼主動(dòng)外排泵AbeM的基因abeM在鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株中的分布與表達(dá),初步探討了主動(dòng)外排機(jī)制在介導(dǎo)鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性中的作用。 實(shí)驗(yàn)中采用瓊脂稀釋法檢測(cè)了8種臨床常用抗菌藥物對(duì)37株鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株的最低抑菌濃度( Minimal inhibitory concettrantion,MIC),測(cè)定了經(jīng)外排泵抑制劑碳酰氰基-對(duì)-氯苯腙(Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,CCCP)處理前后抗菌藥物MIC的變化,并采用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction,PCR)、逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)檢測(cè)所有實(shí)驗(yàn)菌株編碼主動(dòng)外排泵的基因及其表達(dá)水平。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株對(duì)多種臨床常用抗菌藥物均有不同程度的耐藥,且耐藥率高,并出現(xiàn)較多的多重耐藥菌。經(jīng)外排泵抑制劑CCCP處理后,抗菌藥物對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌MIC有不同程度降低。所有實(shí)驗(yàn)菌株均能檢測(cè)到編碼主動(dòng)外排系統(tǒng)的基因adeB和abeM,其多重耐藥株的編碼基因表達(dá)水平均明顯高于單一耐藥株(P0.05)和敏感菌株(P0.01)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥形勢(shì)嚴(yán)峻,多重耐藥性(Multidrug resistance,MDR)日趨明顯。多種臨床常用抗菌藥物對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株的體外抗菌活性差,8種抗菌藥物中僅碳青霉烯類對(duì)該菌有較強(qiáng)的抗菌活性。鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株普遍存在主動(dòng)外排泵,外排泵編碼基因adeB和abeM的高表達(dá)可能是導(dǎo)致鮑曼不動(dòng)桿菌發(fā)生多重耐藥的機(jī)制之一。
[Abstract]:In recent years , with the widespread use of antibacterial drugs , the drug resistance has become more and more serious in recent years . Therefore , the research on the mechanism of drug resistance to antibiotics and how to reduce the production of resistant strains has become a hot spot in the field .
In this study , the distribution and expression of AbeABC and AbeM genes encoding active efflux pumps have not been fully elucidated .
In the experiment , the minimal inhibitory concentration ( MIC ) of 8 clinically common antibacterial drugs against 37 strains of acinetobacter baumanii was detected by agar dilution method . The changes of MIC of antibacterial drug before and after treatment with efflux pump inhibitor carbamyl - p - chlorophenylhydrazone ( CCCP ) were determined . Polymerase chain reaction ( PCR ) , reverse transcription - polymerase chain reaction ( RT - PCR ) were used to detect the gene and expression level of active efflux pump .
The results showed that the clinical isolates of acinetobacter baumandii had different degrees of resistance to various clinical commonly used antibacterial drugs , and the drug resistance rate was high and multiple resistant strains appeared . After treatment with CCCP inhibitor , the MIC of the antibacterial drugs was reduced to some extent . All the experimental strains could detect the gene adeB and abeam of the active efflux system , and the expression level of the coding genes of the multiple resistant strains was significantly higher than that of the single resistant strain ( P0.05 ) and the sensitive strain ( P0.01 ) .
The results showed that the drug resistance of acinetobacter baumanii was severe and multidrug resistance ( MDR ) was more and more obvious .
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2008
【分類號(hào)】:R378.99
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