CYP2C19顯色型基因芯片的研究
發(fā)布時(shí)間:2018-04-25 08:57
本文選題:芯片分析技術(shù) + 多態(tài)性。 參考:《中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù)》2015年01期
【摘要】:目的提供一種基于顯色原理的CYP2C19基因芯片診斷方法。方法采用堿性磷酸酶促顯色原理設(shè)計(jì)制備固定有*2、*3檢測(cè)探針的CYP2C19基因芯片,通過EDTA抗凝外周血樣本提取基因組DNA,PCR擴(kuò)增CYP2C19*2、*3突變片段并與芯片在43℃雜交,經(jīng)洗滌、顯色后掃描獲取圖像,經(jīng)軟件分析輸出基因型并對(duì)基因芯片性能進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)。結(jié)果 CYP2C19顯色型基因芯片檢出限為20 ng基因組DNA;與基因組DNA同等濃度魚精DNA檢測(cè)信號(hào)陰性;用*2/*2、*1/*3基因型樣本重復(fù)檢測(cè)10次,結(jié)果一致;常見濃度的甘油三酯、總膽固醇、膽紅素和完全溶血對(duì)測(cè)定沒有影響。臨床三家醫(yī)院臨檢實(shí)驗(yàn)室對(duì)1000例臨床樣本的檢測(cè)與雙向測(cè)序方法比對(duì)驗(yàn)證,結(jié)果一致。結(jié)論為高通量基因診斷產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化提供了一種實(shí)用的技術(shù)選擇。
[Abstract]:Objective to provide a method of CYP2C19 gene chip diagnosis based on the principle of color rendering. Methods the CYP2C19 gene microarray was designed and fabricated by alkaline phosphatase chromogenic principle. Genomic DNA-PCR was extracted from peripheral blood samples of EDTA anticoagulant to amplify the mutation fragment of CYP2C19O2FN 3, and hybridized with the chip at 43 鈩,
本文編號(hào):1800646
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